海藻多糖的提取和抗I型单纯疮疹病毒研究
九一年三月《天然产物研究与开发}V91.3No.J
海藻多糖的提取和抗I型单纯疱疹病毒研究
魏永成罗福成刘惠德赖理任维朴
(中国科学院成都有机化学研究所成都610015)
郑民实李文
(江西医学院微生物学教研室江西330008)
摘要马尾藻经热水提取,乙醇沉淀.得到褐色粗多精.经作抗I型单纯疤客病毒控测
萋漳錾楚纽临床试验治疗单纯瘪疹角膜炎的有效率为84.7%.一一.’_,…,一
关键衙马尾藻.多糖.I型单窟毒
单纯疱疹病毒性角膜炎是一种常见的
传染性眼病,病毒可终身潜伏易反复发作
或致富.近年来,致病人数日益增多,约
病,甲状艨睇普功效=!L...眉内外学者
对其有效化学成份的提取,分离,组成结
构,生物活等行了大量研究”,-Tl.
本文报导了海藻多糖的提般襁_抗I煎单纯
疱疹病毒的研究.
材料和方法
一
,材料
1.海藻取自广东汕头,经中国科
学院南海海洋研究所鉴定为;--.
(1)亭氏马尾藻Sargassu~_hens—
lowianumC.Ag
(2)瓦氏马尾藻Sargas~umVac-
hellianumGrey
旺稿日期{9口年1i月15日
国家自热科学垂奎赞助项B
--通讯联善
(3)半叶马尾藻Sargassumhemi-
phyllum(Tute)C.Ag
2.原代人胚肌皮单层细胞取人工
流产术后胎儿的肌肉和皮肤,经消化,加
,入生长波(台IO小牛血清),37?孵育
4—5天.
3.病毒抹I型单纯疱疹病毒取自
中国药品生物制品检验所
:
.仪器试剂
垒自动高速冷冻离心机GL一20谰西
仪器仪
总厂}
离心沉淀机LXJ—I型上海医甩分
析仪器厂’
渗析管{
95%乙醇,化学纯,成都化学试钠厂
二,海蔫多糖的分离提取
按文献[6]工艺及改良工艺分离提取
得五个样品H,制造方法为粗选藻体
.
后将海藻粉碎,加水煮沸过滤,滤液在常
压下浓缩,乙醇沉淀离心(4000r,p,m).
Vo1.3No.1
_———_-—.-———一——…,一一’———一一
祝腚物经无水乙醇,乙醚洗涤后真空干燥
褥海藻多糖H.H系H经脱色处理所
得.脱色方法为将样品配成5的水溶液,’.
调节pH为8—9,『I.文献[酋]
方法测定其总糖含量为lO左右.
四,抗HSV—I试验
将海藻多糖供试前用无离子水配成
255Ct0’l1?02800-tsoo~,10000~g/ml
的10倍浓缩量,节pH为7?0,煮沸
j毒3o分钝后置于一40?保存备用.按
支藏[9]方|祛先散药物对瓤胞无毒界限检
盘,然后作同时,治疗,预防,管外四种
赞药途径试验及临床试验.
.
结暴与试论
一
,海藻多糖的制备条件
按不商制备条件得到H一五个样品,
经作抗HSV—I的药效l定(定性定量
试验),结果见表1.
定性试验t十出现细胞病变,无效(不进
行定量试验)
一
未出现细胞病变,有效(进
行定量试验)
完量试验t使用抑制病毒对数测定
袭T不同制备条件群品的抗_
HSV—I的效果
制备条件抗HSV-I试验’
嚣学减压透析f脱色一1000100浓缩分离.处理业垦
定性j定量定性窿重———r
Hl否否否一,I4.12一3.1
Hi否否是二2.9————————
HI是古是3.1:
H?是是一13.242.2
l—————,
H-是是是一l3.58+
‘璃效剥定
从表l中看出不经减压浓缩,透析和
脱色处理的H抗HSV—I的对数大予H一
H.减少以上处理过程可以节约原材料
和能源,.有科于降低制备成本..
=,海藻多糖不同蛤萄途径和剂量抗
HSV-I试验
用海藻多糖H进行了不同给药逮径
和帮盈抗HsV—I试验,结象见表2.
从结果可见同时,治疗,管外给药途
径的最低有效剂量分别为<25.g/ml(抑
病毒对数为2.45),<jOg/mI(2.5O],
<100t*g/m!(2.25),着按6种巧同剂量
(25,50,]0o,250,500,IO0Os/mi>
的平均对数值来初步评价4种绐药途径的
疗效时,同时给药途径(3.86)优于治疗
给药途径(3.29),治疗给药途径优于管
外给药途径(2.37),管外黯药途径忧予
预防造径(O.2).
放效效效
无低中高
???
一
,一,一
,OO000OO0一扎虬
>
VoT.3No.1
表2不舄给药途径和帮量的海藻攫取物对抗I型单纯疱疹病毒的抑
翻对数x?sD
紫药药物莉量(.’g/m1)
违径2550l00250{S0.to.0
——一一L—————.,
同时2.45士0.19I3.28?0.283.90士O.344.1O?0.29毒.55士
0.3I{.87?0.22
袍疗1.78?0.Il2.50?0.163.i5?0.253.54+O.2”1I4.26-I-o.38{.5{?o.30
…一’’.,
预防000.65?0.681-?士0?15Ij-27?oo09i.4i?o.13
——
3.oo+0.
25l3.s8~0.273.80士0.21管外o1.75士o.2i2.25士o.20
三,海藻多糖的临床试验
煽1海藻萝糖H治疗单纯疱疹病毒
性角膜炎]24例,结果见裘3.
衰3海藻多糖治疗单纯疱疹病毒角
跌炎疗效
治愈t溃疡愈台,FL(一),角膜内
层皱折,实质层浸凋水肿消失,食磬葡萄
慕裳者积浓因蓐泄失KP薄_本消失.
好转;溃疡部分愈合,积浓消失,嫡
灶缩小FL范围减小,浸润,水肿,皱
折,KP减短或减少.
不敢:各种病状改变不明显或加重.
参考文献
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POLYSACCHARIDEANDTYPEIANTIVIRUSOF
HERPESSIMPLEX
WeiYongchen8,LuoFucheng,LtuHuide,LaiLi,RenWeipu
<ChengduinstitUteo/OrganicChemistry,AcademiaSinioa
Chengdu010015)
ZhengMinsh~,LiWen
(7’口.chingandRes口.rchSestiono,Microbiology.,iangxi
Co~llegeo,Medicinjiangxi330008)
Abstract.
AetudepolysecCharidehasbeenobtainediromSazgassumbyextrac—
lionwithhotwaterandp~eciPirationwithalcoho1.Thepolysaceharide
i8higheffecttotyPeIanti—virusofherpessimplex.Theeffectiverate
fcuringkeratit曲fherpessimplexvirusi目84.7%.
Kfey,门?Sa~aasum.Polys~~eharldeypepevit?伯鲁of蝻f娜simplex.