curveexpert3ELISA拟合说明

ELISA的曲线一般使用专门的曲线拟合工具，如：CurveExert1.3下面以CurveExert1.3为例说明怎么样制作：1启动“CurveExpert1.3”2X轴输入标准品的OD值，Y轴输入所对应的浓度值，如图：3．单击[运行]按钮（上图红圈圈），出现如下对话框4．单击[ok]按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框关闭下面一个对话框5.在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从“1开始依次点击曲线名称，”在右下角会出现相应拟合的曲线，。根据拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框：注意：选择系数（即“r值）最好的曲线方程来进行运算。在下面的对话框”右上角有“r值，当”“r”值越接近1拟合度越好7．按[Ctrl]键+[L]键，（或者在上图的界面上点击鼠标右键，出现analyze选项），出现如下对话框：8．输入标准的OD值，单击[Calculate]按忸，即可得到待测蛋白的实际含量。（标本稀释了N倍，运算出的数值应再乘以N）。9.如想得到ELISA拟合曲线的方程，可在步骤6的对话框空白处右击，选择”Information”10.得到如下对话框：点击“Copy”在你需要的位置粘贴即可得到如下数据：RationalFunction:y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)当抗原或抗体浓度过高时，对应的ELISA读数不会再显著升高，这时会达到一个平台期，同样在低浓度时也有一个平台期。只有在适当的浓度时才会出现类似直线的曲线，所以一般数据都要进行多参数拟和，才能得到能更准确反映实验结果的曲线，常用的有sigmoid、logistic曲线等