HPLC法测定虎杖叶中槲皮素的含量

HPLC法测定虎杖叶中槲皮素的含量 HPLC法测定虎杖叶中槲皮素的含量 HPLC法测定虎杖叶中槲皮素的含量 王信 (山西省大同市第三医院,山西大同037008) 摘要目的:建立HPLC测定虎杖叶中槲皮素含量的方法.方法:色谱柱为c.柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸溶 液(55:45),UV检测波长371nm.结果:此方法线性关系良好,平均加样回收率为100.56%(n=6).结论:本方法 分离良好,结果准确可靠. 关键词HPLC;槲皮素;虎杖叶 中图分类号:R283.6文献标识码:A文章编号:1001--4454(2006)04-0400~2 虎杖叶为蓼科植物虎杖Polygonumcuspitatum Sieb.etZucc.的干燥叶.在《本草拾遗》和《本草推 陈》中均有记载,具平肝潜阳,祛痰息风之功,用于 肝阳上亢,血压偏高,头晕头昏的治疗.虎杖叶的有 效成分为槲皮素等黄酮类成分.关于槲皮素的含量 测定,据文献报道…有薄层色谱法和高效液相色谱 法,但供试品溶液的制备均采用了正丁醇提取,操作 较为复杂,本文采用酸水解后直接注入高效液相色 谱仪测定其槲皮素的含量,方法简便,结果可靠. 1仪器及试药 HP.1100液相色谱仪,HP-1100系列四元泵, VWD可变波长检测器,自动进样器.紫外光谱测定 用岛津2201型单光束紫外分光光度仪. 槲皮素对照品:中国药品生物制品检定所提供, 编号10081-9905,供含量测定用.虎杖叶样品:云南 藤云制药有限公司提供. 所用溶剂均为纯,流动相配制用色谱纯溶 剂. 2色谱条件 AlltechCl8色谱柱(250mm×4.6mm,5m); 甲醇.I).4%磷酸溶液(55:45)为流动相;检测波长 371nm;进样量10Ixl;流速:1ml/min;柱温25?. 3溶液配制 3.1对照品溶液的配制精密称取P:0减压干 燥24h的槲皮素对照品14.75mg,置50ml量瓶 中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀(每1ml中含 槲皮素0.295mg),取5ml置100ml量瓶中,加甲 醇稀释至刻度,摇匀(每1ml中含槲皮素0.01475 mg),即得. 3.2供试品溶液的制备取本品粉末(过二号筛) 0.2g,精密称定,精密加入甲醇-25%盐酸(4:1混合 溶液50ml,称定重量,置水浴上回流1h,放冷,用上 述混合溶液补足减失的重量,滤过,取续滤液,即得. 4方法与结果 ? 400? 4.1系统适用性试验分别量取对照品溶液,供 试品溶液注入色谱仪,色谱图,结果较为理想. 4.2线性关系考察精密吸取对照品溶液(0.295 mg/m1)2.0ml置】0ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度, 摇匀(0.059mg/m1),精密吸取此对照品溶液0.2, 0.5,l,2,4,6,8,10Ixl进样,记录色谱图,以峰面积 积分值(Y)对进样量(x)进行回归处理,槲皮素在 0.0118Ixg一0.59Ixg范围内呈现良好线性关系,回 归方程为Y=4169.91686X+2.28280,r=1.00000. 4.3精密度试验量取同一槲皮索对照品溶液 (0.01475mg/m1),连续测定6次,以峰面积积分值 计算,RSD=0.34%. 4.4稳定性试验量取同一供试品溶液,测定7 次,每次问隔1.2h,供试品含量计算RSD=0.53%, 明供试品溶液在10h内稳定. 4.5重现性试验取同一批号的样品,按供试品 溶液的制备方法制备5份供试品溶液,分别i贝0定,以 供试品含量计算RSD=0.69%,证明此方法重现性 良好. 4.6回收率试验精密取对照品溶液(0.295mg/ m1)1.0,1.5,2.0ml(各双样),蒸干,加入重现性试 验的同一批号样品0.1g,精密称定,精密加入甲醇. 25%盐酸(4:1)混合溶液50ml,称定重量,水浴上 回流1h,放冷,用上述混合溶液补足减失的重量,滤 过,取续滤液,按含量测定方法测定,计算回收率,结 果平均加样回收率为100.56%,RSD=2.53%. 4.7样品测定按规定方法制备10批样品的供 试品溶液及对照品溶液,分别测定槲斗皮素含量,结 果见表1. 5讨论 5.1槲皮素为黄酮类化合物,在槐花米,银杏等中 均有分布,具心血管方面的生理活性J,也是虎杖 叶中的主要有效成分,因此测定其含量可较好地控 制产品质量,保证用药的安全有效. 中药材第29卷第4期2006年4月 表1样品中槲皮素含量测定结果 注:表中数据为两次测得平均值 5.2通过测定以流动相作为溶剂配制的对照品溶 ? 考证? 液的紫外吸收光谱,槲皮素的最大吸收波长为371 rim,故确定以此为HPLC的检测波长,理论塔板数 以槲皮素峰计应不低于6000. 参考文献 [1]王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京:中国 医药科技出版社,1994:303,484. [2]北京医学院,北京中医学院.中草药成分化学.北京: 人民卫生出版社.1983:286. (2005—09—22收稿) 重庆垫江牡丹皮生产历史与生产现状分析 范俊安,张艳,夏永鹏,邱宗荫,周孟全. (1.重庆医科大学药学系,重庆400016;2.重庆市食品药品监督管理局,重庆 400042;3.重庆市中药研究 院.重庆400065) 摘要通过深入垫江县各乡镇调查,考证表明,垫江丹皮生产历史悠久,产量大,质量 好,并长期出口,垫江县 太平镇索有"丹皮之乡"的美称.全县现种植规模达11000多亩,集中分布在明月山 内槽地带毗邻的5个乡镇.针 对目前生产中存在的问题,提出了推进丹皮产业化发展的建议. 关键词重庆垫江;牡丹皮;生产史;现状 中图分类号:R281.4文献标识码:A:史章编号:1001—4454(2006)04-0401-03 牡丹皮为牡丹PaeoniasuffruticosaAndr.的干燥 根皮?,有清热凉血,活血化瘀的功能,现代药理学 研究,牡丹皮具有抗炎,抗肿瘤,降血糖,抗血栓和动 脉粥样硬化等药理作用.牡丹在全国各地多有 栽培,但以观赏园林种植居多,药用牡丹皮主产于于 安微铜陵,重庆垫江及山东荷泽等地.垫江县有长 期种植牡丹的历史和传统习惯,丹皮质量好,产量 大,习称"垫丹","川丹",当地农民称之为牡丹皮, 丹皮,刮丹,粉丹,或直接称之为"药".垫江县丹皮 种植面积最大的太平镇素有"丹皮之乡"的美称,但 垫江牡丹皮生产情况及相关研究尚无文献报道.为 此笔者多次调查了垫江县各乡镇,村及农户的丹皮 生产历史,现状及存在问题. 1垫江牡丹皮生产历史小考 牡丹皮始载于《神农本草经》,列为中品,"主 治寒热中风,瘼癜痉,惊痫邪气,除瘢坚,瘀血,留舍 肠胃,安五脏,疗痈疮.一名鹿韭,一名鼠姑.生山 作者简介:范俊安,博士生,Tel:. '通讯作者:邱宗荫,Tel:. 中药材第29卷第4期2006年4月 谷".南梁药物学家陶弘景整理的《名医别录》记 载:"牡丹,生于巴郡山谷及汉中,二月八月采根阴 干"_4.苏颂FI:"今出合州者佳,和州,宣州者并 良".《本草品汇精要》记载:"[图经日]生巴郡 山谷,汉中,丹延,青越,滁和等州山中皆有之",并 在[道地]项下记载"巴蜀剑南,合州,和州,宣州者 并良"6j.巴郡,战国之前称江州,《国花大典》阐 释:"巴郡,在原四川省,指重庆,南充至剑阁的广大 地区,即川东一带;合州有二,一在四川重庆附近,一 在广东雷州半岛.此指前者可能性较大."宣州在 安徽东南部,芜湖,铜陵一带.廖谟高考证:"现 今垫江县名,是西魏恭帝二年始建(析临江县地置 垫江县),恭帝前的垫江县是指今合川市.……现 今垫江县域内曾由州,县所割:西属邻州,东南属丰 都,东北属忠州.北周,隋,唐,宋,元,明,清均有改 割或析.但无论江少l'l还是巴郡,都辖现今垫江全境; 而据巴郡诸县志,唯垫江县有牡丹种植历史,且有误 . 40l?