唾液淀粉酶活力的测定唾液淀粉酶活力的测定
一、实验目的
了解并掌握唾液淀粉酶活力的测定方法
二、实验原理
唾液淀粉酶能催化水解淀粉,生成分子较小的糊精和麦芽糖。本实验利用碘的呈色反应来测定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度,从而测定唾液淀粉酶活力的大小。
三、实验仪器和试剂
1. 仪器
(1)多孔白瓷板 (2)50mL三角瓶 (3)恒温水浴锅 (4)烧杯 (5)500mL容量瓶 (6)100mL容量瓶 (7)漏斗 (8)吸管
2. 试剂
(1)原碘液:称取碘11g、碘化钾22g,加少量蒸馏水完全溶解后,定容至500mL,于棕色瓶中保存...
唾液淀粉酶活力的测定
一、实验目的
了解并掌握唾液淀粉酶活力的测定
二、实验原理
唾液淀粉酶能催化水解淀粉,生成分子较小的糊精和麦芽糖。本实验利用碘的呈色反应来测定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度,从而测定唾液淀粉酶活力的大小。
三、实验仪器和试剂
1. 仪器
(1)多孔白瓷板 (2)50mL三角瓶 (3)恒温水浴锅 (4)烧杯 (5)500mL容量瓶 (6)100mL容量瓶 (7)漏斗 (8)吸管
2. 试剂
(1)原碘液:称取碘11g、碘化钾22g,加少量蒸馏水完全溶解后,定容至500mL,于棕色瓶中保存。
(2)稀碘液:吸取原碘液2mL,加碘化钾20g,用蒸馏水溶解,定容至500mL,于棕色瓶保存。
(3)
“终点色”溶液
?准确称取氯化钴40.2439g、重铬酸钾0.4878g,加蒸馏水溶解并定容至500mL。
?准确称取铬黑T 40mg,加蒸馏水溶解并定容至100mL。 取?液80mL与?液10mL混合,即为终点色。冰箱保存。
Page 1 of 3
(4)2,可溶性淀粉溶液:称取烘干可溶性淀粉2.00g,先以少许蒸馏水混匀,倾入80mL沸水中,继续煮沸至透明,冷却后用蒸馏水定容至100mL。(需新鲜配制)
(5)稀释100倍的唾液
用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,然后让唾液流入量筒并稀释100倍,混合备用。
(6)0.02mol/L、pH6.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液:称取磷酸氢二钠45.23g和柠檬酸8.07g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL,配好后用酸度计或精密试纸校正pH。
四、操作步骤
(1)将“标准色”溶液滴于白瓷板的左上角空穴内,作为比较终点色的标准。
(2)在50mL的三角瓶中,加入2,可溶性淀粉溶液20mL,加缓冲液5mL在37?水浴中平衡约10min,加入0.5mL稀释唾液,立即记录时间,充分摇匀。定时用滴管取出反应液约0.25mL,滴于预先充满此稀碘液(约0.75mL)的调色板空穴内,当空穴颜色由紫色变为棕红色,与标准色相同时,即为反应终点,记录时间T(min)。 五、计算
1mL唾液淀粉酶于37?、pH 6.8的条件下,1h液化可溶性淀粉的克数,称为唾液淀粉酶的活力单位。
酶活力单位=(60/T×20×2,×n)/0.5
n ——唾液淀粉酶稀释倍数
Page 2 of 3
60 ——1h(60min)
0.5 ——吸取待测唾液淀粉酶的量(mL)
2,——淀粉浓度
20 ——2,可溶性淀粉溶液的量(mL)
T ——反应时间(min)
六、注意事项
1. 全部时间应该控制在2,2.5min,否则应改变稀释倍数,重新测定。 2. 实验中,吸取2,可溶性淀粉及稀释唾液淀粉酶的量必须准确,否则误差较大。
Page 3 of 3
本文档为【唾液淀粉酶活力的测定】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑,
图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。