类风湿性关节炎中药新药临床前的药效学评价

类风湿性关节炎中药新药临床前的药效学评价 王　停1 3 , 韩　玲1 , 荆　鲁2 (11 国家药品审评中心 , 北京 100038 ; 21 中国中医科学院 西苑医院 , 北京 100091) [收稿日期 ] 　2006203212 [通讯作者 ] 　3 王停 , Tel : (010) 67892345 , E2mail :wandt123 @ya2 hoo1com1cn 　　类风湿性关节炎 ( rheumatoid arthritis ,RA) 是一种常见的 以关节组织慢性炎症性病变为主要表现的自身免疫性疾病。 主要病理变化为关节滑膜细胞浸润 ,滑膜翳形成 ,软骨及骨 组织的侵蚀[1 ] 。本病临床发病率较高 ,申报治疗本病的中药 新药也较多。从目前申报资料分析 ,药效学试验中存在以下 问题 :关于类风湿性关节炎动物模型选择较为单一 ,多只选 用佐剂性关节炎模型 ,较少考虑选用 Ⅱ型胶原关节炎模型 ; 在佐剂性关节炎模型试验中 ,未观察对继发病变治疗作用的 影响 ;未结合本品的功能主治及药物特点进行次要药效学试 验等。 1 　关于动物模型的选择 111 　佐剂性关节炎 (AA) 模型 　此模型是 Freund 于 20 世纪 50 年代创立的 ,又称福氏佐剂关节炎 ,福氏佐剂分为完全佐 剂 (CFA)和不完全佐剂 ( IFA) 。其机制是结核杆菌致关节炎 抗原为 65 ×103 热休克蛋白 (HSP) ,RA 病人软骨内具有与 65 kD HSP相似的蛋白多糖桥联蛋白抗原成分 ,FCA 注入激活 T 细胞 ,激活 T细胞参与 RA 发病机制。原发病变主要表现为 致炎局部的炎症反应 ,续发病变一般于致炎后 10～20 d 出 现 ,约 20 d 达到高峰 ,病理改变为滑膜下组织炎症 ,滑膜增 生 ,血管翳形成 ,软骨破坏。4 周后 ,关节红肿减退 ,骨质减 少 ,新骨形成 ,关节间隙变窄 ,形成不可逆的关节改变。AA 大鼠的关节组织病理学及血中变化与人 RA 相似。同时 ,对 其免疫学机制研究发现 ,此模型存在明显的细胞免疫异常 , 为一种典型的免疫性炎症模型。AA 制作简单 ,可广泛 应用于多种动物 ,便于研究者选择应用。AA 的缺点在于它 与类风湿性关节炎有较大差异 ,病变具有自限性 [2 ] 。 112 　Ⅱ型胶原关节炎 (CIA) 模型 　Ⅱ型胶原诱导的关节炎 模型是 DE Trentham等于 1977 年创立的 , 由 Ⅱ型胶原 (colla2 gen Ⅱ,C Ⅱ)诱导。Ⅱ型胶原是软骨的主要成分 ,为关节炎发 病学中的自身抗原。该模型采用 C Ⅱ配合不完全福氏佐剂 , 主要表现为多发性外周关节炎 ,关节局部红肿 ,严重致关节 畸形。病理变化为增生性滑膜炎 ,关节软骨破坏、骨侵蚀 ,关 节腔内有炎性细胞浸润。体内可检出针对自身 Ⅱ型胶原的 高滴度的 IgG抗体。这些临床表现及实验室指标与人 RA 密 切相关 ,是筛选和研究治疗 RA 药物的较理想模型 [3 ] 。 此外 ,其他如蛋清诱导关节炎模型、甲醛诱导关节炎模 型、IL21 和 TNF2a 诱导关节炎模型以及家兔卵蛋白性关节炎 模型等 ,也各有特点 ,可根据具体需要采用 [4 ] 。 总之 ,上述 RA 动物模型 ,特别是 AA 和 CIA 在临床表 现、实验室指标和病理机制上 ,既有各自特点 ,又有许多相似 之处 ,且与人 RA 在临床表现、病理、免疫有着相似或相近的 特点 ,是研究 RA、筛选抗炎免疫药物的较理想模型。需要指 出的是 , Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型与佐剂性关节炎相比 , 更贴近人 RA 发病机制 ,是近年来发展起来的重要模型 ,国外 已广泛用于抗关节炎药物的研究和评价 ,应考虑为 RA 的首 选模型[3 ,4 ] 。 2 　关于不同类别药物临床前药效学评价的模型选择 若模型选择单一 ,则使药效评价结果不确定。一般来 说 ,对于达到有效部位或有效成分的中药新药 ,应同时进行 Ⅱ型胶原关节炎模型和佐剂性关节炎致炎模型试验。对于 中药复方新药 ,可选用 Ⅱ型胶原关节炎模型或佐剂性关节炎 致炎模型进行试验 ,此外 ,还应结合本品的功能主治及药物 特点进行次要药效学的观察研究。 3 　关于对继发病变治疗作用的观察 从已申报的资料来看 ,绝大多数选用佐剂性关节炎模型 的研究者未设计受试物对继发病变治疗作用影响的试验 ,这 是导致该试验发补率较高的主要原因。分析其试验 ,不 难发现研究者对继发病变治疗作用的认识不充分 ,表现在 : ①尽管文字描述是观察对继发病变的影响 ,但试验设计并未 按照模型中继发病变出现的时间考虑 ,即试验设计有误 ; ② 没有认识到观察受试物对继发病变的治疗作用更切合临床 实际 ,未考虑到许多患者是在出现继发病变之后才进行治 疗 ,目前临床也主要观察药物对继发病变的疗效。故佐剂性 关节炎模型中应重点观察受试物对继发病变的治疗作用。 当然 ,观察对原发病变的治疗作用也有一定意义 ,因此建议 应尽可能分别观察本品对原发病变和继发病变的治疗作用。 4 　关于其他试验项目的选择 在药效学评价中 ,除应针对主要药效学动物模型进行研 究外 ,还应结合受试物的功能主治及药物特点有针对性地设 计次要药效学试验 ,如非特异抗炎试验、镇痛试验、活血化瘀 试验等 ,需特别强调的是对主要用于改善类风湿关节炎症状 的中药复方 ,这些次要药效学试验就显得更为重要。 其中 ,研究者最容易忽视的是观察受试物的活血化瘀作 用。近年来 ,有人对 RA 病人的血流变和微循环进行了测定 , ·6831· 第 31 卷第 16 期 2006 年 8 月 　　　　　　　　　 　　　 中 国 中 药 杂 志 China Journal of Chinese Materia Medica 　　　　　　　 Vol131 ,Issue 　16 August ,2006 发现 RA 病人处于高黏血液状态 ,甲皱微循环有异常改变。 经活血化瘀中药治疗前后对照显示 ,有些中药复方制剂具有 清除抗原抗体复合物 ,改善组织的缺氧、缺血状态 ,清除自由 基 ,促进机体血液循环及组织代谢 ,从而增强免疫力 ,改善高 黏血液状态和甲皱微循环异常状态的作用 [5 ] 。在进行新药 品评价中应结合受试物情况全面考虑、设计试验项目 ,以达 到能反映出受试物药效特点的评价目的。 相信随着人们对类风湿性关节炎的发病机制的进一步 认识以及类风湿性关节炎试验动物模型的进一步完备 ,治疗 类风湿性关节炎新药临床前药效学评价体系将更科学、规范 和完善。 [参考文献 ] [1 ] 　陈灏珠. 实用内科学. 11 版. 北京 :人民卫生出版社 ,2001 : 23181 [2 ] 　王春田 , 于　静. 类风湿关节炎动物模型研究进展. 辽宁中医 杂志 ,2003 ,30 (6) :511. [3 ] 　张玲玲 , 沈玉先 ,魏　伟. 类风湿关节炎动物模型与临床的关 系. 中国药理学通报 ,2002 ,18 (5) :5021 [4 ] 　王北婴 , 李仪奎. 中药新药研制开发技术与方法. 上海 :上海 科学技术出版社 ,2001 : 722. [5 ] 　申秀云 , 朱向东. 中医药治疗类风湿性关节炎的研究现状评价 及展望. 甘肃中医学院学报 , 2005 ,22 (2) :48. [责任编辑 　刘 　　 ] [收稿日期 ] 　2006205203 [通讯作者 ] 　3林育华 ,E2mail :linyuhua001 @sina1com 从药物鉴别看中药注射剂 周超凡1 , 徐植灵2 , 林育华2 3 (11 中国中医科学院 基础理论研究所 ,北京 100700 ; 21 中国中医科学院 中药研究所 ,北京 100700) 　　笔者已对中药注射剂的药物组成 [1 ]发表了看法 ,现进一 步讨论其组成药物鉴别方法的相关问题。药物鉴别的主要 目的是确认药物的真伪 ,系保证用药安全、有效的重要措施 , 应当尽可能地做到准确可靠、简便易行。随着科学技术的进 步 ,中药注射剂的药物鉴别方法有很大进步 ,但也难免存在 一些问题。为此 ,笔者在介绍中药注射剂鉴别方法概况的基 础上 ,讨论其存在问题。提出改进建议。 1 　中药注射剂鉴别方法概况 笔者仅从 1985 年我国《药品管理法》颁布执行以来 ,经 国家正式批准纳入《卫生部药品·中药成方制剂》(第 1～ 20 册) 、《国家药品监督管理局国家中成药标准汇编》(共 13 册) 、《新药转正标准》(第 1～44 册) 和《中国药典》2005 年版 一部收载的目前仍在生产使用的 109 种中药注射剂为研究 对象 ,统计其鉴别方法。 111 　单方中药注射剂 (59 种)的鉴别方法 11111 　化学反应法 　柴胡注射液等 9 种。 11112 　紫外吸收法 　鸦胆子油乳注射液等 2 种。 11113 　萤光反应法 + 化学反应法 　补骨脂注射液等 4 种。 11114 　薄层色谱法 　共 43 种。其中 ①化学成分对照 ,丹参 滴注液等 15 种。②药材对照 ,红花注射液等 7 种。③化学成 分对照 + 药材对照 ,舒血宁注射液等 6 种。④化学成分对照 + 化学反应 ,灯盏花素注射液等 9 种。⑤药材对照 + 化学反 应 ,刺五加注射液等 6 种。 11114 　无单列鉴别方法 ,但有含量测定项目可资认定 ,野木 瓜注射液 1 种。 112 　复方中药注射剂 (50 种)的鉴别方法 11211 　组成药物有无鉴别方法 　见表 1。 11212 　复方无鉴别方法的药物名称 　2 味方无鉴别方法的 药物 　丹香葡萄糖注射剂的降香 ;参麦注射剂的麦冬 ;热可 平注射剂的鹅不食草 ;乌头注射液的川乌、草乌 (只检查乌头 碱不能确认川乌、草乌均存在) 。 3 味方无鉴别方法的药物 　矾藤痔注射剂的赤石脂 ;复 方半边莲注射剂的白花蛇舌草 ;清肝注射剂的茵陈、甘草 ;复 方当归注射液的当归、川芎 (只检查阿魏酸不能确认当归、川 芎均存在) 。 4 味方无鉴别方法的药物 　脉络宁注射剂的玄参 ;艾迪 注射剂的刺五加 ;止喘灵注射剂的连翘 ;醒脑静注射剂的郁 金、栀子 ;注射用脑心康 (冻干) 的灵芝、水蛭 ;去感热注射剂 的竹叶柴胡、石膏 ;茵栀黄注射剂的栀子提取物、金银花、茵 陈 (检查绿原酸酸不能确认金银花、茵陈均存在) 。 5 味方无鉴别方法的药物 　舒肝宁注射剂的板蓝根、灵 芝 ;苦黄注射剂的茵陈、柴胡 ;复方大青叶注射剂的大青叶、 羌活 ;骨痨敌注射剂的黄芪、乳香、没药。 6 味方无鉴别方法的药物 　复方麝香注射剂的郁金 ;肝 静注射剂的板蓝根、胆汁膏、大黄 ;复方风湿宁注射剂的七叶 莲、宽筋藤、过岗龙、鸡骨香 ;乳腺康注射剂的鸡血藤、拳参、 ·7831· 第 31 卷第 16 期 2006 年 8 月 　　　　　　　　　 　　　 中 国 中 药 杂 志 China Journal of Chinese Materia Medica 　　　　　　　 Vol131 ,Issue 　16 August ,2006