大鼠脑缺血再灌注后梗死体积的动态变化
大鼠脑缺血再灌注后梗死体积的动态变化 536
文章编号:1003—2754(2005)06—0536一O
JApoplexyandNervousDiseases,December2005,Vol22,No.6
大鼠脑缺血再灌注后梗死体积的动态变化
程敏,郭淮莲
摘要:目的观察大鼠大脑中动脉缺血再灌注后梗死灶体积的变化规律.方法线栓法制作大鼠局灶性
脑缺血再灌注模型,观察脑缺血2h再灌注3h,24h,3d,7d,14d及21d后的神经功能缺损评分及2氯化三苯基四氮
唑(TTc)标记的梗死体积.结果缺血2h再灌注3h组已经出现较明显的梗死灶(梗死体积占前脑体积14.4),再
灌注24h组梗死体积最大(24.3),显着大于再灌注3h,7d,14d,21d组(P<O.05).再灌注3d组梗死灶仍较大
(23.8),再灌注7d组梗死体积缩小(5.0),再灌注14d组梗死灶进一步缩小(1.2),再灌注21d组梗死灶基本
消失(O.2).大鼠神经功能缺损评分与梗死体积之间呈显着相关(r一0.61,P<0.01).
结论脑缺血再灌注后梗
死体积于24h达最大,21d时基本消失.脑缺血再灌注后神经功能缺损评分与梗死体积之间显着相关.
关键词:脑缺血再灌注;脑梗死体积;神经功能缺损评分
中图分类号:R743.3文献标识码:A
DynamicchangeofinfarctionvolumeinreversiblemiddlecerebralarteryocclusionratsCHE
NGMin,GUO
Huai—Lian.(DepartmentofNeurology,People'SHospital,PekingUniversity,Beijing100044,Chi
na)
Abstract:ObjectiveToinvestigatethedynamicchangeofinfarctionvolumeinreversiblemiddlecerebral
arteryocclusionrats.MethodsThefocalbrainischemia—
reperfusionmodelwasinducedbyinsertingasuture
throughtheinternalcarotidarteryinrats.Theinfarctionareawasmarkedby2triphenyltetrazoliumchloride
(TTC)at3h,24h,3d,7d,14dand21dafterbrainischemia—
reperfusion.Thescoresofneurologicaldeficitswerede—
terminedattheabovementionedtimepoints.ResultsTheinfarctionwasdetectedat3hafterischemia—reperfusion
(infarctionvolume/forebrainvolume一
14.4).Theinfarctionvolumepeakedat24hafterischemia—reperfusion
(24.3)whichissignificantlylargerthanthatat3h.7d,14d,21d(eachP<0.05).Theinfarctionvolumeremained
largeat3d(23.8),decreasedat7d(5.O)andalmostdisappearedat21d(0.2)afterischemia—
reperfusion.
Theinfarctionvolumecorrelatedsignificantlywiththescoreofneurologicaldeficits(r一
0.61.P<0.01).
ConclusionsTheinfarctionvolumepeakedat24handalmostdisappearedat21dafterbrainischemia—reperfusion
inrats,whichcorrelatedsignificantlywiththescoreofneurologicaldeficits. Keywords:Braininfarctionvolume;Ischemia—reperfusion;Scoreofneurologicaldeficit
脑缺血后梗死灶大小与神经功能缺损程度密切
相关.研究脑缺血后梗死体积的变化规律,有助于了
解脑缺血的病理过程,并对脑梗死的治疗提供参考
依据.有学者观察了永久性脑缺血大鼠脑梗死体积
的变化,发现永久性脑缺血大鼠缺血2h,24h内梗
死体积逐渐增大_1].该模型48h内死亡率高(大于
92),不能做更长时间的观察.线栓法大鼠大脑中
动脉缺血再灌注(rMCAO)模型大鼠存活时间长,可 以对脑梗死进行较长时间的观察.本研究采用脑缺 血再灌注模型观察了脑缺血后21d内梗死体积的变 化规律.
1材料与方法
1.1实验动物与分组SD大鼠,雄性,体重
280,330g(由北京大学医学部实验动物科学部提 供).大鼠随机分为7组:对照组,缺血2h再灌注3h 组,缺血2h再灌注24h组,缺血2h再灌注3d组,缺血 2h再灌注7d组,缺血2h再灌注14d组和缺血2h再 灌注21d组,每组4只.
1.2脑缺血再灌注模型制作10水合氯醛
(0.35ml/1OOg体重)腹腔注射麻醉.取颈正中切口 切开皮肤及皮下组织,分离左侧颈总动脉,颈内动脉 和颈外动脉,暂时结扎颈总动脉及颈内动脉,结扎颈 外动脉,在颈外动脉剪一小口,插入线栓,直至遇到 阻力为止.解除颈总动脉及颈内动脉结扎线,缝合切 口,待大鼠清醒后评分,两小时后拔除线栓,恢复灌 注,.
1.3神经功能缺损评分采用Longa评分
法[4]:无神经系统功能缺失症状,活动正常者,0分; 不能完全伸展右侧前爪者,1分;爬行时出现向右转 收稿日期;2005—06—08l修订日期:2005一10—21 作者单位:(北京大学人民医院神经内科,北京100044)
中风与神经疾病杂志2005年12月第22卷第6期总第112期 圈者,2分;行走时身体向右侧倾倒者,3分;不能自 发行走,意识丧失者,4分.术毕清醒后评分为0分, 1分,4分者均被剔除.随机补充,保证每组动物4
只.
1.4脑梗死体积测量动物于规定时间断头, 脑组织取出后即置于冰冻生理盐水,由前向后切成 层厚2mm的冠状切片,置2TTC溶液中(37C)避 光孵育,30min后显色完全(白色为梗死区),置多聚 甲醛溶液中固定.德国LeicaMZ16显微镜下将每片 脑组织照像,对其白色部分经图像分析系统测量面 积,根据公式V—t(A1+…+An)一(A+An)t/2 算出梗死体积,再进一步计算梗死体积占前脑体积 的百分比来代表梗死灶大小.其中t为切片厚度,A 为梗死面积j.
1.5统计学处理组间比较采用SPSS11.0 版软件进行方差分析.梗死体积与神经功能缺损评 分进行相关分析.P<0.05认为统计学上具有差异 性.
2结果
2.1脑缺血再灌注后梗死体积的变化脑缺 血再灌注后3h已见梗死灶(梗死体积占前脑体积 14.4%),缺血再灌注24h梗死体积达最大
(24.3),显着大于再灌注3h,7d,14d,21d组(P< 0.05).再灌注3d时梗死灶仍较大(23.89/5),显着大 于再灌注3h,7d,14d,21d组(P<0.05)7d时梗死体 积缩小(5.0),14d时梗死体积进一步缩小
(1.23),21d时梗死灶基本消失(0.2).梗死灶 位于基底节区和皮层.再灌注7d,14d,21d时梗死体 积均显着小于再灌注后3h时梗死体积(P<0.05)
(见图1).
2.2各组大鼠神经功能缺损评分情况脑缺 血再灌注3h出现明显神经功能缺损(评分为1.75),
脑缺血再灌注24h神经功能缺损最严重(评分为2); 再灌注3d神经功能缺损仍较明显(1.5分);再灌注 7d后神经功能缺损明显减轻(评分为0.75);再灌注 14d以后症状消失(14d及21d评分均为O).脑缺血 再灌注后大鼠神经功能缺损评分与梗死体积之间显 着相关(r一0.61,P<0.01). 3讨论
脑梗死再灌注是临床常见病理过程,了解脑梗 死再灌注后梗死体积的变化规律可以为脑缺血的治 疗提供参考依据.
有关脑梗死后梗死体积的研究,已有一些文献 报道.曹霞等研究证明永久性脑缺血大鼠缺血2h至 24h内梗死体积随时间进行性增大,缺血12h梗死体 积趋近稳定,与24h无明显差别[13.Young等观察 了猩猩大脑中动脉缺血6h再灌注后4周及永久缺血
发现再灌注组梗死灶显着小 4周后的梗死灶体积,
于永久性缺血组.但是,脑缺血后数周内梗死体积的 动态变化规律尚未见报道.
永久性大脑中动脉缺血模型大鼠48h内死亡率 大于92,大脑中动脉缺血再灌注模型术后动物存 活时间长,便于对脑缺血进行较长时间的观察,本研 究利用该模型研究了脑缺血后21d内梗死体积的变 化.
本研究发现脑梗死再灌注3h已见明显梗死灶; 再灌注24h梗死体积达高峰,并持续至再灌注后3d; 再灌注7d后梗死灶缩小,21d时梗死灶基本消失. 同时进行的神经功能缺损评分显示再灌注3h 出现明显神经功能缺损(评分为1.75);再灌注24h 神经功能缺损最严重(评分最高,2分);再灌注3d后
神经功能缺损仍较明显(1.5分);再灌注7d后神经
功能缺损开始恢复(评分为0.75分),14d及21d时
神经功能缺损症状消失(0分),此变化趋势与脑梗
死体积的变化规律一致.神经功能缺损评分与梗死
体积之间显着相关.
结果提示:大鼠大脑中动脉缺血再灌注后24h
3d脑缺血性损伤及神经功能缺损最严重;大脑中动
脉缺血再灌注后1周脑缺血性损伤及神经功能缺损
已明显好转,脑组织具有较强的神经损伤修复功能.
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(文本图1见加页)