成纤维母细胞生长因子23的研究进展

成纤维母细胞生长因子23的研究进展 ? 778? ? 综述? 国际检验医学杂志2011年5月第32卷第7期IntJLabMed,May2011,Vo1.32,No.7 成纤维母细胞生长因子23的研究进展 庄兴综述,陈福祥审校 (上海交通大学医学院附属第九人民医院检验科200011) 关键词:胞间信号肽类和蛋白质类成纤维细胞;研究 07.025文献标识码:A文章编号:1673—4l3O(2011)070778—04 成纤维母细胞生长因子23(fibroblastgrowthfactor23, FGF23)是近年来被证实的调节机体血磷稳定的因子.作为一 种分泌性蛋白质,主要有骨细胞产生,作用于肾脏对磷的重吸 收而有效地维持血磷的稳定,同时还参与骨的矿化和分化等. FGF23过多或过少都将破坏血磷的稳定性,从而引发多种疾 病.现就FGF23相关研究进展作一综述. 1FGF家族中的FGF23及其蛋白质结构 FGF是一种多功能的非特异性活性物质.至今通过同源 序列PCR和T7噬菌体C—DNA显示等方法鉴定出人类有23 种FGF(FGFS).FGFS作为细胞问信号分子在胚胎发育和分 化过程中是最具重要功能的细胞因子.人类FGFS与小鼠的 FGF的同源性达到7O,90以上,通过不同的FGF基因敲 除小鼠(KO)模型显示不同的FGF形态因子表型. 近年来报道的FGF23是属于FGFS中的一员,与FGF19 享有共同的核心区域,属于FGF19亚家族成员之一,与 FGF19,FGF21分别有大约22,24相同的氨基酸序列,是 同源基因产物.与鼠的FGF23有大约72的同源性[1]. FGF23基因位于染色体12pl3上,包含有3个外显子,表 达的mRNA可编码约251个氨基酸的蛋白质,其中前24个氨 基酸残基被认为是一种信号肽,推测FGF23是一种类似激素 的分泌性蛋白E2].FGF23蛋白相对分子质量在32×10,蛋白 水解酶在精氨酸179和丝氨酸180之间加工,分成更小的18 ×10.氨基端片段(N)(25,179)和l2×l0的羧基端片段(C) (18o,251).邻近蛋白酶加工的部位,氨基酸序列精氨酸176一 X_X_精氨酸179可以被弗林蛋白酶识别,弗林蛋白酶是一种类 似于枯草杆菌蛋白酶类样的蛋白酶原转化酶,研究表明是抑制 蛋白酶原转化的酶,因此也抑制了FGF23蛋白的加工过程,影 响FGF23的降解,使循环中含量增多l3]. FGF23的N端是8三叶草结构区,与FGF19结构区相 似,包含了FGF家族的同源区域,可以与FGF受体(FGFR)结 合;C端是不同于其他家族成员的独特延伸区,与FGFS中其 他因子相比,有与众不同的生物学活性.人工合成的FGF23 的N端和C端的片段多肽在体内实验表明均不具有生物学活 性].但最近的研究显示c端片段与高磷酸盐尿也相关,在 K0小鼠中C端片段的多肽(180,251)与FGF23分子更短的 片段(18o,205)都能诱导尿磷酸盐的排泄增加[5.尽管缺乏 FGF23的受体区域,C片段区却仍具有其生物学活性,其理论 有待于更多的实验证实. FGF23的生物学活性是骨细胞产生FGF23,远距离调节 肾脏中磷酸盐的代谢,具有内分泌激素的特征.体内实验证实 FGF23作为一种对抗调节激素,参与抑制肾脏中25一羟维生素 I>la羟化酶mRNA的表达,以减少血液中活性维生素D-1,25 (0H)D.的产生,也可以诱导25一羟维生素I>24羟化酶,以降 解1,25(()H)D.;同时减少肾脏中钠磷协同转运蛋白2a和2c (type1I2a,2csodiumphosphateCO—transporter,NaPi2a,2c) mRNA及其蛋白水平的表达,继而减少肾脏磷酸盐的重吸收, 增加尿液中磷酸盐的排泄].动物实验表明FGF23KO小鼠 表现为高磷血症,近曲小管对磷的重吸收增加和1,25 (0H)D高水平.因此,FGF23对正常的磷酸盐和维生素D 的代i身}是必须的j. 2FGF23的调控 2.1骨细胞局部因子对FGF23的合成和分泌FGF23主要 在骨细胞和骨的格根包尔细胞合成[.其次在骨髓,胸腺和淋 巴结静脉窦的内皮细胞和腹外侧核上表达,小肠,脉络丛也有 FGF23表达.由于肾脏中未发现FGF23基因,因此目前认为 FGF23是由骨细胞等肾外组织产生并经过血液循环到达肾脏 发挥其生物学活性的.相关研究证实,同样表达于骨的基因产 物PHEX,DMP1和MEPE不仅参与调节骨的形成和矿化,还 对骨细胞中FGF23基因有重要的调控作用. PHEX(phosphateregulatinggenewithhomologiestoen— dopeptidasesontheXchromosome)是在X染色体上与内肽酶 同源的磷调节基因,它编码的蛋白属于膜结合金属蛋白酶 M13家族成员,这一蛋白酶家族具有分解小肽激素的能力,可 能FGF23是它的作用底物.虽然确切的机制尚无完全明确, 但PHEX失活或钝化后,通过刺激骨骼中FGF1的含量,从而 直接刺激FGF23启动子,增加FGF23的表达,同时减少 GALNT3的分泌.GALNT3(N乙酰氨基半乳糖转移酶:二磷 酸尿苷一N一乙酰aD-半乳糖胺多肽N一乙酰氨基半乳糖氨基转 移酶)是与高尔基体相关的酶,它的作用在于能选择性地识别 FGF23氨基酸序列162,228区域,使其氧糖基化,维持 FGF23蛋白的稳定,防止其降解,保证FGF23的完整性?g]. 牙本质基质蛋白(dentinmatrixprotein1,DMP1)是一种 酸性非胶原细胞外基质蛋白,能够促进骨的矿化n.删除 DMP1会增加骨细胞中FGF23的表达,从而引起循环中含量 增加En]. 细胞外基质磷酸糖蛋白(matrixextracellularphosphor— glyeoprotein,MEPE)是短整合素结合配体作用糖蛋白家族中 的成员之一,由525个氨基酸组成,基因定位于染色体4@1, 与DMP1功能相反,是骨矿化的抑制剂.有实验证实MEPE 通过增加FGF23的含量,引起高磷酸盐尿ll..因此,骨细胞 基质上的PHEX,MEPE和DMP1都具有调节循环中FGF23 含量的作用,但具体机制均不清楚. 由此可见,FGF23,PHEX,DMP1和MEPE组成了一个新 的激素酶一细胞外基质蛋白轴,通过这个轴可以调节磷的平衡 和骨骼的矿化. 2.2FGF23,FGFR与klothoFGF23必须与其受体结合才 能发挥其生物学效应.FGF23受体(FGFR)有4种亚型,是酪 氨酸蛋白激酶家族成员,包含1个细胞外结构区,1个跨膜区 国际检验医学杂志2011年5月第32卷第7期IntJLabMed,May2011,Vo1.32,No.7 和细胞内酪氨酸结合区.FGFR1是FGF23在肾脏的主要受 体.但FGF23与F(FR的亲和力很低,还要辅助因子klotho (KI)参与.人的KI蛋白全长l014个氨基酸,是T型单跨膜 蛋白,结构与8糖苷酶相似,具有延缓衰老,抗氧化等作用.主 要在肾脏远曲小管,甲状旁腺,脑垂体和脉络膜丛的上皮,胎 盘,前列腺中表达.KI蛋白可直接FGFR结合,两者形成 的复合体与FGF23的亲和力远大于单独一种与FGF23的亲 和力.因此KI蛋白是FGF23信号转导中其受体的基本辅助 因子,而且KI蛋白在肾脏中也可通过蛋白激酶C通路而抑制 1a羟化酶基因的表达,从而减少维生素D.的活化,由此 KL蛋白本身就是FGF23的共受体之一.但由于KI在远曲 小管表达,而FGF23表达在近端小管,说明KI在远曲小管的 作用可能不依赖FGF23.使用肾脏匀浆液为材料,也证实KI 蛋白本身与FGF23特异性结合,当KI蛋白表达增加时,增强 了肾细胞与FGF23的亲和力,且细胞对FGF23的反应灵敏性 加强.动物实验表明,KI蛋白的单克隆抗体注射到小鼠体内 后,FGF23的诱导作用明显降低. 由此表明,FGF23的N端与FGFRl结合,C端与KL结 合,形成FGFR1一FGF23一KI具有生物学活性的复合物,激活下 游的RAS/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径,抑制肾小管刷 状缘膜上的钠磷协同转运蛋白2a和2c,发挥FGF23的生理作 用,通过细胞膜上特定受体实现血磷调节l】. 2.3肾,甲状旁腺对FGF23的调控FGF23主要的靶器官是 肾脏,这个激素的主要功能是调节磷酸盐的重吸收和1,25 (OH).D.水平.体内维生素D.首先在肝脏被25羟化酶催化 成25(OH)D.,后者在肾脏经1"羟化酶催化成1,25(OH)D. 才能有生物学活性.因此l,25(OH).D.是维生素D的活化 形式,它可以促进肾小管对钙,磷的重吸收,抑制甲状旁腺分泌 PTH,并促进肠道磷吸收,当1,25一(OH).D.含量减少后血磷 下降,P'I'H水平升高,尿磷排泄增加,从而引起低磷血症lj. 而增加的1,25(OH)D.能增强FGF23在骨细胞中转录,其机 制是激活位于FGF23启动子区域的维生素D受体(VDR)来 实现的E18].研究认为FGF23是l,25(OH)2D.的反调节因 子,以对抗维生素D介导的抑制PTH生成和促进肠道重吸收 磷的生理活动.因此,25(OH).D.与FGF23两种激素互相作 用,形成反馈环路,共同完成肾一肠骨轴的磷平衡. FGF23表达受维生素D,磷酸盐和可能的PTH的调控. 日常饮食中磷的摄人和1,25(()H)zD.含量的改变都可以直接 上调FGF23启动子[2. 3FGF23相关性疾病 一 个体质量7Okg的人体内磷含量在700g左右,将近 8o在骨骼以晶体状羟磷灰石[Ca.(PO)(()H).]形式存在, 大约9在骨骼肌内,10.9在内脏,0.1在细胞外液,细胞 外的磷酸盐大多数以磷酸酯的形式存在. 急性血磷酸盐过少可引起心肌病,心功能紊乱和血液异 常;慢性血磷酸盐减少则可发生骨的矿化功能异常进而发展成 佝偻病和骨软化.而高磷酸盐血症往往引发继发性甲状旁腺 亢进(SHP),通常出现在慢性肾脏疾病(CKD)患者中. 3.1血磷减少性疾病(1)FGF23基因中出现错义突变如 R176Q(527G>A),R179Q(536G>A)和R179W(535C>T)导 致翻译产物中有两个精氨酸受到影响;在精氨酸l76一RXXR一 精氨酸179序列区是转化酶与弗林蛋白酶裂解的部位,其突变 的结果影响了FGF23降解,造成了循环中FGF23增多,最终 导致常染色体显性低血磷酸盐性佝偻病(ADHR)发生. ? 779? ADHR多数在儿章期发病,表现为佝偻病;少数在青春期后发 病,表现为骨软化.ADHR的生化改变为肾脏排磷增加,低磷 血症,血中l,25(OH).D.反常地处于正常或低水平.(2) 近年来有报道,在常染色体隐性低磷酸盐血症性佝偻病(AR— HR)患者中发现非胶原性骨基质蛋白1(DMP1)突变,通过连 锁分析将该致病基因定位于4q21,这类患者的临床症状为循 环中有大量的FGF23[2.(3)抗维生素I)性佝偻病是性联遗 传性低磷酸盐性佝偻病(XIH),在x染色体上与肽链内切酶 同源的磷酸盐调控基因(PHEX)钝化突变引起的.PHEX基 因的第2个外显子有1个碱基对缺失或PHEX基因的一大段 缺失,其密码子转录过早中止,从而使其编码的PHEX蛋白表 达停止或缺陷而直接或间接地影响FGF23的表达,导致循环 中FGF23含量升高.xIH患者在临床上是以低磷血症,维生 素D.和PTH代谢异常以及骨矿化缺陷为特征的.(4)与 ADHR生化改变类似的TIO(tumorinducedosteomalaeia)是 由肿瘤组织表达过量的FGF23而引起的获得性低磷性血症. 肿瘤细胞中FGF23mRNA水平表达高,Westen印迹分析显示 肿瘤组织中有大量FGF23蛋白表达,免疫组化方法同样显示 TIO肿瘤组织中FGF23的染色阳性,引起临床的反应性低磷 血症.但TI()患者血中FGF23水平的变化并不一致,多数含 量升高数十倍以上,但也有患者仅略高于正常范围.临床表现 为肌肉无力,骨痛,严重者出现骨折,骨骼畸形.生化特点为血 磷降低,尿磷增多,血1,25(OH)D.水平降低或正常. 临床上,人们常把ADHR,ARHR,XIH和TI()统称为低 磷酸盐性佝偻病(HR). 3.2血磷增高性疾病(1)FGF23基因突变或表达异常所致 完整性FGF23减少的家族性肿瘤样钙沉着症(familialtumoral calcinosis,FTC)是一组常染色体隐性遗传病,主要病理改变为 软组织异位钙化,可导致皮肤和骨的二次感染,常伴动脉瘤. 牙齿异常,也可见皮疹,主要表现为大关节周围皮下组织的钙 质沉积,同时伴PTH和维生素D代谢产物的异常,继发性肾 小管和小肠对磷的重吸收增加,血磷升高显着.目前发现 与FTc发病相关的主要有GAINT3基因,FGF23基因和KI 基因.FGF23基因隐性突变导致酶切位点改变,减少或停止 了完整FGF23的分泌;GAINT3基因表达缺陷导致FGF23稳 定性改变,增加FGF23蛋白水解和(或)无功能性FGF23多肽 片段增加;KL作为FGF23与受体结合的辅助因子,其基因突 变导致FGF23信号传递受阻.这3个基因的缺陷都使循环中 FGF23的含量减少,从而影响FGF23发挥其生理学作用.(2) 慢性肾功能疾病中FGF23水平增高[2931}.慢性肾脏疾病 (CKD)时可出现持续性钙,磷代谢紊乱,因长期钙磷代谢紊乱 会导致甲状旁腺机能失调及各种肾性骨病发生,还会出现血管 钙化,心血管事件发生. 过去的研究多集中在钙一PTH维生素D轴对血磷,钙和 PTH的调节作用,其机制是甲状旁腺,肾脏及胃肠道是该系统 中3个主要靶器官.当机体出现低血钙时,PTH生成和释放 增加,激活1a羟化酶,增加1,25(OH)r).的合成,促进肠道 钙吸收;同时促使肾对磷清除增加,从而维持钙磷乘积稳态; PTH还增加骨对钙,磷的释放.当肾衰竭时,1,25(OH)D. 生成减少,肠道钙吸收减少,机体发生低血钙,PTH生成释放 增加,此时异常升高的PTH不能代偿钙磷代谢紊乱,反而出 现甲状旁腺增生,到终末期肾衰(ERSD)时便出现常见的甲状 旁腺机能亢进(继发性甲状旁腺亢进)及各种肾性骨病. 由骨细胞产生的FGF23作用于肾脏调节磷的代谢,由此 ? 78O?国际检验医学杂志2011年5月第32卷第7期 IntJLabMed,May2011,Vo1.32,No.7 形成的骨一FGF23一肾系统,揭示了继发性甲状旁腺机能亢进及 肾性骨病的新机制.研究显示[a2a4],在CKD早期,FGF增加 可以提高尿液中磷酸盐的排泄,防止高磷酸盐血症的发展,从 而减少循环中1,25一(()H).D.的含量,却有助于继发性甲状旁 腺机能亢进的发展. 4FGF23的测定 由于FGF23裂解后的N端和C端均无活性,因此只有分 别标记的两类抗体相结合才能检测出有生物活性的全段 FGF23.目前应用两种单克隆抗体,分别识别FGF23的N端 8三叶草结构区和c端独特延伸区,应用夹心法酶联免疫吸附 试验(ELIsA)检测104例健康成人外周血全段FGF23,其参考 范围为8.2,54.3ng/L,平均(28.9?1.1)ng/L口.另一种检 测方法同样是ElISA法,特异性识别FGF23的C端部位的多 克隆抗体,FGF23含量平均为104rU/mI.化学发光法是近 年来发展的检测FGF23方法,与ELISA法相比可能更灵敏, 但没有相关统计数据. 5结论 FGF23是近年来发现的FGF因子.目前已研究出:(1) FGF23是体内重要的调控磷平衡的内分泌激素.(2)它是通 过抑制肾脏中1a羟化酶和钠磷转运蛋白的活力来实现其生物 学活性的,减少肾脏对磷酸盐的重吸收,减少循环中1,25 (OH)zD.的水平.(3)FGF23和甲状旁腺激素(PTH)之间可 能存在的相互关系,即FGF23抑制PTH的分泌.(4)FGF23 生物学功能的实现需要一个或多个FGFR和KL辅助因子的 参与.(5)上调FGF23的表达是通过血清中磷酸盐和1,25 (OH).D.的水平,而下调的机制虽没有明确,但下调因子是 PHEX和DMP1. 机体磷的内环境的稳定是多因素参与调节的结果,目前已 知道的有维生素D.,PTH和FGF23.而后者的发现对血磷的 体内代谢机制有了新的提升,尤其是在和磷相关的遗传学疾病 上,以及CKD患者发生的继发性甲状旁腺机能亢进,透析患者 死亡率的预测,肾脏移植患者发生的低磷酸盐血症等相关病原 学方面E3637].因此,在血磷状态异常情况下测定FGF23作为 特异的诊断,监测和治疗指标应引起临床足够的重视[3. 总之,FGF23使人们对体内血磷调节有一个新的了解, FGF23过多和过少所致疾病的研究,有助于人们对相关疾病 的发病机制,诊断,新的治疗方法及其预后提供一定的帮助. 但FGF23的生物学作用的机制仍然有许多未阐明的问题,如 PHEx和DMP1是如何影响FGF23基因的表达和分泌,日常 饮食和血清中的磷酸盐是如何调控PTH,1,25(OH)D.和 FGF23分泌;FGF23突变是如何削弱FGF23的分泌及其负反 馈通路.这些与FGF23相关的基础和临床研究还有待于进一 步进行. 参考文献 [1] [2] [3] [4] YamashitaT,YoshiokaM,ItohN.eta1.Identificationofanovel fibroblastgrowthfactor,FGF23,preferentiallyexpressedinthe ventrolateralthalamicnucleusofthebrain[J].Biochemgiophys ResCommun,2000,277(2):494-498. YamashitaT.Structura1andBiochemicalPropertiesofFibroblast GrowthFactor23[J].TherApherDial,2005,9(4):313318. BenetPA,LorenzDB,ZischkaH,eta1.FGF23isprocess—edby proproteinconvertaseshutnotbyPHEX[J].Bone,2004,35(2): 455-462. ShimadaT,MutoT,UrakawaI,eta1.MutantFGF-23responsible forautosomaldominanthypophosphatemicricketsisresistantto proteolyti—ccleavageandcauseshypophosphatemiainvivo[J]. Endocrinology,2002,143(8):31793182. [5]BerndtTJ,CraigTA,MeCormickDJ,eta1.Biologicalactivityof FGF一23fragments[J].PugersArch,2007,454(4):615-623. [6]ShimadaT,HasegawaH,YamazakiY,eta1.FGF一23isapotent regulatorofvitaminDmetabolismandphosphatehomeostasis[J]. JBoneMinerRes,2004,19(3):429-435. [7]ShimadaT,KakitaniM,YamazakiY.eta1.Targetedablationof FGF23demonstratesanessentialphysiologicalroleofFGF23in phosphateandvitaminDmetabolism[J].JClinInvest,2004,113 (4):56卜568. [81MiramsM,RobinsonBG,MasonRS,eta1.Boneasasourceof FGF2—3:regulationbyphosphate[J].Bone,2004,35(5):1192— 1199. [9]IiuS,TangW,FangJ,eta1.NovelregulatorsofFgf23expression andmineralizationinHypbone[J].MolEndocrinol,2009,23(9): 1505-1518. [10]TartaixPH,DoulaverakisM,GeorgeA,eta1.Invitroeffectsof dentinmatrixprotein1onhydroxyapatiteformationprovidein— sightsintoinvivofunctions[J].JBiolChem,2004,279(18): 18115—1812O. [11]FengJQ,WardLM,LiuS,eta1.LossofDMP1causesricketsand osteomalaciaandidentifiesaroleforosteocytesinmineralmetab olism[J].NatGenet,2006,8(11):13101315. [12]giuS,RowePS,ViethalerI,eta1.Ph.印h0rylatedacidicserine— aspartaterichMEPE—.associatedmotifpeptidefrommatrixextra—— cellularphosphoglycoproteininhibitsphosphateregulatinggene withhomologiestoendopeptidasesontheX-chromosomeenzyme activity[J].JEndocrinol,2007,192(1):261267. [13]RowePS,KumagaiY,GutierrezG,eta1.MEPEhastheproper tiesofanosteoblasticphosphatoninandminhibin[J].Bone, 2004,34(2):303319. [14]LiuS,BrownTA,ZhouJ,eta1.Roleofmatrixextracellularphos— ph0glyc.proteininthepathogenesisofX—linkedhypophos— phatemia[J].JAmSocNephrol,2005,16(6):16450353. [15]lchikawaS,LmelEA,KreiterMI,eta1.Ahomozygousmissense mutationinhumanKIoTH()causesseveretumoralcalcinosis [J].JClinInvest,2007,I17(9):2684—2691. [16]KuroM.Klothoasaregulatorofbroblastgrowthfactor23signa— lingandphosphate/calciummetabolism[J].Curr()pinNephrol Hypertens,2006,15(4):437—441. [17]ShimadaT,KakitaniM,YamazakiY,eta1.Targetedablationof Fgf23demonstratesanessentialphysiologicalroleofFGF23in phosphateandvitaminDmetabolism[J].JClinInvest,2004,I13 (4):56卜568. [18]giuS,FangW,ZhouJ,eta1.Fibroblastgrowthfactor23isa counterregulatoryphosphaturichormoneforvitaminDEJ].JAm SocNephrol,2006,l7(5):1305—1315. [19]QuarlesLD.FGF23,PHEXandMEPEregulationofphosphate homeostasisandskeletalmineralization[J].AmJPhysiolEndo— crinolMetab,2003,285(1):E19. [20]RazzaqueMS,ganskeB.Theemergingroleofthefibroblast growthfactor23klothoaxisinrenalregulationofphosphateho meostasisEJ~.JEndocrinol,2007,194(1):1-10. [217BurnettSM,GunawardeneSC,BringhurstFR,eta1.Regulationof cterminalandintactFGF-23bydietaryphosphateinmenand women[J~.JBoneMinerRes,2006,21(8):11871196. 国际检验医学杂志2011年5月第32卷第7期IntJLabMed,May2011,Vok32,No.7 [22]NishiH,NilKT,NakanishiS,eta1.Imravenouscalcitrioltherapy increasesserumconcentrationsofbroblastgrowthfactor23indi— alysispatientswithsecondaryhyperparathyroidism[J].Nephron ClinPract,2005,10l(2):94—99. [23]GaasbeekA,MeindersAE.Hypoph0sphatemia:anupdateonits etiologyandtreatment[J].AmJMed,2005,118(10):1O941101. E247AdhrC.Autosomaldominanthypophosphataemicricketsisassociated withmutationsinFGF23[J~,.NatGenet,2000,26(3):345—348. L25JIxorenzDB,BastepeM,BenetPA,eta1.I)MP1mutationsinauto— somalrecessivehypophosphatemiaimplicateabonematrixprotein intheregulationofphosphatehomeostasis[J].NatGenel,2006,8 (11):12481250. [26]RoetzerKM,VargaF,ZwetderE,eta1.NovelPHEXmutation associatedwithhypophosphatemicrickets[J].NephronPbusiol, 2007,106(1):8-12. [27]ShimadaT,MizutaniS,MutoT,eta1.Cloningandcharacteriza— tionofFGF23asacausativefactoroftumorinducedosteomMacia [J].ProcNatlAcadSci,2001,98(11):6500-6505. [28]GarringerHJ,MalekpourM,EsteghamatF,eta1.Mdeculmrge— neticandhiochemicalanalysesofFGF23mutationsinfamihaltu— moralcalcinosis[J].AMJPhysiolEndocrinolMetab,2008,296 (4):929937. L29]ImanishiY,InabaM,NakatsukaK,eta1.FGF23inpatientswith endstagerenaldiseaseonhemodialyMs[J].KidenyInt,2004,66 (5):1943,1946. [3o]ShigematsuT,KazamaJJ,YamashitaT,eta1.Possibleinvolve— mentofcirculatingfibroblastgrowthfactor23inthedevelopment ofsecondaryhyperparathyroidismassociatedwithrenalinsuffi— ciency[J].AmJKidenyDis,2004,44(2):250—256. ? 综述? ? 78l? [31]GupataA,WinerK,EconsMJ,eta1.FGF23iselevatedbychron ichyperphosphatemia[J].JClinEndocrinolMetab,2004,89(9): 44894492. [32]JuppnerH,WolfM,SaluskyIB.FGF23:morethanaregulatorof rena1ph.sphatehandling[J].JBoneMinerRes,2010,30(11): 33923399. [33]WesterbergPA,IAindeT.Regulationoffibroblastgrowthfactor 23inchronickidneydisease[J].NephrolDialTrans,2007,22 (11):3202—3207. [34]NaganoN,MiyataS,AbeM.Effectofmanipulatingserumphos phoruswi~hphospha>ebinderoncirculatingPTHandFGF23in renalfailurerats[J].KidneyInt,2006,69(3):531—537. [35]YamazakiY,O)kazakiR,ShibalaM,eta1.Increasedcirculatoryleve1of h~doaeallyactivefulllengthFGF23inpatientswithhypopbos— phatemicrickets/osteomalacia[J].JClinEndocrinolMetab,2002,87 (11):4957496O. L361I_viMV,WassemanG,MeirT,eta1.PTHincreasesFGF23ge neexpressionandmediatesthehighFGF23levelsofexperimental kidheyfailure:aboneparathyroidfeedbackloop[J].AmJPhysi— o1RenalPhysion.2010,8(6):235—237. [37]NakaiK,KomabaH,FukagawaM.Newinsightsintotheroleof [38] fibrohlas*growthfactor23inchronickidneydisease[J].JNeph— rol,2010,22(36):458461. NielsenSS,PedersenSM,KassemM,eta1.Fiboblastgrowthfac— tor23aphosphateregulatinghormone[J].UgeskrLaeger,2010, 172(20):152】】527. (收稿日期:20]012-01) 侵袭性真菌感染实验室早期诊断方法的现状与展望 曹楠楠综述,郑磊,王前?审校 (南方医科大学附属南方医院检验医学中心,广州510515) 关键词:真菌;实验室;诊断 DOI:10.3969/j.issn.16734130.2011.07.026文献标识码:A文章编号:16734130(2011)070781—03 随着化疗药物,免疫抑制剂等的广泛应用及器官移植学的 发展,侵袭性真菌感染(invasivefungalinfection,IFI)发生率显 着上升.尽管不断有新的抗真菌药物问世,但IFI的死亡率仍 然很高. IFI的病原真菌多为念珠菌,曲霉菌属,常发生于恶性肿 瘤,移植后免疫力低下及危重症患者.近些年,还常常伴随一 些过去较为少见的毛霉菌,根霉菌等真菌感染J.尽早诊断感 染,确定病原真菌,成为I临床的迫切需求. 现有检测IFI的方法可分为培养法和非培养法.培养法 是检测真菌感染的金,但培养时间长,特异性和敏感性低, 也不能区分是非致病性定植,还是侵袭性感染.非培养法包括 血清学方法和分子生物学方法.与培养法相比,非培养方法具 有检测时间短,敏感性和特异性相对较高的特点,逐渐成为快 速检测IFI的首要之选.现就侵袭性真菌感染的非培养检测 方法作一阐述. 通讯作者,E—mail:wangqian@fimmu.corn. 1血清学方法 血清学方法是一种重要的诊断IFI的方法.通过检测真 菌抗原抗体,代谢产物等,提供诊断线索及疾病进程的有关 信息. 目前IFI检测抗原主要包括两种:(1,3)BD葡聚糖[(1, 3)一8一Dglucan,BG]和半乳甘露聚糖(galactomannan,GM). BG是除接合菌和新型隐球菌外所有真菌细胞壁组分.人体 细胞壁上不存在这种多糖,这一特点使其成为检测侵袭性真菌 感染的一种理想标志物.但在接受血液透析,免疫球蛋白治疗 以及其他包含葡聚糖的药物治疗的患者中可见假阳性结果. 且此抗原与阿莫西林,革兰染色阳性的微生物细胞壁组分有交 叉反应.因此BG检测的结果应结合临床症状进行解释,监测 血清BG水平可评估治疗效果.GM是曲霉菌特异性抗原,存 在于曲霉菌细胞壁上,在菌丝生长时被释放到周围组织中. Meta分析显示,半乳甘露聚糖一酶联免疫分析(galactomanna~