离子对色谱法测定复方曲安奈德乳膏中曲安奈德的含量

离子对色谱法测定复方曲安奈德乳膏中曲安奈德的含量 离子对色谱法测定复方曲安奈德乳膏中曲 安奈德的含量 山西医药杂志2006年3月弟—35t~;3-11/IShanxiMedJ—,March2006,Vo135,No.3 A(mv-s)进行线性回归处理,得到回归方程分别为:盐酸麻 黄素:A=85.7826C一9.9134,r=0.9999.线性范围为: l8.4,1844g;泼尼松龙:A=1804.6650C+70.095,r= 0.9944.线性范围为:0.402--4.024g. 2.5精密度试验 取对照品溶液,重复测定5次,每次20,结果两被 测组分峰面积的相对差(RSD)分别为1.3%和1.1%. 2.6重复性试验 取同批样品5份,按2.2.2项下制备供试品溶液,重复 测定,两组分含量分别为(10.31?0.11)g/L和(0.28? 0.007)g/L.. 2.7稳定性试验 吸取2.2.2项下供试品溶液.分别在制备后0,4,8, l2,l6,20,24h进样20L,连续按色谱条件项下测定5次, 其峰面积的RSD为0.7%,表明24h内基本稳定. ? 271? 2.8样品测定 分别吸取对照品溶液和供试品溶液各20L,注入高效 液相色谱仪,按色谱条件项下测定,按峰面积外标一点法计 算,结果见表1. 表1样品含量测定结果g/L 2.9回收率试验 取三批已知含量样品,精密量取1nlL样品,置l0nlL 量瓶中,分别定量加入盐酸麻黄碱和泼尼松龙对照品储备 液0.5nlL,然后加入甲醇至刻度,摇匀.分别吸取对照品 溶液和上述溶液各20L,注入高效液相色谱仪,按色谱条 件项下测定,按峰面积外标一点法计算,结果见表2. 表2加样回收率试验结果(n=3) 3讨论 3.1流动相的选择:根据文献[1—4]采用甲醇一0.1mol/L 醋酸铵溶液,甲醇一不同浓度的磷酸二氢钾溶液等体系为 流动相,采用醋酸铵溶液体系,虽然盐酸麻黄素峰出峰时间 适宜,且柱效高,但泼尼松龙和防腐剂羟苯乙酯的出峰时间 均延长,且吸收较弱.而采用磷酸二氢钾溶液体系,虽三者 均可分离,但峰形不好,且柱效较低,考虑到生物碱盐酸麻 黄素的色谱分离特征,通过添jj,--乙胺扫尾剂和磷酸调节 pH值,在pH3.4,6.0范围内,pH值偏大,盐酸麻黄素的 保留时间延长,峰形拖尾,理论塔板数偏低,而当pH值低 于3.4时,所有峰的保留时间均变短,各组分之间的分离度 达不到要求.经多次试验,调pH值为3.7为宜. 采用上述流动相体系,虽然可以测定供试品的被测组 分,但理论塔板数不理想(1O00,1500左右),且有部分杂 质干扰,灵敏度不高;采用本法进行梯度洗脱,可提高柱效, 排除干扰,缩短进样时间. 3.2测定波长的选择:在所选择的溶剂下,盐酸麻黄素和 泼尼松龙的最大吸收波长分别为256nlTI和240nlTI.虽然 本品中盐酸麻黄素和泼尼松龙的含量相差较大(40:1),但 盐酸麻黄素吸收强度较弱(百分吸收系数仅为l5左右). 为提高测定灵敏度,选择盐酸麻黄素的最大吸收峰位置 =256nlTI为测定波长. 参考文献 1张润婕,王亚南.贺吉川.RP一LC法同时测定氯地滴眼液中 氯霉素与地塞米松磷酸钠的含量.解放军药学,2002,l8 (3):160. 2张丽梅,王卓.徐慧欣,等.高效液相色谱法同时测定氯霉素地 塞米松滴眼两组分的含量.中国医院药学杂志.2002.22(6): 334, 3李小燕.高效液相色谱法测定氯麻滴鼻液中二组分含量.药物 杂志.2002.22(5):404. 4林洁.高效液相色谱法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素和氢化可 的松的含量.中国医院药学杂志.2002.22(8):474. (收稿日期:2005—09—06) 作者简介:文为,女,1968年8月生,主管药师,武汉大学人 民医院.430060 离子对色谱法测定复方曲安奈德乳膏中曲安奈德的含量 郧阳医学院附属太和医院(442000) 田华陈芳李白荣刘春霞 复方曲安奈德乳膏是本院研制的新制剂,具有抗炎,抗速,准确,为控制该制剂质量的有效方法. 过敏,收敛止痒的作用,主要用于治疗亚急性和慢性皮炎等1仪器与试药 皮肤科疾病,其中曲安奈德是方中主要有效成分之一.本曲安奈德对照品(中国药品生物制品检定所);复方曲 研究采用离子对色谱法对其进行分离测定,该法简便,快安奈德乳膏(自制,批号:050710,050812,05o915);甲醇为 ? 272-山西医药杂志2006年3月第35卷璺塑!:箜:2:三 色谱纯,其他试剂为分析纯.>一9A高效液相色谱仪(日 本岛津公司);Microlitertm--705手动进样器;SPI)__6A紫 外检测器;HW--2000型色谱工作站2.叭版(南京千谱软 件公司). 2方法与结果 2.1色谱条件:4.6iqlln×100iqllnOI38不锈钢柱(5tan); 流动相:甲醇一水(7o:30),内含0.04%醋酸和0.024%三 乙胺,pH4.7,流速1.0mL/min,检测波长240nnl,柱温30 ?,灵敏度0.07AUS. 2.2标准曲线:精密称取曲安奈德对照品10nag,置于100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为储备 液;精密量取储备液2,4,5,6,8mL分别于10mL容量瓶 中,加甲醇至刻度,摇匀,即得含曲安奈德20,40,50,60,80 tag/mL及100gg/mg(储备液)的对照品溶液,分别取10皿, 注入高效液相色谱仪,测定峰面积,以进样量对峰面积进行 线性回归,得回归方程:Y=1.696×10一X+1.017× 10_..,r:0.9999,线性范围0.2--1.0. 2.3精密度试验:取浓度为60pg/mL的对照品溶液10 皿,连续进样5次,峰面积平均值为347349.5,相对标准差 (RSD)为0.92%. 2.4空白试验:按复方曲安奈德乳膏处方配比制成缺曲安 奈德的空白制剂,按样品测定项下的方法处理测定,结果无 干扰. 2.5重复性考察:取同一批复方曲安奈德乳膏样品5份, 每份约1.0g,按样品测定项下的方法处理测定,测得峰面 积的平均值为231368,RSD为1.57%. 2.6空白制剂回收率试验:取上述缺曲安奈德的空白制剂 5份,每份约1.0g,分别加入1g/L的对照品溶液2mL, 照样品测定项下方法操作,计算回收率,结果其平均回收率 为98.19%,RSD为1.13%,结果见表1. 2.7样品测定:将复方曲安奈德乳膏充分混匀,精密称取 1.0g,置密盖容器中,加甲醇适量,超声处理10min,放置 ? 作者?编者?读者? 裹1空白加样回收率试验结果 至室温,转移至50mL容量瓶中,用甲醇洗涤密盖容器,洗 涤液并入容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,过滤,弃去初 滤液,取续滤液10进样,外标法测定含量,结果见表2. 表2样品测定结果 3讨论 文献[1]报道的曲安奈德含量测定方法中以甲醇,水为 流动相,经试验证实,对复方曲安奈德乳膏,仅靠改变上述 两相的比例达不到预期的分离目的,经过反复试验,在水相 中加入离子对后,能使曲安奈德同其他峰完全分离.该法 简便,快捷,稳定,达到了该制剂含量测定的要求. 采用空白制剂加样回收率试验,可最大限度地排除其 他因素干扰,能更好地反映该方法回收率的真实情况. 流动相pH值的改变会影响到曲安奈德的出峰情况及 分离度,故流动相应新鲜配制. 参考文献 l中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典(二部).北 京:化学工业出版社,2000.240—241. (收稿日期:2O05.11-16) 作者简介:田华,女,l966年4月生,主管药师,郧阳医学院 附属太和医院,4420oo 关于统计学符号使用的说明 有关统计学符号的使用,请按国家标准GB3358—829(统计名词及符号》规定.样本 的算术平均数用小 写,不用大写X,也不用M(以免与中位数M混淆);标准差用s,而不用SD;标准误用 岛,不用SE,也不 用SEM;t检验用小写t;F检验用大写F;卡方检验用希腊文小写;相关系数用英文小 写r;自由度用希 腊文小写L,;样本数用英文小写;相对危险度用R;概率用大写P;概率数值用小数表示,不用百分数.请 作者在投搞时注意. 本刊编辑部