实验2,3植物组织含水量的测定-精

实验二植物组织含水量的测定---水分测定仪法实验三植物组织水势的测定　　　　　　---小液流法含水量是示植物组织水分状况的常用指标。对于正常生长的组织，含水量的多少直接影响植物的生长状况；对于水果、蔬菜，含水量的多少对品质有着很大的影响；对于贮藏中的种子，含水量的多少对于能否安全贮藏起着决定性的作用。植物组织含水量的测定在植物生理学研究中具有重要的意义。实验二植物组织含水量的测定---水分测定仪法一、实验目的了解含水量的表示方法了解绝对含水量和相对含水量的区别掌握HG63水分测定仪的使用二、原理表示组织含水量的方法有两种：一是以干重为基数表示；二是以鲜重为基数表示。从而分为干重法和鲜重法：植物组织的含水量常用水分含量占鲜重或干重的百分比来表示。在研究水分生理时，相对含水量与水分饱和亏也是常用的水分生理指标。测定植物组织的鲜重(FW)、干重(DW)、饱和鲜重(SFW)后，用下式计算以上几个生理指标：组织含水量(占鲜重%)= (FW-DW/FW)×100组织含水量(占干重%)=(FW-DW/DW）×100组织相对含水量(RWC%)=(FW-DW)/(SFW-DW)×100组织水分饱和亏(WSD%)=(1-RWC)×100三、材料、仪器与用具1、材料：大叶紫薇(LagerstroemiaspeciosaL.)（单数组）和海芋(AlocasiamacrorrhizosL.)（双数组）。2、仪器与用具：HG63卤素水分测定仪、剪刀。顶面观HG63卤素水分测定仪主要由一台卤素加热单元和一台精密天平两个仪器组成。仪器根据热解重量原理：测定开始，水分测定仪测定样品的重量，然后，样品由内置的卤素加热单元和水分蒸发器快速加热。在干燥过程中，仪器连续测定样品重量并显示失去的水分。干燥结束时，显示水分含量和干燥物质含量作为最终结果。HG63卤素水分测定仪的特点1、操作简便、测量准确。2、采用镀金辐射体，确保样品加热的均匀性。3、兼顾样品称重和干燥功能，在干燥过程中，水分仪持续测量并即时显示样品丢失的水分含量%，干燥程序完成后，最终测定的水分含量值被锁定显示。HG63卤素水分测定仪的特点4、与国标烘箱加热法相比，卤素加热可以在高温下将样品均匀地快速干燥，样品表面不易受损，其检测结果与国标烘箱法具有良好的一致性,具有可替代性,且检测效率远远高于烘箱法。一般样品只需几分钟即可完成测定。HG63卤素水分测定仪技术参数测量值可读性水分含量0.01%重复性(sd)2g样品0.05%重复性(sd)10g样品0.01%测定结果评估水分和干重含量%√质量g√ATRODry,ATROWet√天平最大样品量61g最小样品量0.1g可读性1mg干燥单元干燥技术环形卤素灯温度范围40~200˚C温度调节增量1˚C升温程序、快速关机模式时间控制(分钟)+手动0.5-480自动关机(5级)√自由关机模式√用户支持方法测试功能(Test)√自动进样腔√测定方法储存10测定方法命名(数字)√每个样品注释行1自由因子√LCD背亮液晶显示屏√内置打印机HA-P43HG63P标配质量管理天平校验50g加热单元校验100/160˚C称量指导主动/被动参数修改保护√符合GLP/GMP的打印输出√该关机模式依据单位时间失重，只要在指定时间内平均失重小于预设置，仪器就认为干燥过程完成，并自动终止测量过程。在干燥过程中所显示的时间表示测量过程经历时间。自动关机(5级)测量结果可靠性的相关因素1.样品的制备样品制备决定了测量速度和结果的准确性。请注意样品制备的基本规则：所选择样品应尽可能小(0.1～0.5g).样品量大需要更多干燥时间，因此而延长测量过程。若样品量少，则测量结果不具代表性。注意样品的取量和均匀。样品越不均匀，样品量要求则越大。样品要均匀分布于样品盘上，尽量增加样品表面积，便于热量吸收。2.主要测量参数的正确选择干燥温度---根据样品正确选择干燥程序后（或），设置好温度。关机模式---可确定样品结束干燥的时间。干燥时间。注意：仪器上的平衡珠是否处于水平状态，称盘是否放平。1、开机按,仪器自检选择与设置“干燥程序”（快速，75℃）选择“关机模式”（出厂设置，适用于大多数样品）选择“结果显示类型”（样品水分含量以占鲜重%显示）去皮重按。2、植物叶片剪碎，注意大小尽量一致（2mm×5mm），取样均匀，快速。四、操作步骤3、按“打开/关闭自动加样室，按键，加样品0.1～0.5g取出样品盘，将样品摆匀再按一次键关闭。4、按start键，仪器开始工作。待仪器自动停止工作后，读取测量结果。准备称量状态准备去皮状态准备启动状态干燥与测量状态本次实验要有平行！结果要算出标准差。含水量（%）=78.9±0.568注意：一.实验目的：　　掌握植物细胞水势概念及计算公式，了解小液流法测定植物组织水势的方法。实验三　植物组织水势的测定（小液流法）二.实验原理：植物细胞、组织之间以及植物体和环境间的水分间移动方向都由水势差决定。当植物细胞或组织放在某一溶液中时，如蔗糖溶液。Ψw=ψл+ψρ+ψε水势=渗透势+压力势+重力势水分子的移动方向？1.Ψw＞ψл，则植物组织失水，溶液浓度下降，液滴上升。2.Ψw＜ψл，则植物组织吸水，溶液浓度增加，液滴下降。3.Ψw=ψл，则二者水分保持动态平衡，液滴不动。利用溶液的浓度不同其比重也不同的原理来测定试验前后溶液浓度的变化，然后根据公式计算渗透势。ΨwψлΨwψлH2OH2O00.050.100.150.200.25蔗糖溶液（mol/L，试管中）浸提液滴（含甲烯蓝）三、材料与方法1、实验材料：大叶紫薇(LagerstroemiaspeciosaL.)（单数组），海芋(AlocasiamacrorrhizosL.)（双数组）。2、实验步骤：1）取系列不同浓度的蔗糖溶液：0、0.05、0.1、0.15、0.20mol/L各4ml，放入刻度试管中，分别加入15片叶圆片至试管中。取叶圆片时避开叶脉3）另取6支试管编号，按顺序（从低浓度到高浓度）放入系列浓度蔗糖溶液5ml。4）用1mL注射器分别吸取各试管中着色的液体少许，伸入对应试管蔗糖溶液的中部，缓慢放出一滴蓝色试验溶液，抽出针头；然后观察和拍照小液滴移动的方向。2）放止30min以上（偶尔摇晃试管），加入1小滴（半滴）亚甲基蓝染料染色。小液滴不移动的试管蔗糖溶液的浓度，并将结果入公式计算：-Ψw=RTiC4ml5ml叶圆片放置30min以上偶尔摇动试管滴加1滴染料（亚甲基蓝）取1滴着色液滴加到溶液中部蔗糖溶液(mol/L)0.7cm打孔器15片避开叶脉1.准确配制蔗糖梯度溶液，正确使用移液管。2.叶片大小和厚薄均一，每管叶数相同。3.实验中多次摇动试管，使反应充分进行。4.亚甲基蓝只放少许，否则会影响溶液浓度。5.释放小液滴时要轻，抽针时要慢。实验实验作业1、按要求完成两个实验的实验报告2、思考题⑴用于含水量测定的材料要注意什么？⑵束缚水为何与植物的抗性有关？⑶还有哪些测定植物组织水势的方法?11科2班11组0.05mol/L蔗糖溶液0.10mol/L蔗糖溶液0.15mol/L蔗糖溶液0.20mol/L蔗糖溶液0.25mol/L蔗糖溶液