【doc】复方余甘子含片对人体口咽部菌群调节作用的初步研究

【doc】复方余甘子含片对人体口咽部菌群调节作用的初步研究 复方余甘子含片对人体口咽部菌群调节作 用的初步研究 ? 942?世界中西医结合杂志2010年第5卷第11期W0ridJournatofIntegmtedTraditi0na1andWestemMedicine2010,Vo1.5,No.11 复方余甘子含片对人体口咽部菌群 调节作用的初步研究 邢海晶袁嘉丽陈文慧席晓蓉徐艳琴郭剑男杨增祥 ? 实验研究? 【摘要】目的通过观察复方余甘子含片对人体口咽部菌群的调节作用,初步探讨其防治慢性 咽炎的作用机理.方法选择健康人群及慢性咽炎人群含服复方余甘子含片,观察含片前后口咽部 菌群的变化情况;同时进行含片对口咽部常见致病菌及优势菌甲型链球菌的体外抑菌实验.结果 复方余甘子含片在体外对金黄色葡萄球菌,乙型溶血性链球菌,肺炎链球菌有一定的抑制作用,但对 优势菌甲型链球菌无抑制作用;对慢性咽炎人群有促进优势菌甲型链球菌生长的作用.结论复方 余甘子含片通过对口咽部优势菌甲型链球菌的生长促进,恢复局部菌群平衡,从而对慢性咽炎有一定 的防治作用. 【关键词】复方余甘子含片;口咽部;菌群;调节作用 PrimaryStudyofCompoundPhyllanthusEmblicaLozengeonHuman orOpharyngealFloraRegulation XINGHai—jing,YUANJia—li,CHENGWen—hui,XIXiao—rong,XUYan— qin,GUOJian—nan,YANG Zeng—xiang (YunanCollegeofTraditiona1ChineseMedieine,KunmingYunnan650500) 【Abstract】 ObjectiveToexploreprimarilythemechanismofcompoundphyllanthusemblicaloz— engeonthepreventionandtreatmentofchronicpharyngitisbyobservingtheregulationofitonhumanoro— pharyngealflora.MethodsSelecthealthypersonsandthosewithchronicpharyngitisasthesubjectstotake sublinguallycompoundphyllanthusemblicalozenge.Observethechangesinoropharngealflorabeforeandaf- termedication.Moreover,conductinvitroanti, bacterialexperimentofthelozengeincommonoropharngeal pathogensanddominantbacteriastreptococcusA.ResultsCompoundphyllanthusemblicalozengeinhibited invitrostaphylococcusaureusrosenbach,beta— hemolyticstreptococcus,andstreptococcuspneumoniatoa certainextent.IthadnoinhibitionondominantbacteriastreptococcusA,instead,promoteditsgrowthforthe personswithchronicpharyngitis.ConclusionCompoundphyllanthasemblicalozengerestores]oealflora balancethroughpromotingthegrowthofdominantbacteriastreptococcusAforthepersonswithchronicphar- yngitisSOthatitactsonsomepreventionandtreatmentofchronicpharyngitis. 【Keywords】Compoundphyllanthusemblicalozenge;Oropharngeal;Flora;Regulation 余甘子是大戟科叶下珠属植物的果实,收载于 1974年版《云南省药品》,1977,2005年版《中 华人民共和国药典》.其人药在我国已有较长历 史,汉代杨浮在《异物志》中曾专门论述了余甘子的 药用价值,明代医药学家李时珍在《本草纲目》中也 充分肯定了余甘子"久服轻身,延年长生的功效". 明初云南医家兰茂所着《滇南本草》称余甘子"味 甘,酸,性平,治一切喉火上炎,大头瘟症.能解湿 热春温,生津止渴,利痰,解鱼毒,酒积滞,神效". 基金项目:云南省科技资助项目(No.2007C077M);云南省教育 厅项目(No.08Y0251) 作者单位:云南中医学院,云南昆明650500 通讯作者:袁嘉丽,Email:yj16688767@sina.com 中医学认为,余甘子甘,酸,涩,凉,归肺胃经,具有 清热凉血,清肺利咽,生津止渴,消食健胃,化痰止 咳,保肝解毒等功效,是国家卫生部颁布的药食同 源品种之一. 从临床用药来看,余甘子多以果实人药,主要 治疗咽喉肿痛,扁桃体炎,喉炎,哮喘,肺热或感冒 风热,咳嗽咽干,烦热口渴,肝胆病及消化不良,其 果实具有清热泻火,滋阴凉血,生津止咳,消食健胃 的功效. 目前,已有以余甘子为主要成分制作的多种口 含片投入市场用于防治咽部疾病.一些学者对余 甘子的化学成分,药理作用,药效等进行了分析, 明余甘子不仅具有抗微生物感染…,免疫调节的 世界中西医结合杂志2010年第5卷第l1期 W.fldJouma10fInteatedTraditi.nalandwesternMedicine2010,Vo1.5,N..11.943? 作用,还有抗氧化J,降压J,降血脂,降血糖多 种生物学活性,且无毒副作用j. 本研究选取余甘子加入药食同源的黄芪,玉 竹,甘草制成口含片,主要是取余甘子清肺利咽,生 津止渴,黄芪扶正,玉竹,甘草生津润燥之功效.目 的是通过观察复方余甘子含片对人体口咽部菌群 的调节作用,初步探讨其防治慢性咽炎的作用机理. 和方法 一 ,实验材料 1.实验菌种:金黄色葡萄球菌(ATCC25923), 大肠杆菌(ATCC25922),甲型链球菌,乙型溶血性 链球菌,肺炎链球菌.以上菌株均来自云南省临床 检验中心. 2.实验仪器:生化培养箱,CO培养箱,全自动 高压蒸汽灭菌锅,比浊仪. 二,实验方法 1.复方余甘子含片体外抑菌实验:(1)菌液制 备:将各实验菌种连续转种3d后用生理盐水稀释 菌苔,用比浊仪将各种菌液浊度统一调至0.5麦氏 单位.(2)含片的制备:复方余甘子含片委托昆明 全新生物制药有限公司制备.(3)打孔法:用无菌 生理盐水作为阴性对照,选择对G菌及G一菌敏感 的药敏纸片作为阳性对照;35?培养24h后,取出 观察并测量抑菌圈大小. 2,复方余甘子含片对人体口咽部菌群调节作用 的观察:参照《中医耳鼻咽喉科学》慢性咽炎的诊断 依据,选择在校大学生慢性咽炎且近2周内未服 用抗生素者60名,随机分成为慢性咽炎I组和慢性 咽炎?组,每组30名.同时设立健康人群对照组 (简称健康组)30名.健康组和慢性咽炎I组人群 给予复方余甘子含片,慢性咽炎?组人群给予市售 口咽含片为阳性药物对照组.从观察第1天起受试 人群每天含8片含片,连续含服14d.分别采集含 片前,后受试人群咽拭子,用于检测菌群总密集度, 优势菌甲型链球菌,菌群多样性指标.观察前均取 得受试对象的知情同意. 三,统计学处理 实验数据用SPSS16.0软件包处理,正态分布且 方差齐的计量资料采用t检验,偏态分布的计量资 料采用秩和检验. 结果 1.受试药物体外抑菌作用:结果见表1. 表1受试药物体外抑菌作用结果(抑菌圈单位:mm) 实验药金黄色葡萄球菌乙型溶血性链球菌肺炎链球菌甲型链球菌大肠杆菌 复方余甘子含片36.713.310.7一一 纯余甘子粉42.725.3242423.3 市售含片34一一一一 生理盐水一一一一一 阳性对照12.945.631.630.928 表1可见,复方余甘子含片在体外对金黄色葡 萄球菌,乙型溶血性链球菌,肺炎链球菌均有一定 的抑制作用,但对大肠杆菌,甲型链球菌无抑制作 用;而纯余甘子粉除对人体口咽部的常见致病菌有 抑制作用外,对优势菌甲型链球菌也有抑制作用; 市售含片除了对金黄色葡萄球菌有抑制作用外,对 人体口咽部常见的其他致病菌均无抑制作用;作为 阴性对照的生理盐水对受试菌均无抑菌圈.初步 分析认为,复方余甘子含片中的黄芪多糖等主要成 分对甲型链球菌有一定的促进生长作用,故表现为 无抑制甲型链球菌生长作用,而纯余甘子粉表现为 广谱抗菌作用. 2.复方余甘子含片对人体口咽部菌群的调节作 用:结果见表2. 表2复方余甘子含片对人体口咽部菌群的调节作用(?s) 堕壁皇查墓壁::垡塑堕壁!::墨壁 ?圳含片前含片后含片前含片后含片前含片后 注:与本组用药前比较,P<0.05 表2可见,给予复方余甘子含片的慢咽I组人 群含片后与含片前比较,人体口咽部优势菌甲型链 球菌明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);含片 后较含片前口咽部菌群总密集度和多样性呈上升 趋势,但差异无统计学意义(P>0.05).给予市售 口咽含片的慢咽?组人群含片后与含片前比较,口 咽部菌群总密集度变化不大,优势菌甲型链球菌呈 上升趋势,多样性呈下降趋势,差异无统计学意义 (P>0.05);给予复方余甘子含片的健康组人群含 片后与含片前比较,口咽部菌群总密集度差异无统 计学意义,优势菌甲型链球菌和多样性含片后较含 片前呈上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05). 讨论 研究发现,咽炎患者与咽后壁菌群有一定的相 关性,咽炎患者表现为菌群多样性降低,甲型链 球菌减少,其优势菌的比例降低可使口咽部菌群 屏障受损,易发生感染.甲型链球菌为人体口咽部 ? 944?世界中西医结合杂志2010年第5卷第11期 WoridJournaloflntegratedTraditiona1andWestemMedicine2010, V01.5.No.11 寄居的正常优势菌群,其通过拈抗外来致病微生物 的定植,与其他口咽部正常菌群共同构成生物屏 障,并可通过生物夺氧,菌群调整,生物拮抗而达到 防治上呼吸道感染的作用.研究表明?,甲型 链球菌对呼吸道感染的生态防治具有较好的效果, 并在防御上呼吸道感染的非特异性免疫中发挥重 要作用.有报道指出,鼻咽部的原籍菌在体内外都 有可能抑制潜在致病菌生长的作用?",这种抑菌 作用在甲型链球菌上表现得尤其明显l1.Johanso 等?发现,具有抑菌作用的细菌90%以上是甲型 链球菌.谢小军等研究也发现,甲型链球菌sN 一 34有抑菌作用.另外还有研究证明0,甲型链 球菌的减少可导致其他异常菌群的增多,使呼吸道 感染的可能性增加. 纯余甘子粉对人体口咽部常见致病菌金黄色 葡萄球菌,乙型溶血性链球菌,肺炎链球菌,大肠杆 菌等有广谱抗菌作用,若长期用于预防慢性咽炎, 由于口咽部优势菌甲型链球菌也一并被抑制,可使 局部形成生物占位空问缺损,从长远来看,不仅易 于使外来病原微生物定植,也可使口咽部不敏感的 真菌等条件致病菌得以大量增殖.复方余甘子含 片在体外抑菌实验中已发现其对甲型链球菌无抑 制作用,原因在于此含片除纯余甘子粉作为主要成 份外,还加入了黄芪,玉竹,甘草成分.其主要依据 在本研究团队的前期研究中已初步证明:含有黄 芪,玉竹,甘草的方剂有促进小鼠口咽部甲型链球 菌生长的作用. 复方余甘子含片对人体口咽部菌群调节作用 的研究结果显示,此含片可以提高慢性咽炎人群口 咽部甲型链球菌的密集度,该作用是其防治慢性咽 炎的机理之一. 余甘子对咽喉肿痛,喉炎等常见疾病有较好的 防治效果,故被广泛开发应用.本研究初步揭示了 纯余甘子粉中加人某些益气生津的中药,可避免纯 余甘子粉广谱抑菌的作用,而对调节人体口咽部菌 群更有针对性.研究初步表明,复方余甘子含片防 治慢性咽炎的机理之一为扶植正常菌群的生长,为 进一步开发余甘子提供了新的思路与实验依据. 我们认为,在进一步开发余甘子的过程中,应重视 中医中药的配伍理论,不仅要从临床经验进行总 结,而且更应该通过实验研究来探讨其作用机理. 参考文献 [1]AnjuB,NeetuD,YogeshB,eta1.Cyto—protectiveandimmunomod— ulatingpropertiesofAmla(Emblieaofficinalis)Oi3lymphoeytes:anin — vitrostudy[J].JEthn0pharmac0l,2002,81(1):5—10. 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