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引物稀释方法引物稀释方法PCR引物稀释方法（-S为上游引物,-A为下游引物）：按照管壁上的nmol数加入10倍的灭过菌的纯化水稀释成100nmol/mL各取上游引物（***-S）10uL，下游引物10uL加入到80uL灭过菌的纯化水中稀释成10nmol/mL取稀释好的引物混合液2uL做PCR（25uL体系）定量PCR操作步骤参考（以FastStartUniversalSYBRGreenMaster(Rox)Roche为例）1）取PCR管，配制如下反应体系2×qPCRMixμlμM基因引物μl反转录产物μlddH2Oμl2）PCR扩增预变性...

引物稀释方法PCR引物稀释方法（-S为上游引物,-A为下游引物）：按照管壁上的nmol数加入10倍的灭过菌的纯化水稀释成100nmol/mL各取上游引物（***-S）10uL，下游引物10uL加入到80uL灭过菌的纯化水中稀释成10nmol/mL取稀释好的引物混合液2uL做PCR（25uL体系）定量PCR操作步骤参考（以FastStartUniversalSYBRGreenMaster(Rox)Roche为例）1）取PCR管，配制如下反应体系2×qPCRMixμlμM基因引物μl反转录产物μlddH2Oμl2）PCR扩增预变性95℃，10min循环（40次）95℃，15s→60℃，60s末段延伸60℃，5min溶解曲线75℃→95℃，每20s升温1℃

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