风疹减毒活疫苗人二倍体细胞

风疹减毒活疫苗（人二倍体细胞）FengzhenJianduHuoYimiao（RenerbeitiXibao）RubellaVaccine（HumanDiploidCell），Live本品系用风疹病毒减毒株接种人二倍体细胞，经培养、收获病毒液，加入适宜稳定剂后冻干制成，用于预防风疹。1基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。2制造2.1生产用细胞生产用细胞为人二倍体细胞2BS株、MRC-5株或经批准的其他细胞株。2.1.1细胞库管理及检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”。取自同批工作细胞库的1支或多支细胞管，经复苏扩增后的细胞仅用于一批疫苗的生产。2BS株主细胞库细胞代次应不超过第23代，工作细胞库细胞代次应不超过第27代，生产疫苗用的细胞代次应不超过第44代；MRC-5主细胞库细胞代次应不超过第23代，工作细胞库细胞代次应不超过第27代，生产疫苗用的细胞代次应不超过第33代。2.1.2细胞制备每次取工作细胞库中的1支或多支细胞管，经复苏、胰蛋白酶消化、扩增制备的一定数量并用于接种病毒的细胞为一个消化批。2.2毒种2.2.1名称及来源生产用毒株风疹病毒BRDⅡ减毒株或经批准的其他经人二倍体细胞适应的减毒株。2.2.2种子批的建立应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。BRDⅡ株原始种子批为第25代，主种子批应不超过第28代，工作种子批应不超过第31代。生产疫苗的病毒代次应不超过第32代。2.2.3种子批的检定主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1-2.2.3.4项检定。2.2.3.1鉴别试验将稀释至100-500CCID50/ml的病毒液与适当稀释的抗风疹病毒免疫血清等量混合后，置37℃水浴60分钟，接种RK-13细胞，置32℃培养7-10天判定结果。风疹病毒应被完全中和（无细胞病变），同时设血清和细胞对照，均应为阴性，病毒对照的滴度应不低于100CCID50/ml。2.2.3.2病毒滴定取毒种作10倍系列稀释，取适宜释度病毒液接种RK-13细胞，置32℃培养7-10天判定结果。病毒滴度应不低于4.8LgCCID50/ml。应同时进行病毒参考品滴定。2.2.3.3无菌检查依法检查（附录XIIA），应符合规定。2.2.3.4支原体检查依法检查（附录XIIB），应符合规定。2.2.3.5病毒外源因子检查依法检查（附录XIIC），应符合规定。2.2.3.6免疫原性检查用主种子批制备疫苗，按常规接种健康易感儿至少30名，分别于免疫前及免疫后4-6周采血，测定风疹病毒抗体，抗体阳转率应不低于95%(HI法＜1∶8为阴性，≥1∶8为阳性)。2.2.3.7猴体神经毒力试验主种子批或工作种子批应进行猴体神经毒力试验，以证明无神经毒力。每次至少用10只风疹抗体阴性的易感猴，每侧丘脑接种0.5ml（应不低于1个人用剂量的病毒量），观察17-21天，不应有麻痹及其他神经症状出现。注射后48小时内猴死亡数不超过2只可以更换，如超过20%，即使为非特异性死亡，试验也不能成立，应重试。观察期末，每只猴采血测风疹病毒抗体，阳转率应不低于80%，并处死解剖，对大脑和脊髓的适当部位做病理组织学检查，应为阴性。每次试验同时有2只易感猴作为对照，待试验猴处死后10天，第2次采血，对照猴风疹抗体应仍为阴性。2.2.4毒种保存冻干毒种应置-20℃以下保存；液体毒种应置-60℃以下保存。2.3原液2.3.1细胞制备同2.1.2项。2.3.2培养液培养液为含适量灭能新生牛血清的MEM或其他适宜培养液。新生牛血清的质量应符合规定（附录XIIID）。2.3.3对照细胞外源因子检查依法检查（附录XIIC），应符合规定。2.3.4病毒接种和培养毒种与细胞按0.01-0.1MOI接种培养瓶（同一工作种子批按同一MOI接种），置30～32℃培养，当细胞出现一定程度病变时，倾去培养液，用不少于原培养液量的洗液洗涤细胞面，并换以维持液继续培养。2.3.5病毒收获观察细胞病变达到适宜程度时，收获病毒液。根据细胞的生长情况，可换以维持液，进行多次病毒收获。同一细胞批的同一次病毒收获液检定合格后可合并为单次病毒收获液。2．3.6单次病毒收获液检定按3.1项进行。2．3．7单次病毒收获液保存于2-8°C保存不超过30天。2．3.8单次病毒收获液合并同一细胞批生产的多个单次病毒收获液检定合格后可合并为一批原液。2.3.9原液检定按3.2项进行。2.3.10原液保存于2－8℃保存不超过30天。2.4半成品2．4．1配制用疫苗稀释液将原液按同一病毒滴度进行适当稀释，加入适量稳定剂，即为半成品。多批检定合格的原液制成一批半成品。2.4．2半成品检定按3.3项进行。2.5成品2.5.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。2.5.2分装及冻干应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。分装过程中疫苗应于2-8℃放置。2.5.3规格按标示量复溶后每瓶0.5ml、1.0ml。每1次人用剂量为0.5ml，含风疹活病毒应不低于3.2LgCCID50。2.5.4包装应符合“生物制品包装规程”规定。3检定3.1单次病毒收获液检定3.1.1病毒滴定按2.2.3.2项进行,病毒滴度应不低于4.8LgCCID50/ml。3.1.2无菌检查依法检查（附录XIIA），应符合规定。3.1.3支原体检查依法检查（附录XIIB），应符合规定。3.2原液检定3.2.1病毒滴定按2.2.3.2项进行,病毒滴度应不低于4.8LgCCID50/ml。3.2.2无菌检查依法检查（附录XIIA），应符合规定。3.2.3支原体检查依法检查（附录XIIB），应符合规定。3.3半成品检定无菌检查依法检查（附录XIIA），应符合规定。3.4成品检定除水分测定外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行以下各项检定。3.4.1鉴别试验按2.2.3.1项进行。3.4.2外观应为乳酪色疏松体，复溶后为橘红色澄明液体，无异物。3.4.3水分应不高于3.0%（附录VIID）。3.4.4病毒滴定取疫苗3-5瓶混合滴定，按2.2.3.2项进行，病毒滴度应不低于3.5LgCCID50/ml。3.4.5热稳定性试验疫苗出厂前应进行热稳定性试验，应与病毒滴定同时进行。于37℃放置7天后，按2.2.3.2项进行，病毒滴度应不低于3.5LgCCID50/ml，病毒滴度下降应不高于1.0Lg。3.4.6无菌检查依法检查（附录XIIA），应符合规定。3.4.7异常毒性检查依法检查（附录XIIF），应符合规定。3.4.8牛血清白蛋白残留量应不高于50ng/剂（附录VIIIF）。3.4.9抗生素残留量检查细胞制备过程中加入抗生素的应进行该项检查，采用酶联免疫法，应不高于10ng/ml。4保存、运输及有效期于2－8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为18个月。5疫苗稀释剂疫苗稀释剂为灭菌注射用水，应符合对疫苗稀释剂有关要求。5.1疫苗稀释剂装量5.2疫苗稀释剂包装5.3疫苗稀释稀释剂有效期5.4疫苗稀释剂批准文号5.5疫苗稀释剂生产企业6说明书（注：可编辑下载，若有不当之处，请指正，谢谢!）推荐精选推荐精选推荐精选