高效液相色谱法测定复方川贝止咳糖浆中甘草酸含量

高效液相色谱法测定复方川贝止咳糖浆中甘草酸含量 高效液相色谱法测定复方川贝止咳糖浆中 甘草酸含量 药物鉴定2007年第l6卷第4期 高效液相色谱法测定复方川贝止咳糖浆中甘草酸含量 陆文俊 (广东省云浮市药品检验所,广东云浮527300) 摘要:目的建立测定复方川贝止咳糖浆中甘草酸含量的高效液相色谱(HPLC法).方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,色谱柱为 c..柱(250mmX4.6mm,5IXm),流动相为甲醇一0.2mol/L醋酸铵溶液一冰醋酸(67:33:1),检测波长为250nm.结果甘草酸线性范围 是0.04004,4,0O43IXg,r=0,99999,平均回收率为98.8%,RSD=0,87%(/1,=9).结论HPLC法简便,准确,可靠,适用于复方川贝止咳 糖浆中甘草酸的含量测定. 关t词:复方川贝止咳糖浆;甘草酸;高效液相色谱法;含量测定 中图分类号:嗍.1;R286.0文献标识码:A 甘草具有补脾益气,清热解毒,祛痰止咳,缓急止痛,调和诸药 之功效.笔者采用高效液相色谱法(HPLC法)对处方中的甘草进行 定量控制,现报道如下. 1仪器与试药 岛津LC10ATvP—SPD型高效液相色谱仪;岛津uV一2401型 紫外可见分光光度计.甘草酸单铵盐对照品(中国药品生物制品检 定所,纯度为96,6%,批号为110731—200409);复方川贝止咳糖 浆(广东罗定制药有限公司,规格为150mL);甲醇为色谱纯,其余 试剂为分析纯;水为超纯水. 2方法与结果 2.1色谱条件及测定方法… 色谱条件与系统适用性试验:色谱柱为DiamonsilC..柱 (250lnlnx4.6mm,5IXm),以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲 醇一0,2mol/L醋酸铵溶液一冰醋酸(67:33:1)为流动相,检测波 长为250nln.主峰与邻近的杂质峰的分离度应大于1.5,理论塔板 数按甘草酸峰计算应不低于2000. 溶液制备:取甘草酸单铵盐对照品适量,加流动相制成每1mL 含0.1mg的溶液即得对照品溶液(每1mL含甘草酸单铵盐0.1rag, 折合甘草酸为0.09795mg).精密吸取本品25mL,置50mL量瓶 中,加流动相稀释至刻度,摇匀即得供试品溶液. 测定法:精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20,注入液 相色谱仪,测定. 2.2方法学考察 2.2.1理论塔板数及分离度试验 取本品(批号为060501),按2.1项下方法测定,根据耐用性试 验中色谱柱的考察试验结果并结合2005年版《中国药典(一部)》 甘草含量测定项下规定,确定本品在此色谱条件下测定时理论塔 板数应不低于2000,并将其列人质量标准.主峰与相邻峰之间的 分离度均大于1.5,符合药典要求. 2.2.2加样回收试验 1甘草酸加样回收试验结果 ? 40- 备方法制备阴性对照品溶液.吸 取对照品溶液,供试品溶液,阴 性对照品溶液各20,分别注 入液相色谱仪,按色谱条件进行 分析,结果见图1.可见,对照 品,供试品中甘草酸的出峰保留 时间为13.1rain,阴性对照品在 甘草酸出峰保留时间处无相应 供试品溶液的稳定性考察:精密吸取本品(批号为O6O202) 2007年第l6卷第4期 酶法测定盐酸氟桂利嗪胶囊溶出度的考察药物鉴定 彭彩萍,邓茂芝,龙玉琼 (江西省宜春市药品检验所,江西宜春336000) 摘要:目的建立有效的体外溶出度测定方法.方法采用在溶出介质中 加酶与不加酶两种方法分别测定不同厂家的盐酸氟桂利嗪胶囊的 溶出度,并将两法测定结果进行比较.结果与结论对用药典法测定的 溶出度不合格的盐酸氟桂利嗪胶囊,两法的测定结果有显着性差异. 关t词:盐酸氟桂利嗪;胶囊溶出度;胃蛋白酶 中图分类号:R927.11;R972文献标识码:A文章编 号:1006—4931(2007)04—0041一O2 StudyonDissolubifityofFlunarizineHydrochlorideCapsulebyEnzymologicMethod PengCaiping,DengMaozhi,ng (YichunInstituteforDrugControlofJmn~iProvince,Yichun,Jiangxi,China336000) Almtrt~t:ObjectiveToestablishavalidmethodofinvitrodissolubilitydetermination.MethodsThetwome~odswithorwithoutpepsin inthemeILstruumwereusedtodeterminethedissolubilityofflunarizinehydrochloridecapsuleproducedbythedifferentfactories.Theresults 0fthetwomethodswerecomp~edandanalyzedWimthemathematicalstatistics.ResultsandConclusionTheresultsofthetwomethods havesign~cantdifferenceintheflunarizinehydrochloridecapsuleswithunqualifieddissolubilitydeterminedwiththemethodaccordingto theChinesePha~poeia. Keywords:flunarizinehydrochloride;capsuledissolubility;pepsin 实验中发现部分胶囊在加速试验条件下可产生交联,或由于 环境温度升高而使明胶胶囊交联化,形成的交联凝胶可包裹胶囊 的内容物,从而延迟囊壳的分解和内容物的释放,导致药品的溶出 度不符合规定.因此胶囊制剂在贮存期间出现崩解时限或溶出度 不合格的原因有可能是空心胶囊的质量造成的.第28版《美国药 典》溶出度试验通则规定,硬(软)胶囊制剂的体外溶出度测定采用 两步法:第一步,采用不含酶的溶出介质进行试验,若不合格,则第 二步继续采用含酶的溶出介质模拟胃液和肠液进行试验.笔者采 用在溶出介质中加胃蛋白酶(450000U)与不加酶两种方法,对不 同厂家的盐酸氟桂利嗪胶囊的溶出度进行测定,以探讨在溶出介 质中加酶对样品溶出度的影响. 1仪器与试药 RCZ一8B型溶出度试验仪(天津天大天发科技有限公司): 25mL,按2.1项下方法制备供试品溶液.于0,1,2,4,8,10,21,23h 时分别吸取供试品溶液20,注入液相色谱仪测定.结果峰面积 的RSD=1.08%(n=8),说明供试品溶液中的甘草酸在23h内化 学性质稳定.. 供试品溶液制备方法考察:1)直接稀释法.精密吸取本品(批 号为060202)25mL,置50mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀 即得.2)提取法.精密吸取本品(批号为060202)25mL,用水饱和的 正丁醇振摇提取4次,每次30mL,合并正丁醇液,用正丁醇饱和的 水50mL洗涤,弃去水液,正丁醇液回收至干,残渣加流动相适量 使溶解,移至25mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀即得.精密吸 取20,注人液相色谱仪,测定.结果直接稀释法测得的含量为 83.9~g/mL,提取法测得的含量为36.4~g/mL,说明直接稀释法 测定的含量高,操作方法也更简便,有效,合理. 色谱柱考察:精密吸取本品(批号为060501)25mL,按2.1项下 方法制备供试品溶液,使用不同的色谱柱进行测定.结果Kromasil Cl8色谱柱(250nnn×4.6mm,5m),DiamonsilCl8色谱柱(250舢× 4.6mm,5m),DiamonsilC,s色谱柱(150nnn×4.6toni,5m)测 得的含量分别为74.73,74.O8,73.73l~g/mL,RSD=0.69%,说明 色谱柱改变时测定结果不受影响. 柱温考察:精密吸取本品(批号为060501)25mL,按2.1项下 TU一1901型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公 司);PHS一4CT型酸度计(上海大普仪器有限公司);ACO一3102型 真空抽泵(HAILEA);SK250LHC超声仪(上海科导超声仪器有限公 司).盐酸为分析纯;胃蛋白酶(规格为3000,3500U/rag,批号为 20050411.华美生物公司);盐酸氟桂利嗪胶囊(市场抽验样 品,为不同厂家的14批产品,编号为A,N). 2方法与结果 2.1试验条件 采用溶出度测定第一法(转篮法)测定.转速为100r/rain,时 间为30min,测定波长为253nm,吸收系数日为439,溶剂A(稀盐 酸24mL加水至1000mL)600mL,溶剂B(稀盐酸24mL加水至 l000mL)600mL(含胃蛋白酶450000U). 2.2胃蛋白酶浓度的选择 方法制备供试品溶液,比较不同柱温对样品色谱峰分离情况的影 响.结果在lO,2o,3O,40?的柱温下,供试品溶液色谱图中甘草酸 峰与相邻峰的分离度均大于1.5,符合药典规定. 流速考察:精密吸取本品(批号为060202)25mL,按2.1项下 方法制备供试品溶液,比较不同流速对样品含量测定结果的影响. 结果流速为0.8,1.0,1.2mL/min时测得的含量分别为86.34, 85.88,84.13~g/mL,RSD=1.36%.说明流速改变时测定结果不 受影响. 2.3样品含量测定 取本品,依法测定,结果10批样品中甘草酸平均含量分别为63.8, 105.6,83.9,ll3.8,73.6,76.7,91.0,95.8,72.8,73.6p.g/mL(n=2). 3讨论 用2005年版《中国药典(一部)》甘草中甘草酸含量测定所用 的流动相,检测到的甘草酸峰有较好的分离度和较高的理论塔板 数,结果满意.HPLC法简便,准确,稳定性和精密度高,重现性好, 可作为该制剂中甘草酸的质量控制方法. 参考文献: 【1】国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)【M】.北京:化学工业出 版社.2005:59. (收稿日期,’2006—07—17) ? 41?