【doc】葡萄糖注射液中5—羟甲基糖醛的PHLC测定

【doc】葡萄糖注射液中5—羟甲基糖醛的PHLC测定 葡萄糖注射液中5—羟甲基糖醛的PHLC测 定 中国医药工韭杂志ChineseJour~lofpharrn~ceoticMs95,26(1l d一 葡萄 7三7-2 糖注射液中5,羟甲基糠醛的HPLC测定 袁建平伍红曹玉 (华南理工大学轻工食品学院,广州510641;'华南理工大学附属院,广州510641) 要采用高效液相色谱法,以Am~nexHPX-B7H氢型阳离子交换色谱柱,以及帛联的紫外光度 检测器和示差折光检测器,可同时测定萄萄糖注射液中的萄萄塘及降解产物5一羟甲基糠醛. 关键词5_羟甲基糠醛葡萄糖注射液高效液相色谱法测定 含有葡萄糖(1)的各种注射液在生产过 程及贮存期间会出现降解现象.其主要降解 产物系5一羟甲基糠醛(2),高含量的2在输 液过程中可能引起血栓性静脉炎,还可能与 肝素等药物相互作用.因此,测定并控制 1注射液中2的含量在生产及临床上有着重 要的意义. USPXxI,BP1980及中国药典(1990 年版二部)都对葡萄糖注射液规定了限度试 验,采用紫外分光光度法检测2及相关物质. 但该法专一性差,如茶碱葡萄糖注射液中的 茶碱在flSOam波长处也有较强吸收,须先除去 茶碱后再进行测定.另有用比色法测定 的报道,国内在进行活性炭除2的研究中, 也缺乏准确的定量.有关2的测定方法 国外有大量文献报道,包括衍生化分光光度 法,停流注射法,流动注射分析 法及高效液相色谱法"";但大都采 用反相色谱分离技术,不能同时检测样品中 的l.本文研究用氢型阳离子交换色谱柱并 配以串联的双检测器,为各类葡萄糖注射液 中t与2的同时测定提供一种快速准确的分 析方法.可用于葡萄糖注射液及其它含葡萄 糖药品的生产过程控制与质量检验. t实验方法 t.1仪器与试荆 Varian6080型高效液相色谱仪UV- 100型可变波长光度检测器,RI一3型示差折 光检测器及Vista401型色谱数据处理仪(美 国Varian公司),B一5O型超声波发生器(美 国Branson公司). 2(AIdr~chChem,Co,售品);t,乙腈及 硫酸均为分析纯. 1.2色谱条件 色谱柱:AminexHPX一87H氢型用离 子交换树脂柱(3o0×7.8mm,美国Bio-Rad 公司);流动相:乙腈-0.005mol/LH2SO (40:6O),在超声波发生器上脱气约30min, 流量为0.6ml/min;检测器:由紫外光度检 测器和示差折光检测器串联组成,洗脱样品 先经前者检测2,再经后者检测1. 1.3溶液配制 配制浓度为50~g/ml的2储备液,再稀 释得不同浓度的标准溶液. 若同时定量1,则需配制t与2的混合 标准溶液. 2结果与讨论 2.t色谱分离条件的选择 色谱柱:选择氢型阳离子交换色谱柱.能 同时测定t和2. 流动相:选用含4O两乙腈的稀硫酸溶液 为流动相,可同时分离测定样品中的1及2. ? s惦?中国医药工业杂志ChinosoJournalofPmaceutica1目t995Ze(t 检测:糖对紫外光基本无吸收,而2的 含量一般极微,采用双检铡器,对二者分别进 行检测,并用双通遭方法,同时对两个色谱图 进行数据处理. 根据文献"报道,选择2的检测波长为 284nm. 标准溶液的色谱分离:在上述色谱条件 下,标准溶液中2与1分离的色谱图见图1. A系示差折光检测器检测到的|色谱图,B 系紫外光度检测器检测到的2色谱图. 图12与1的分离色谱圈 ^圈:I(RI检列)B圊2(uv捡徂I) 2.2线性范围及响应因子 标准曲线:配制浓度分别为1.0,5.0, 10.0,2O.0,30.0,40.0及50.0~g/ml的2标 准溶液,取样10l直接进样测定.以浓度 (C)为横坐标,峰高(D)或峰面积(S)值为 纵坐标分别绘制标准曲线.结果明,2浓度 在O,50ag/ral的范围内与峰面积呈线性关 系,在O,30/~g/ml的范围内与峰高呈线性 关系. 平均响庄因子(RF):由RFc/s(浓 度与峰面积之比)计算各浓度下的响应因子 及平均响应因子,见表1. 自.8重现性及回收试验 重复取样品溶液10l测定数次,以峰面 积值s乘以平均响应因子,得出各次测定的 2含量,求得平均RSD为O.35为. 在宙已知浓度的葡萄糖注射液样品中 表12测定的响应因子盯 平均响应因子 标准偏差 相对标准偏差(落 4B rf?耐 圈2',备葡萄糖注射液色谱圈 A图:t(RI检测)B图:z(uV检测) D'Br( 圈05葡萄糖氯化钠注射液色谱圈 A圈:t(RI检测)B图:2(UV检测) 表22测定结果 加X--定量的2进样分析,求得平均回收率 妒_. X×1哪? l —蟑萋些塑查!皇竺兰!!!!皇竺!!!蔓!1一~1995?塑1)'轴f 为99.03%. 2.4样品澳I定 葡萄糖注射液的样品经适当稀释,取1O l直接进样分析.测定结果见表2.图2和 图3为两种葡萄糖注射液的分离色谱图. 参考文献 1HowellsJs,JohnstonD.VojvodlcPRA丑 Proc,1988;2S(6):162 2CookAP.M.aclo3dTM,Appl酏onJDeta1.J Chrom~togr,1989;467f2):395 3Hry~cewicgCL.ByrneFK,Jw=obusRiftJ PhsrmSei,1988;TI(1S):1066 ?王长虹,罗俊芳.中国医药工业杂志,1998;24(11): 509 5垒荚熙,谭晓慧,张继井等.中国药学杂志,1990;墨 (E):294 ?Espinos~-MansillaA.MunozdelaPeuaA. Saliva~Fet4j.AnalChimAc恤1993;275 (1=J:141 7Espinom.-?n{11aA.Salin2.sF.Berza%Nevado JJ.JAOACIzt,1999;75(4):678 SEspino~一~sillaA,MunozdelaPe媳A. S~lingsF.JAOACInt,1993;76(9):1265 9SeLlinasF.Espin~sa—Mx.nstllaA.Berza~Nevado JJl~eseniusJAnalChem.1991;$40:BS0 10L0CocoF.ValeutiniC.NovelliVal,J LiqChromatogr,1994,17(s):603 llGomisDB.Alv~rezMDG.Naredo工Set4. Chrome.togr,1991;32f1/2):45 12Gcia-ViUanmB.GuerrHe姐岫dezE.Mar? tinez-GomezE4.J姆icFoodChem.1993; 41re):1954 HPLCDETERMINATION0F5一HYDR0XY__ METHYLFURFURALINGLUC0SEINJECTIONS YUANJian-Ping,wuHong,ZENVlx~ (CollegeofLightIndustryandFoodEngineering;*AffiliatedHost~ta1.Southc觚4 Universily.,Tecology.Cuangzhou51~4t) ABSTRACTDetermination0f5-hydroxymethylfurfural(2)isasnalofthe degr~lationofglucose(1).AHPLCmethodfOrthesimultaneousdetermination of1and2inglucoseinjectionsisreported.nlesamplesareanalysedonan AminexHPx一87Hcolumn(300×7.8ram)withacetonitrile/0.005tool/LH2sO. (40:60)asmobilephaseandwithdualdetectors.aUVdelector(284nm)tomeasure 2.andarefractometertomeasllre1. KeyWords5-hydroxymethylfurfural,glucoseinjection,HPLc,determinatioa [1994年12月2O日收稿】 一 . 7一硫酸地贝卡星的三波长分光光度测定 7.苎!堕—坠 (广东省药品捡验所-广州510】8O) 搞要硫酸地贝卡星在碱性条件下与丙酮及亚硝基铁氰化钠反应生成紫红色产物, 选择515nm,565 nm和615nm进行三波长法沁定能有效排除背景干扰,在O.IN1.4mg/ml浓度范围 内线性关系良 好(,=O.9997),平均回收率99.8,方法简便,快速,准确. 关键询硫酸地贝卡星三被长分光光度法测定付 ?