四、中药制剂临床前药效学与安全性研究技术指导原则

四、中药制剂临床前药效学与安全性研究技术指导原则 根据《医疗机构制剂注册管理办法》,试行,的有关要求～参照国家食品药品监督管理局颁布的中药、天然药物研究技术指导原则～结合中药制剂的特点～制订本技术指导原则。其目的是指导医疗机构进行中药制剂的临床前药效学与安全其目的是指导医疗机构进行中药制剂的临床前药效学与安全性研究～明确免报该项研究资料的条件及范围～为中药制剂临床前有效性、安全性研究～为中药制剂临床前有效性、安全性评价提供明确统一的研究技术要求。 性评价提供明确统一的研究技术要求 (一)一般要求 1.实验管理 根据《中华人民共和国药品管理法》、《药品注册管理办法》～药物临床前安全性评价研究应遵循《药物非临床研究质量管理规范》,GLP,。 2.研究机构条件 研究机构必须是已在国内外相关机构注册,或备案,、从事药品安全性、有效性评价的具有法人资格的机构。应具有相关研究领域的设施设备及相关资质。 3.实验环境 应与实验动物级别相应的实验环境。实验动物使用单位必须是已经取得相应实验动物使用许可证的单位。 4.研究人员资质 所有参加研究的人员必须接受过相关领域的正规训练～其项目负责人必须是相关专业领域的副高职称及以上的人员。 5.试验样品/对照药物要求 临床前药效学与安全性研究试验所用样品～应当采用制备工艺稳定、符合临床试用质量的样品～并注明受试物的名称、来源、批号、含量,或规格,、保存条件及配制方法等。如果由于给药容量或给药方法限制～可采用原料药进行试验。应提供所用溶媒和/或辅料的批号、规格、生产厂家。对照药物原则上应采用已上市的、适应症相同或类似且疗效公认的药物。 6.试验设计 试验设计应符合随机、对照、重复的原则。 7.具体问题具体 中药制剂情况复杂～本指导原则不可能涵盖中药制剂临床前药效学与安全性 28 研究的全部实际情况～在进行研究时～应遵循“具体问题具体分析”的原则。 (二)不同类型制剂的研究技术要求 中药制剂临床前药效学与安全性研究内容应根据申报品种的立题依据、临床意义和定位、处方来源、使用历史、有效性与安全性等背景资料进行综合考虑。研究内容应以能够科学、合理、充分地评价制剂的临床前有效性与安全性为原则。在具体进行试验时可参照以下要求进行。 1.符合以下减免药理、毒理研究条件～可免报注册申报资料13、14、15 ,1,已有同品种获得制剂批准文号的中药制剂。 ,2,根据中医药理论组方～利用传统工艺配制,即制剂配制过程没有使原组方中治疗疾病的物质基础发生变化的,～且该处方在本医疗机构具有5年以上,含5年,使用历史的中药制剂。 ,3,利用传统工艺配制,即制剂配制过程没有使原组方中治疗疾病的物质基础发生变化的,的古代经典名方制剂～经典名方应经过专家认定。 2.以下情况可免报长期毒性试验资料～说明理由及依据 ,1,若处方中各味药材均符合法定标准～无毒性药材～无十八反、十九畏等配伍禁忌～又未经化学处理,水、乙醇粗提除外,～急性毒性试验,采用最大给药容量、最大给药浓度,未见明显毒性反应～临床实际用药期为1周以内者～可免报长期毒性试验。 ,2,皮肤刺激性、皮肤过敏性以及皮肤急性毒性试验结果未见明显毒性反应的外用制剂～可免报长期毒性试验。 ,3,增加适应症或主治病症的制剂～给药途径不变、不延长用药周期或/和不增加剂量者～可免报长期毒性实验。 3.符合以上1.,2,、,3,及2.,2,项～但如果有下列情况之一者需报送注册申报资料14、15 ,1,处方组成含有法定标准中标识有毒性或现代毒理学证明有毒性的药材。 ,2,处方组成含有十八反、十九畏配伍禁忌。 ,3,处方中的药味用量超过药品标准规定的。 (三)基本内容 1.药效学 预测药物疗效的重要手段就是围绕其拟定的临床适应症展开系列药效学评 29 价。药效学评价的方法应该遵照公认的或经验证后的方法、模型。根据药效学研究结果判定药物的作用强弱及主要作用特点～为临床应用提供科学参考。 ,1,实验动物 大鼠、小鼠应为清洁级以上的实验动物～家兔及豚鼠等动物应为普通级及以上动物。提供单位必须是已经取得相应实验动物生产合格证的单位。 ,2,动物模型 药效学评价尽量采用整体动物实验～尽量采用与拟治疾病相似或相近的成熟中医“证候”模型或疾病模型,如缺乏成熟的中医“证候”动物模型或疾病模型～则可通过观察药物的相近“功能,药理作用,”来评价药效。根据药物作用特点选择相应的动物模型～鼓励创新～但应有相应的试验数据支持。应围绕制剂的临床适应症选择最具代表性的2个,含2个,以上动物模型～对制剂的药效进行评价。 ,3,组别设臵 至少应设三个剂量组～同时还应设溶媒组以及已证明模型成功的阳性药物组。必要时须设正常对照组。每组动物数应符合统计学要求 ,4,检测指标选择 检测指标应与其临床适应症相匹配～且所检测的指标应能进行定量或半定量。 ,5,统计学处理 所有结果均应选择适宜的统计学方法进行分析～并科学表述。 ,6,结果表述 应选择合适的图、表进行表示～病理观察应有相应的病理照片佐证。 ,7,讨论 对结论应有简略的讨论～简要说明检测指标与疾病的关系～初步阐明药物的作用特点。 2.临床前安全性研究 ,1,急性毒性试验 急性毒性试验是研究动物一次或24小时内多次接受一定剂量的受试物～在一定时间内出现的毒性反应。其主要目的可以概括为以下5个方面:了解受试药急性毒性的强度、为药效学研究提供剂量参考、为临床毒副反应的监测及解救提供参考依据、为长期毒性、蓄积毒性试验选择剂量提供依据以及用于质量控制等。急性毒性试验处在药物毒理研究的早期阶段～对阐明药物的毒性作用和了解其毒性 30 靶器官具有重要意义。 ?实验动物 一般采用1，2种种属的实验动物进行～推荐使用小鼠或大鼠～雌雄各半～如临床为单性别用药～则可采用相对应的单一性别的动物。 对于所用的动物数～应根据动物的种属和研究目的来确定。动物数应符合试验方法及其结果分析评价的需要。 动物应符合国家有关规定的等级要求,清洁级或SPF级,～来源、品系、遗传背景清楚～并具有实验动物质量合格证。 通常采用健康成年动物进行试验。如果受试物拟用于儿童～建议考虑采用幼年动物。 动物初始体重不应超过或低于平均体重的20,。 ?试验分组 除设受试物的不同剂量组外～还应设空白和,或溶媒对照组。 ?给药途径 一般应与拟临床给药途径一致～如不采用拟临床途径给药～必须充分说明理由。经口给药前应禁食不禁水16小时。 ?给药容量 经口给药～大鼠给药容量一般每次不超过20ml/kg～小鼠一般每次不超过40ml/kg,其他动物及给药途径的给药容量可参考相关文献及根据实际情况确定。 ?观察期限 一般为14天～如果毒性反应出现较慢～应适当延长观察时间～如观察时间不足14天～应充分说明理由。观察的间隔和频率应适当～以便能观察到毒性反应出现的时间及其恢复时间、动物死亡时间等。 ?观察指标 包括动物体重变化、饮食、外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况及中毒反应,中毒反应的症状、严重程度、起始时间、持续时间、是否可逆,等。对濒死及死亡动物应及时进行大体解剖～其他动物在观察期结束后进行大体解剖～当发现器官出现体积、颜色、质地等改变时～则对改变的器官进行组织病理学检查。 ?结果处理和分析 根据所观察到的各种反应出现的时间、严重程度、持续时间等～分析各种反 31 应在不同剂量时的发生率、严重程度。根据观察结果归纳分析～考察每种反应的剂量-反应及时间-反应关系。 急性毒性试验一般测定LD50或最大给药量。 判断出现的各种反应可能涉及的组织、器官或系统等。 根据大体解剖中肉眼可见的病变和组织病理学检查的结果～初步判断可能的毒性靶器官。如组织病理学检查发现有异常变化～应附有相应的组织病理学照片。组织病理学检查应经检查者签名和病理检查单位盖章。 根据不同剂量组各种毒性反应及发生率、动物死亡情况等～确定动物对受试物的毒性反应的性质与强度。说明所使用的计算方法和统计学方法～必要时提供所选用方法合理性的依据。 应根据急性毒性试验结果～提示在其他安全性试验、临床试验、质量控制方面应注意的问题,同时～结合其他安全性试验、有效性试验及质量可控性试验结果权衡利弊～分析受试物的开发前景。 ,2,长期毒性试验 长期毒性试验是重复给药的毒性试验的总称～描述动物重复接受受试物后的毒性特征～它是非临床安全性评价的重要内容。其主要目的应包括以下5个方面:预测受试物可能引起的临床不良反应～包括不良反应的性质、程度、剂量-反应和时间-反应关系、可逆性等,推测受试物重复给药的临床毒性靶器官或靶组织,预测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围,提示临床试验中需重点监测的指标,为临床试验中的解毒或解救措施提供参考信息。 ?实验动物 推荐采用啮齿类动物如大鼠～必要时采用非啮齿类动物如犬～所用动物应符合国家有关药物非临床安全性研究的要求,清洁级或SPF级,。 长期毒性试验一般选择健康、体重均匀的动物～雌性应未孕。 原则上～动物应雌雄各半。当临床拟用于单性别时～可采用相应性别的动物。 应根据研究期限的长短和受试物的使用人群范围确定动物的年龄。一般情况下～大鼠为6?9周龄。 每组动物的数量应能够满足试验结果的分析和评价的需要。一般大鼠可为雌、雄各10?30只。 ?给药途径 32 原则上应与临床拟用药途径相同。如选择其他的给药途径～应说明理由。 ?给药频率 原则上应每天给药～且每天给药时间相同。试验周期长,3个月或以上,者～也可采取每周给药6天。特殊类型的受试物由于其毒性特点和临床给药等原因～应根据具体药物的特点设计给药频率。 ?给药期限 长期毒性试验给药期限的长短～通常与拟定的临床疗程长短、临床适应症、用药人群相关～应充分考虑预期临床的实际疗程。 当受试物预期会长期使用～或用于反复发作性疾病等而需经常反复给药时～应进行大鼠6个月的长期毒性试验。当临床适应症有若干项的～应按照临床最长疗程的临床适应症来确定长期毒性试验的给药期限。如临床给药需采用多个疗程～疗程之间间隔时间不足以使受试物可能对机体组织器官造成的损害恢复～则需按多个疗程的时间之和作为参照的临床疗程,如疗程间隔时间基本可判断足以使受试物可能对机体组织器官造成的损害恢复～则可按单个疗程的时间作为参照的临床疗程。 ?给药剂量 一般情况下～至少应设3个剂量组和溶媒或赋形剂对照组～必要时还需设立空白对照组和/或阳性对照组。低剂量组原则上应高于动物药效学试验的等效剂量或预期的临床治疗剂量的等效剂量。高剂量组原则上应使动物产生明显的毒性反应～甚至可引起少量动物死亡,对于毒性较小的中药～可尽量采用最大给药量,。在高、低剂量之间至少应再设一个中剂量组。 若受试物在饮食或饮水中给予时～应能充分保证受试物的均一性、稳定性和定量摄入～提供相关的检测报告～并应根据动物生长和体重的变化情况而调整在饮食或水中的剂量。局部给药时～应尽可能保证给药剂量的准确性及与局部充分接触的时间。 ?观察指标 一般状况观察: 在试验期间～应观察动物外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便、摄食量、体重、给药局部反应。 血液学指标: 33 血液学指标应观察红细胞计数、血红蛋白、平均红细胞容积、平均红细胞血红蛋白、平均红细胞血红蛋白浓度、白细胞计数及其分类、血小板计数、凝血时间等。 血液生化学指标: 血液生化学指标应观察天门冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白、血糖、总胆红素、总胆固醇等。 组织病理学检查: 当所用动物为非啮齿类动物时～应对所有剂量组、所有动物的器官和组织进行组织病理学检查。当所用动物为啮齿类动物时～应对高剂量组和对照组的器官和组织进行组织病理学检查～如果高剂量组出现组织病理学变化时～更低剂量组也应进行组织病理学检查以确定剂量-反应关系。若在尸检时发现器官和组织有肉眼可见的病理变化时～应对此脏器或组织进行详细的组织病理学检查。应注意对脏器和组织的标本取材保存。高剂量组发现有异常病变时～应对保存的更低剂量组的相应脏器、组织标本进行检查。如发现有异常变化～应附有相应的组织病理学照片。组织病理学检查报告应经检查者签名和病理检查单位盖章。 病理指标应尽量检测多脏器～但如有合理的理由说明所申报的中药制剂有一定的安全性～所检查的脏器和组织可减少为:心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、大肠、垂体、脊髓、骨髓、淋巴结、膀胱、睾丸、附睾、子宫、卵巢、胸腺、肾上腺及给药局部组织等。 除必需的检测指标外～长期毒性试验应根据受试物的特点～有针对性地增加相应的检测指标。 ?观察指标的时间和次数 应根据试验期限的长短和受试物的特点而确定试验期间观察指标的时间和次数～原则上应尽早、及时发现出现的毒性反应。 试验前～啮齿类动物至少应进行适应性观察5天～应对试验动物进行外观体征、行为活动、摄食量和体重检查。此外～试验动物相关指标的历史数据在长期毒性试验中也具有重要的参考意义。 试验期间～一般状况和征状的观察～应每天观察一次～饲料消耗和体重应每周记录一次。大鼠体重应雌雄分开进行计算。试验结束时应进行一次全面的检测。当给药期限较长时～应根据受试物的特点选择合适的时间进行中期阶段性的检测。 34 长期毒性试验应在给药结束时留存部分动物进行恢复期观察～以了解毒性反应的可逆程度和可能出现的延迟性毒性反应。在试验期间～对濒死或死亡动物应及时检查并分析原因。 ?结果及分析 试验报告应全面客观反映整个试验过程收集的原始资料和信息～应详细描述毒性的主要表现、大体解剖检查和/或病理组织学检查结果等～并说明数据处理的统计学方法～如用计算机处理数据～应说明所用软件。结果应以清楚、准确的方式来表示。 分析长期毒性试验结果的目的是判断动物是否发生毒性反应～描述毒性反应的性质和程度,包括毒性起始时间、程度、持续时间以及可逆性等,和靶器官～确定安全范围～并探讨可能的毒性作用机制。 应重视对动物中毒或死亡原因的分析～注意观察毒性反应出现的时间和恢复的时间及动物的死亡时间。应对所获取的数据进行全面和科学的分析～对在正常范围以外的各实测值应在试验结果中详细列出～对异常数据予以合理的分析。 根据长期毒性试验结果～分析讨论需在临床、质量可控性研究中注意的问题。 如果大鼠试验结果显示药物具有明显毒性作用～应提供受试物对犬的长期毒性试验结果。 其他安全性试验可参照国家食品药品监督管理局颁布的相关技术指导原则及 有关技术要求。 35