【doc】 竹醋液对金针菇液体发酵菌丝体生长的影响

【doc】 竹醋液对金针菇液体发酵菌丝体生长的影响 竹醋液对金针菇液体发酵菌丝体生长的影 响 食用1-rEDmIEFUNGI 相关性,本实验结果与文献’报道的相似. 影响硒转化率的主要因素是培养基中硒浓度和培养时 间.培养基中硒浓度在一定范围内越大,转化为有机硒的量 就越多,这一点与陈文强副研究的富硒猪苓菌丝的结果相似. 从试验结果来看,菌丝体生长的最佳条件与富硒的最佳 条件相一致,说明有机硒是依靠菌丝体来作载体的,有机硒在 机体内以硒蛋白和硒多糖的形式存在,如果没有菌丝体作依 托载体,它也就不可能存在,所以菌丝体量越多,其富集的有 机硒也就越多.有机硒转化率的最佳条件与富硒条件有些不 同,当菌丝体富硒量超过一定数量时,有机硒转化率反而下 降,说明菌丝体的富硒力是有一定限度的.如果培养基中硒 含量过多,不但不会增加有机硒的含量反而会抑制菌丝体的 生长,同时也造成了无机硒的浪费. 4结论 4.1虫草菌丝体生长与富硒的最佳条件为:培养基硒浓度 60/xg/mL,培养时间5d,pH6,培养基为b麸皮培养基,其菌丝 体生长量最高可达1.916lOOmL,有机硒含量也达最大为 509.026~g/lOOmL. 4.2虫草有机硒转化率最佳培养条件为:培养基硒浓度 20pg]mL,培养时间5d,pH7,培养基为C马铃薯培养基,其有 机硒转化率最高可达18.44%. 4.3低浓度的硒可以刺激菌丝体生长,高浓度的硒对菌丝体 生长有抑制作用,可降低有机硒转化率. 参考文献 [1]罗玉秀.冬虫夏草药理作用研究现状[J].中国食用菌.2003,22 (3):39-41 [2]徐辉碧,黄开勋.硒的化学生物化学及其在生命科学中的应用 [M].武昌:华中理工大学出版社.1994 [3]周秋香,杨莉丽.硒的营养与添加工艺[J].饲料工业.2003,24 (7):24,26 【4JEija,RiittaVealainen.eta1.Effectofseleniumsupplementationon theseleniumcontentinmuscleandliverofFinnishpigsandcattle lJJ.AgricFoodChem,1997,45:810,813 [5]JuanaP.eta1.Determinationofseleniuminfreshfromsoutheastern SpainForcalculationofdailydietaryintake[J].JagricFood Chem,1994.42:334,337 [6]曹素芳.提高食用菌中硒含量的研究[J].中国食用菌,1992.l1 (5):10,12 [7]姚敏.富硒灵芝的研究[J].上海大学.1996.2(5):513, 519 [8]魏华.灵芝富硒培养研究[J].食用菌,1996,18(3):7--8 [9]王玲玲.钟士清.方祥.虫草多糖研究综述[J].微生物学杂 志.2003,1,23(1):43--45 [1O]周广麟.蛹虫草的液体培养发酵技术[J].中国食品与营养. 2000.2:26,27 [11]蔡德华,倪新江,杨立红等.姬松茸菌丝体深层发酵培养条件的 研究[J].中国食用菌.2003,22(4):47--49 [12]贺立东.分光光度法测定富硒酵母中有机硒的含量[J].食品工 业技术,2000.5(21):67,68 [13]陈文强,邓百万.液体培养猪苓菌丝富硒的研究[J].食用菌学 报,2oo3.10(1):25,27 — 12一 竹醋液对金针菇液体发酵菌丝体 生长的影响 朱忠贵李萍萍王稳沈晓昆陈永宁 (1江苏省镇江市食用菌研究所,212003;2江苏大学; 3镇江市科技局;4镇江市菜篮子工程公司) 摘要在金针菇液体培养基中.通过添加不同浓度的竹醋液, 探讨竹醋液对金针菇菌丝体生长的影响.结果表明.低浓度竹 醋液对金针菇生长有促进作用.其最适作用浓度为0.1%, 0.01%. 关键词竹醋液金针菇液体发酵培养基 文章编号10o0—8357(2o05)05—0012—02 竹醋液(也叫植物酸)是在毛竹干熘过程中所得到的具有 熏臭味的赤褐色液体,是多种有机物的混合物.它具有促进 植物生长,土壤消毒,杀菌,防虫,防腐,除草,脱臭等多种作 用.近几年来,国内外有关人士对竹醋液有过在农业方面的 应用研究,但就竹醋液对食用菌液体发酵的研究尚未见报道. 本试验通过在金针菇液体培养基中加入不同浓度的竹醋液, 研究其对金针菇菌丝体生长的影响,现将试验结果报道如下: 1材料与方法 1.1供试材料?供试菌株:玉雪金针菇,由中国农业大学 提供;?竹醋原液,浙江产,由镇江市菜篮子工程公司提供;? 液体培养基配方:蛋白胨0.3%,葡萄糖2%,KH2PO40.1%, MgSO40.05%,vB10.01%,玉米粉3%,麸皮2%.水 6400mL. 1.2试验方法?菌球培养:取50OraL的锥形瓶装培养基 400mL,1.2kg/cm灭菌40rain,冷却后无菌操作接种;每瓶接 2个1cm2的斜面菌块,使用无菌的三管式橡胶塞封口,并用硅 胶管连接装有棉花的二连球管作通气装置.重复3次.采用 三管式通气式培养,气泵通气量为60L/rain,(25?1)Xz下培养 7d.?竹醋液试验:在每个锥形瓶分别添加竹醋液,使其浓度 分别为0.01%,0.05%,0.1%,0.15%,0.2%,0.25%,0.3%. 并设1个对照组,每组4次重复,然后接入50mL液体菌种后, 如上方法培养7d,测定其菌丝球数量及生物量. 1.3测定方法 1.3.1茵丝球数量的测定取5mL的发酵液,按比例在量筒 中加水稀释,摇匀后取1mL在培养皿中摊匀,培养皿下垫黑 白相间的格纸,用方格计数法计数. 1.3.2生物量的测定(细胞干重法)取5mL的发酵液,40 目过筛,菌丝体经蒸馏水充分洗涤,真空泵抽滤,60?烘干至 恒重,电子天平准确称重,按下式计算生物量:生物量(km3) = (DCB/V)×10,式中DCB:细胞干重(kg),V:取样体积 (mL). 2结果与 2.1不同浓度发酵液的pH值变化及其他生理指标从pH 食用1lrED?IIJEFUNGl 值的测定结果可发现,7个处理中,0.01%浓度的pH值变化 最/J,,差值为0.96,0.3%浓度的oH值变化最大,差值为 2.12,其它一般在1.00,2.00.从生理生化的角度可知,发酵 液中pH值的下降,是由于菌丝体在培养过程中产生有机酸等 代谢物所致,且试验品种的不同,所产有机物的种类和数量也 不相同. 从发酵液的色泽和澄清度也可看出,红棕色的透明清亮 的菌液,说明菌株对培养液中的营养成分完全吸收,利用的比 较充分,从而生物转化率最高.发酵液的气味是菇香味,说明 培养过程正常,没有污染杂菌,从而可以为食用菌菌丝体有效 成分的提取等深加工提供可靠的依据.不同浓度发酵液的 pH值变化及其他生理指标,见表l. 2.2竹醋液浓度对金针菇茵丝体生长的影响不同浓度的 竹醋液对金针菇菌丝体的生长具有明显影响,其结果见表2. 由表2可知:当竹醋液浓度低于0.1%时,随着其浓度的增大, 金针菇菌球数量及菌丝体干重均成正比例的增加,当其浓度 为0.1%时,菌球数最多,达892只/mL,与对照组比较,增长了 40%;菌丝体干重最重,达87.27mg/mL,与对照组比较,增长 了36%.当浓度超过0.1%时,菌球数及菌丝体干重则逐渐 减少,当浓度达到0.3%时,与对照组比较,菌球数减少了 25%,菌丝体干重减少了34%. 表1不同浓度发酵液的生理指标 表2竹醋液浓度对金针菇菌丝体生长的影响 锯木屑花生壳干牛粪栽培平菇 棉子壳栽培平菇技术简单,产量高,效益好,是目前普遍 采用的原料.近年由于棉子壳价格有所上扬,使栽培利润下 降.笔者采用本地大量锯木屑资源,添加花生壳和干牛粪等, 栽培平菇成功并获得较好效益.现将其方法简介如下: l菌株与配方?平菇菌株:华平46,引自华中农业大学菌 种实验中心.?配方:锯木屑50%,花生壳30%,干牛粪 17%,石灰粉2%,石膏粉1%. 2堆料处理锯木屑和花生壳必须新鲜无霉变,干牛粪锤细 后过筛.将锯木屑和花生壳按比例称取后,用铁锹搅拌一遍, 再加入干牛粪,石灰,石膏,充分搅拌均匀,加水至用手紧握培 养料,指缝有水印但不下滴后开始建堆发酵.堆宽1.2m左右, 高1,1,4m,长度不限,用木棒从堆顶至底部打一些通气孔,上 覆膜发酵.当料温达60?时,翻堆1次,第2d即可装袋灭菌. 3灭种接种采用22cm×45cm聚乙烯筒料,装料时松紧合 适,装好后常压灭菌10h.却后两头接种,用种量15%左右 (此培养基用种过少萌发慢).菌袋一般井字形堆放,每隔7d 翻堆1次,注意通风和温度控制,第1次翻堆时用针在菌袋两 头打一些通气孔.约20d菌丝长满后即可进入出菇管理. 4出菇管理发好菌袋料面有淡黄色分泌物和瘤状突起原 基时,要解开菌袋两头,拉大温差,加强通风.促进菇蕾形成. 同时空气相对湿度保持85%,95%,菇体长至硬币大小时可 于中午喷水,采收前一天禁止喷水,约7d头潮菇即可采摘上 市.第1潮菇后,采用覆土栽培,可出4,5潮菇,此方法生物 学效率可达120%,比棉子壳栽种略低,但利润却较高. 武汉市新洲区凤凰镇政府食用菌室,430409陈猛进 农业生产有问题,农科专家来帮你;遇到问题怎么办,专家为你找答案. 上海农科热线,服务全国农业 上海”农科热线”021—62826666是上海市政府搭建的为全国农民免费提供农业生产技术和市场信息咨询的服务平台,由上 海市农科院,市农业技术推广服务中心,市畜牧兽医站,市蔬菜科技推广站,市林业站,市水产技术推广站,市农机技术推广站,市 农产品质量认证中心,上海农业网共9家科技部门联办. 上海农科热线采取电话咨询,网上直播,专家坐堂,现场指导等服务方式.全年365天,每天早8时至晚8时都有专家值班, 晚8时至第二天早8时都有电话录音,一般问题当场解答,疑难问题由多家农业科技单位会诊答复.需现场诊断的问题,两天内 有回音,并组织专人到现场会诊(目前此项服务仅限于沪郊).每星期四下午,农科热线还根据农时及农业热点问题安排专家坐 堂答疑.欢迎农民朋友随时来电,来信或登门作客. 上海农科热线管理中心地址:上海市西康路1518弄16号2楼,邮政编码:200060. 欢迎拨打”农科热线”021—62826666o 一 13— 食用曹EDmLEn『( 野生黄菊菇的驯化试验2驯化试验 曾先富廖志勇张军陈征昊 (1四川成都市第一农科所,成都610072; 2阿坝州科学技术研究院) 文章编号1000—8357(2005)05—0014—02 黄菊菇,学名珍珠尖鳞伞(俗称黄金菇,黄珍珠菌,黄花 菌,黄丝菌,金丝菌).野生黄菊菇分布于我国西南各省(自治 区)海拔较高的地区.属野生珍稀食用菌,子实体鲜嫩滑爽, 味道鲜美,同时又具有提高人体免疫功能,增进健康,抵抗疾 病和一定的抗癌活性. 1生物学特性 1.1生态习性近年来,对四川I阿坝州俄尔雅,小水沟,桌克 基,松纲等的黄菊菇生长区进行了较详细的调查.出了 黄菊菇在野外的生长规律和特点.黄菊菇生长在海拔1200 - 2600m的桦树林中,一般生长在树桩基部,有时在树干中部 也有发生.马尔康地区子实体生长季节一般在9,10月,经 测定,生长子实体的地点气温白天最高为15?左右,晚上最低 为3-5?,林间空气相对湿度85%,90%,生长基质含水量 59%-61%,生长基质的pH5.5,林区郁闭度80%--95%. 1.2形态特征黄菊菇散生或群生,群生每丛常20,40朵. 有时可达上百朵,菌盖直径2,8cm,初期为半球形至钟形,后 展开成伞状,菌盖橙黄色至金黄色粘滑,上面均匀分布褐色 尖角状翘鳞片,边缘稍内卷,常有部分残存的菌膜.菌肉较 厚,白色至淡黄色,菌柄中生,内实,直径0.5,1.2cm,长4, 15cm,圆柱形,有细小鳞片,与菌盖同色,菌环上位,有时脱落或 不明显.菌褶直生,不等长,30,40片/,稠密,淡黄色.孢 子印锈黄色,孢子淡锈黄色,光滑,圆形或椭圆形,(6.7,8.0) /an×(4.3--5.5)tan.菌丝生长前期为白色,后期变淡黄色至锈 黄色,经吉姆萨液染色观察,菌丝体为双型菌丝,有锁状联合. *本项目为四川省蔬菜育种攻关资助项目. , 搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-},搴-} 3小结 在金针菇液体培养基中,添加竹醋液,对金针菇菌丝体的 生长产生了明显的影响.通过不同浓度的竹醋液对金针菇液 体发酵菌丝体生长情况的分析,结果表明,低浓度竹醋液对金 针菇生长有促进作用,高浓度竹醋液有抑制作用,其最适作用 浓度为0.1%--0.01%.其最适的液体培养基配方为:蛋白胨 0.3%,葡萄糖2%,KI-.-I2P040.1%,MgSO40.05%,?1 0.01%.玉米粉3%,麸皮2%.pH为6,6.5,最适宜培养温 度为25?,通气培养5,6d,通气量为60L/rain,菌球直径3, 5mm,菌球数量800个/mL,菌丝干重1.3gJl00mL. —— ‘4—— 2.1菌株2002年9月23日,采集马尔康附近的山林中 黄菊菇野生菌株,用PDA培养基经孢子分离法和组织分离法 获得数株黄菊菇野生菌株材料,经技术鉴定为同一菌株. 2.2驯化试验方法 2.2.1温度试验培养基为改良PDA试管斜面.温度设定 0,5,10,13,15,18,20,22,25,28,30,33,35,38?共14个处理, 每个处理8支.0.15MPa蒸汽高压灭菌22min,冷却后接种 培养,培养10d,剔除生长不正常试管,每个处理选5支观测 菌丝长势及日生长量. 2.2.2pH试验培养基同上.pH用HCI或NaOH调整,设 定pH4,4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5,8.0,8.5,9.0,10.0, 11.0共13个处理,每个处理8支.0.15MPa蒸汽高压灭菌 22rain,冷却后接种培养,剔除生长不正常试管,每个处理选3 支从培养第4d起测定菌丝日生长量和菌丝体长势. 2.2.3培养料添加麸皮试验以杂木屑为主料,设添加麸皮 0%,5%,10%,15%,20%,25%的6个处理,再辅以磷酸二氢 钾0.1%,石灰,石膏,白糖各1%.含水量60%.罐头瓶瓶 栽,每处理30瓶,每瓶干料重250g,0.15MPa蒸汽高压灭菌 2h,接种后25,30?室温培养,菌丝体长过瓶肩时观测菌丝 体生长速度,菌丝长势及产量(头3潮). 2.2.4出菇温度试验配方:杂木屑77%,麸皮20%,磷酸 二氢钾0.1%,石灰1%,石膏1%,白糖1%. 试验于2003年6月3日至2004年2月10日分批制罐头 栽培瓶(每批9瓶,每隔10d一批),每瓶干料重250g, 0.15MPa~汽高压灭菌2h,接种后25,30?室温培养,待菌 瓶全部长满后,将菌瓶置于菇房给予85%,90%的相对湿度 和一定的散射光,出菇温度从35?至5?,观察记录子实体发 生情况. 2.2.5代料栽培试验供试配方为:?(CK)木屑98%;?木 屑77%,麸皮20%;?棉子壳87%,麸皮10%;?玉米芯 77%,麸皮20%;?木屑30%,棉子壳47%,麸皮20%;?木屑 30%,玉米芯47%,麸皮20%;?棉子壳30%,玉米芯47%,麸 皮20%;?木屑72%,麸皮20%,玉米粉5%;?棉子壳77%, 麸皮15%,玉米粉5%;?木屑30%,棉子壳47%,麸皮15%. 玉米粉5%.以上配方,除CK不加白糖外,均加白糖1%,石 膏1%,石灰1%. 用20cm×33cm的聚乙烯袋装袋,每袋装干料0.8k,灭 菌,接种后室温培养,菌丝满袋后移入菇房出菇,除CK为20 袋外,其余每个配方50袋,观察菌丝生长及出菇产量. 3结果分析 3.1茵丝体生长温度黄菊菇菌丝在5,30*(2都能生长,菌 丝最适宜生长温度为20--25”C,在5,10”(2下生长缓慢,但菌 丝洁白,生长健壮,25,30*(2菌丝生长快,但菌丝淡,弱,颜色 褐黄,在15--20”C的温度条件下菌丝白净而健壮.培养温度 超过30*(2时菌丝长速慢,稀疏,颜色偏褐黄,33*(2时菌丝停止