细叶小羽藓(Haplocladium microphyllum)配子体组织培养的消毒方法

细叶小羽藓(Haplocladium microphyllum)配子体组织培养的消毒方法 农业与生命科学版) ,( : ,,,, ,,浙 江 大 学 学报 ( ) ,, ,, ,，,, , , , ,,,,, ,,,, ,, ,, , , ; , , ), , , ,, ,,, ,, ,, ( , ( , ,,,,;( , , — , , , , ) ,, , ,文 章 编 号 : , , , , ( , , , — , ,, , :, , , , ( , ( , , , , ( , , , ( , , , ，, (, ,,, , , ,— ,, , , (, , , ,, ， ,, ,;, ,, ;, , ,, 细 , , 羽 藓 ( , , ,,, ,,, , , ,,) 配 子体 组 织 培 养 的消 毒 方 法及 蔗糖 浓 度筛 选 张 楠 ，杜 宝 明 季梦 成 ， ,杭 浙 ,, , , 浙 浙 临安 , , , ) ( ( 州 绿 风 园 林 建设 集 团 有 限 公 司 ， 江 杭 州 , , , ( 江农 林 大学 园林 学 院 ， 江 ， ,, , ,, ,;, , , ;, , , , 的 通 研 摘 要 以 细 叶 小 羽 ??( , , , , , ,,, , , ,, ) 茎叶 体 为 外 植 体 ， 过 正 交 设 计 试 验 ， 究 消 毒 并 芽 原 增 剂 以及 取 材 部位 对 配 灭 菌 效 果 的 影 响 ; 通 过 芽 体 长 度 、 体 个 数 、 丝体 直径 、 子 体 殖 系数 等指 标探 结 细 ( 讨 不 同蔗 糖 浓 度 对 细 叶 小 羽 藓 生 长 的 影 响 ( 果 表 明 : 叶 小 羽 藓 配 子 体 的 最 佳 消 毒 方 法 为 , , ,, ,,在 并 ,, , 处理 老 枝 与 分 枝 交 叉 处 , ; 初 代 培 养 基 中加 入 蔗 糖 能促 进 细 叶 小羽 藓的 生 长 ， 随 蔗 糖 浓 度 的 其促 进 作 用增 强 ， ,, , , 当蔗 糖 质 量 浓度 达 到 , ( , 升 高 时 ， ( ,; 芽体 个数 为 , , ， 芽体 长 度 可达 , , ,， ( , 原 (,; 增 ( , 当蔗 糖 质 量 浓 度 超 过 , ( 。 细 叶 小 羽 藓 芽体 长 度 及 芽体 丝体 直 径 为 , , ,， 殖 系数 高 达 , , ; ,, ,, 对 原 增 ,, , 数 生 长 的 促 进 作 用 开 始 降 低 ， 丝 体 生 长 受 到 抑 制 ， 殖 系 数 显 著 低 于蔗 糖 质 量 浓 度 为 , ( 时 细 叶 小 羽 藓 配 子 体 的增 殖 系数 ( 配 关 键 词 细 叶 小 羽 藓 ; 子 体 ;消 毒 方 法 ;蔗 糖 浓 度 中图分类号 ,, , , , ( 文 献 标 志码 , , ,, , , ,,, ，儿 ,, , ; , , 】 ,,,, , 一，,, , — , , , , ,, , , ,, ,, , ,, ,, , , , —, , ( (,, ,, , , , , , ,, ,, ;,, ,, , ,， , , , , , , ， , ,, , ( ,, ， ,, , , , , , , ,, , , , , , , ,, ; , ,, ， , , , , , , , , (,; , , , ,, , ; ,, ,, ,,;, , , , ,, ,, ,, ,, , , , ,, 。,, ,, , , , , ，,, , ,，,, , ,,, , , , ,,) , ,, , ,, , ,, , , , ; , , ; ; ,,, , ,, ,, , ,,, ,; ,,, , , ,, , ; , ,,, ,, ,,, ,, , , , , , , , ,, , , ,,, , ,; ,, , , , ,, , , , ,,, ,,, ; , , , ,, ,, , , , ,, ,, , , , ,, ,,, ,,,, ,, ,( , , ,) , , , ( ):, — , , , ,,, , , (, , , ,, , ,, ,, ,, ,,, ( ,; , ，, ;( ，, , ， , , , ,, , ,,; ,, ,, , ,, , , ,, , ,,, ; , , ,, , ,, , ,; , , ,,, , ,, ,,, , , , , , , , , ,, ,,,,, ,, ,, ,,,, , , ; ,, , ,, ,,,, , ,,,, ,, , ,, ,, , , ,, , , ,,, ; ,,, ,, , ,,,, , , , , , , ,,,,, , ,,,， , , , ,, , ,, , , , ; , ,,,, , , , ,, , , ,,, , , ,, ,,, , , ,, , , ; ,, ,; ,, , , , , , , , , ; , ,,, , , ,,, , ; ,; , , ,,, , ,, , , ,, , ( , ,, ,, , , ,, , , , ,, , , , , , ,,, , , , , , , , ,,, , , , , , ,,, , , , ; , ,,, ,, ,,, ,， ,, , ; , , , , , ,,, , , , , ,, ,, ， , , , , , , ,,, , , , , , ,,, ,, ,, , ,,, , , ,,, , , ,, , , ,,,; ,, ; , ,;, ,( , , , ,,, , ,, ,,,, ,, , ,, (, , , ,,,,,, , ,, , , , , , , , , , ,, , , , ;, , , , ,,, ,,, , ,, ,,, , ,, , ,, , ,,, , , , ,,, , , ,, , , ,:, ,, , ,, , , , , ; , , ,; , , , , , , ,, , , ,,, ,, , , ,,, ,,, , , , , ,, , ,( ,, , , ,(, ,, 一 ， , , , , , ,,, , , ,, ,( ,; , , , , , ,, , , , , , ,,,,; , , ,, ,; , ,, , ,, , ,, , ,,, ; , ,,, , ,,,, ,，, ,,, , , , , ,, ,,, , , , ,, ，, ,, , ,, , , , , , (, ,, ,, , , ,,,, , ,, ,, , , ; , ,, ,; , ,,, , , , , ,; , , ; ; ,,, ,,,( , ,, , , ? , ,, ,, , , ,,,,, , ,; , ,,, , , , ,, , , ,, , , , , , , ,, , , , ; , , , , ,,, , , , ,,, , , , ,, ,, , , ,， ,,, , , , ,, ; ,,, , , ,, ， , ,, ,,,, ,, , ,， ,, , , , , , , ,,, , , ,, , ,, ,, , , ,,, , , ,, , ,,, ,; ,,, ,, ,;, , (,, ; ， , ,,， , , ; , ,,， , , ; ,, ,( ,, ,,, , , ,, ; ,,,,,, , , , , ( (, , ,, ,( , ,, ,, , , ，, , ; , , , , , , , ,? , , , , , , , , ,, ,,,, , , , ,, ,, , , ,, , , , ,, ,,, , , , ,, ; ,,, , , ,, ， , ,, ,; , , , ,, , , ,,, ,, , , ( , , , ,,,,,, ,, , ;, , , , ,, , , , ,, , , , ,,,, , ,, , , ,, , ,, , , , , , , , , , ,, , ,,。 , ; , , , , , ; , , ,(, , , , ,, , , , , , ; ,,;, ,,, , , ,; , , , ,, , , ,, , , , , , ,, , , ， , ,, ,, ( , ,, — , 收 稿 日期 :, , , , , 国 , , , , )浙 ,,, ,, )浙 基 金 项 目 : 家 自然 科 学 基 金 资 助 项 目 ( ,, ,, ; 江 省科 技 计 划 资 助 项 目( , , , , , ; 江 农 林 大 学 研 究 生 科 研 创 新 , ,, , , ) 基 金 资 助 项 目( , , , , , 张 ,, 一 ， 山东 德 州 人 ， 士 ， 事 园 林植 物 应 用 研 究 (, ,,,, ,, ,, (, 作 者 简 介 : 楠 ( , , )女 ， 硕 从 : — , , , , , , ;, 季 男 教 从 ,, , —, , , , , ,,, ,, ,, , , , ( : , 通 信 作 者 : 梦 成 ， ， 授 ， 事 苔 藓 植 物 分 类 及 园林 植 物 应 用研 究 (,,:, ,, ,, , ; , ,; , , ,(, (, 第 ,期 等 细 ,, ,;, ,, ;, , ,, 配 张楠 ， : 叶小 羽藓 ( , ,,, , ,,,, ,,,) 子 体 组 织 培 养 的 消 毒 方 法及 蔗糖 浓 度 筛 选 , ,, , ,, , , , , ,, , ; , , ,, , , , , , , ,, , , , , , , , ,, , ;, , ,, , , , , , ; , , ,, , , , , , ;, ,, , , , , , ;, , , , , , ,, , ,;, ; , , ; , , ,, ,, , ,, ,; ,, ; , ,, 细 叶小 羽藓 ( ,,,,, ,, , , , ,) , , , ,溶 液 冲洗 干净 ， 外 植体 上 的 ,, , 放入 不 同浓 , ,, ;, ) 小 , 在隶 属 于羽 藓 科 ( , ,, ,, 、 羽藓 属 ， 中 国 ,, 用 无 菌水 清 洗 干净 ， 度 的 ,, , ， 在 大部 分, 。中消毒 地 区 、 印 锡金 、 度 、 朝鲜 、 俄罗 斯 、 日本 、 欧 灭 过 菌 的滤 纸 上 吸干 试 验 表 面 的水 分 ， 剪 〕其洲及 北美 洲 都 有 分 布口 ， 生 境 为 低 海 拔 林 地 ( , 成 , ,; 左 右 的小段 接种 在培养 基 上 (土面、 , 墙基 至 ,, , , 林 缘 背 阴 湿 润 的具 土 岩 ( ( ,, , 消毒 剂 及取 材部 位 的 筛 选 消毒 剂 面 、 木及 树 木 基 部 ( 叶小 羽 藓 色 泽 鲜 绿 ， 腐 〕细 。 ,) 及 取材 部位 的筛 选 采 用 , ( 。 的 ,水 平 ,因 密质感 细致 ， 集交 织生 长 ，在森林 等 生态 系统 中 个 表 ) 素 , 处理 的正 交设 计 ( , ( ,发 挥 着 , 固定 、水土保 持 、 营 涵养 水 源 、 养 物 表 , 细 叶 小 羽 藓 配 子体 消 毒 方 法 筛选 的 正 交试 验 设计 , 由 ,〕质 的循 环 与 贮存 和森 林 更 新 等 生 态 功 能 , ， ,,, , , , , , , , , , ,, , , , , , , , ,, , , , ,, ,, , ,, , , , ,, , , , , , ; , , , , , , , , , 、 , , 、 ,, 于对 ,, , 、 , , 、 ,,种重 金属 有很 强 的富 , , , , , ,( ,, , , ,,,, , , , , , ,, , , ;, , , , ,, , ,, , ，集 能 力 〕 它也 是 良好 的大气 环境 指示 植 物 (该 生 植 越种 为交织 生 长 型 ， 长 速 度 快 ， 株低 矮 ， 冬 能力 强 ， 不 〕在 易于 栽 培 ， 易 受 病 虫 害 侵 扰 ， 园 林 上 可作 为地 被植 物 ， 树桩 盆 景 的辅 以及 山水 、助材料 等使用 ( 细 此外 ， 叶小 羽 藓还 有 清 热解 毒 可用 于治 疗 扁桃 体 炎 、之功效 ， 肺炎 、 中耳 炎等 ， 〕 用本 品制 成 的青苔 素针剂 功效与青 霉 素相似 ( 建通过对 细 叶 小 羽 藓 的组 织 培 养 ， 立 其 扩 繁 体 并通过 常规 栽培 与 组织 培 养 相结 合 ，系， 获取 细 可为其在 园林 绿化 、叶小羽藓 的大量植 株 ， 化学 、 环境科 学等领域 的应 用提 供基 础材 生物分子 学 、 本文对 细叶小 羽藓配子体 的消毒方 法及 蔗糖 料( (( , , , 蔗糖 浓度 的 筛选 筛 选 出最 佳 消毒 浓度对其 生长 的影 响进行 了研 究 ，以期 为细 叶小 将存 活 的外植 体转 接数 次 ， 方 法后 ， 选取 生长健 羽藓再 生体 系的建 立及遗 传转化提供 参考 ( ( , 壮 的植 株 剪 成 , ,; 左 右 的 小 段 接 种 在 ,, 琼脂 质 量 浓度 为 , ,, , 。，, 为 培 养基 上 ， ( ( 。 。 , ,， ,( , 〕 , , 、, 添加 的 蔗糖 质量 浓 度 分别 为 , 、, , 、 , 材 料 与方 法 ， , ,, ( , 和 , ,( , , 试 验 材 料 ( ( ,, 培 养 条 件 和 结 果 统 计 方 法 选取 浙江农 林 大学 园林 学 院温 室苔 藓 苗 圃 消 毒 方 法筛 选 的 培 养 基 为 ,,培 养 基 ， 中生 长势 良好 的细叶小羽 藓植株 (配子体 ) 去 除 ， ( ( 琼 脂 ， , ( 蔗 糖 ， , , , ( , ,, , , , ( 所 泥土等 杂物 ， 置 剪掉残 老茎 叶 ， 于培养皿 中待, , 用 ( ,,, 有 培养 基均 放入 ,, ,, ,型光 照培养 箱 中培 (, , 试 验 方 法 培 , ? )? ， 气 相 对 湿 度 为 养， 养温度 为(, , 空, , , 材 料 预 处理 (( 流 水 冲去 细 叶 小 羽 藓 , , 光 , ,( 光 , , , ， 照 时 间 为 , , ， 照 强 度 用配子 体表 面 后 ， 洗 涤 精 浸 泡 ， 动 , , 搅 , 为. 污 物