交叉配血和定血型的注意事项

交叉配血和定血型的注意事项 一、操作技术错误(最常见) 二、红细胞标本问题 1、未加入抗体或血清 2、实验温度(37?凝集会下降) 3、未识别溶血 4、血清与红细胞比例不当 5、离心速度、时间不够 6、使用失效或错误试剂 7、实验结果、解释错误 8、离心速度过大、时间过长 9、使用了受到细菌污染的试剂 10、试验器皿不干净 11、实验结果记录、解释错误 患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞 某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗,A、抗,B试剂未能出现预期的凝集反应 红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗,A、抗,B试剂可能与这些异常的红细胞反应 使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗,A、抗,B试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应 患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏(包被)自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致 红细胞表面包被IgG类抗体 三、血清标本的问题 小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。 免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老年人ABO抗体减弱 4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱，一般只测正定 血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特异凝集。 血清中含抗,A、抗,B以外的其他红细胞抗体，如抗,M、抗,I等。 患者接受了ABO血型不同的骨髓移植 患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体 大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗,A、抗,B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A、B抗原位点，不发生凝集 四、分析和处理 1、重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误 2、查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史 3、彻底洗涤标本或试剂红细胞 4、应用抗,AB、抗,A1、或抗,H检测红细胞 5、分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰 6、室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应 7、 做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰 意外的血清学反应所致的ABO正反定不符 抗体太弱或消失 非正常高浓度的抗,A、抗,B可引起前带现象 A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗,A1 患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集 冷自身抗体，如抗,I、抗,IH、抗,IA等 自身免疫性温型抗体 同种抗体/意外抗体 五、ABO正反定不符及其处理 1、抗体太弱或消失 如新生儿、老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年龄和诊断 2、非正常高浓度的抗,A、抗,B可引起前带现象，导致假阴性,将血清稀释或用EDTA(2.5,)处理可消除 3、A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗,A1, 抗,A1只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞 4、患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集 将血清用生理盐水稀释3倍或用盐水替换技术可消除 5、冷自身抗体，如抗,I、抗,IH、抗,IA等(自凝) (1)所有试剂及细胞37?孵育，37?下判读结果 (2)将冷自身抗体吸收 (3)将血清用0.01mol/L DTT处理和再定型 6、自身免疫性温型抗体 自身免疫性溶血性贫血病人血清中可有温型自身抗体，37?反应比室温强 血清能凝集自身和其他各型红细胞，若红细胞上吸附自这种自身抗体，在自身或他人血清中均可出现凝集，正定被误认为AB型，反定被误认为O型。 用递增温度(22?，37?，45?)洗涤红细胞后再做血型鉴定 7、同种抗体/意外抗体 室温下抗-P、抗-M、抗E等，可能出现意外反应，干扰ABO血型鉴定 抗体特异性抗体鉴定，选择抗原阴性的红细胞做反定 六、应用举例 多发性骨髓瘤致ABO血型鉴定困难1例 多发性骨髓瘤(MM): 一种恶性浆细胞疾病，大量分泌异常的单克隆免疫球蛋白(M 蛋 白) ,影响红细胞表面负电荷状态,血清蛋白浓度和比例异常,A/G比例失调,红细胞呈缗钱状非特异性聚集,给血型鉴定带来一定的困难。 血型血清学检查 正定: A型，RhD(，) 反定: O型 直抗:(,) 抗筛:(，) 处理 1、吸收试验 6次洗涤后的患者压积红细胞加等量的抗,A、抗,B血清(1:128)4? 1h，离心，取上清，测吸收液的抗,A、抗,B效价 抗,A降低明显，抗,B 1:128 2、放散试验 吸收后的患者RBC用NS洗涤6次，等量的NS，56? 10,15min，放散液与5,标准 A、B RBC反应，Ac:++ Bc: - 吸收放散试验:患者RBC上有A抗原，无B抗原,为A型 3.将患者血清用O型标准RBC吸收 等份血清，等份O细胞振荡室温 15,30min，离心，取上清，转移到另一等份O细胞中，吸收后的血清与标准A、B红细胞反应，Ac: - Bc:++ 说明患者血清中有抗-B，无抗-A 患者血型最终确定为A型 RhD(，)，输注2U 经过筛选的A 型悬浮RBC后，未见任何不良反应。