鸡新城疫和大肠杆菌混合感染的诊治论文

鸡新城疫和大肠杆菌混合感染的诊治论文 吉 林 农 业 大 学 论文题目: 鸡新城疫和大肠杆菌混合感染的诊治 学生姓名: 姜 超 院 系:动物科学技术学院 专业年级:动物医学2007级 指导教师: 崔焕忠 职 称: 副教授 2011年 5 月 20 日 目 录 题目 ........................................................................................................................................ I 摘要 ....................................................................................................................................... I 1 前 言 .................................................................................................................................1 2 流行病学调查 ....................................................................................................................13 临床症状 ............................................................................................................................1 4 剖检变化 ............................................................................................................................1 5 实验室检验 ........................................................................................................................1 5.1 细菌的分离鉴定 ..............................................................................................................1 5.1.1 涂片镜检: ..................................................................................................................1 5.1.2 分离培养: ..................................................................................................................2 5.1.3 生化试验: ..................................................................................................................2 5.1.4 药敏试验: ..................................................................................................................2 5.1.5 抗体监测: ..................................................................................................................2 5.2 病毒的分离鉴定 ..............................................................................................................2 5.2.1 分离培养: ..................................................................................................................2 5.2.2 血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI): ........................................................................3 5.2.3 动物实验 ......................................................................................................................3 5.2.3.1 雏鸡接种试验 ...........................................................................................................3 5.2.3.2 鸡胚接种试验 ...........................................................................................................3 6 治疗和预防 ........................................................................................................................3 6.1 治疗 .................................................................................................................................3 6.1.1 防制原则 ......................................................................................................................3 6.1.2 防制方法 ......................................................................................................................3 6.1.2.1 隔离 ...........................................................................................................................3 6.1.2.2 疫苗、药物 ...............................................................................................................3 6.1.2.3 维生素、中草药 .......................................................................................................3 6.2 预防 .................................................................................................................................3 6.2.1 加强饲养管理 ..............................................................................................................3 6.2.2 用药防治 ......................................................................................................................4 6.2.3 提高舍内温度 ..............................................................................................................4 6.2.4 进行全面的清理 ..........................................................................................................4 7 讨 论 .................................................................................................................................4 参考文献 ...............................................................................................................................5 致 谢 .....................................................................................................................................7 鸡新城疫和大肠杆菌混合感染的诊治研究 姓 名:姜超 专 业:动物医学 指导教师:崔焕忠 摘要:鸡新城疫,ND,又称亚洲鸡瘟～是由鸡副粘病毒引起的急性高度接触性传染病～ 常呈败血症经过。本病发病率和致死率甚高～对鸡是一种威胁很大的严重疫病～不可忽 视～值得注意防患。大肠杆菌病是指部分或全部由致病性大肠杆菌所引起的局部或全身 性感染的疾病。主要引起鸡严重腹泻、肿头综合症、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎和败血 症等。本文主要根据细菌分离鉴定、病毒分离鉴定进行验证～并通过一些列的防制措施 进行诊治。 关键词:鸡,新城疫,大肠杆菌,诊治 The Diagnose and research for A Mixed Infection of Newcastle disease and Colibacillosis Name: Jiang Chao Major: Veterinary Medicine Tutor: Cui Huanzhong Newcastle disease (ND), also called Asian fowl pest, was a high contagious disease Abstract: caused by chicken paramyxovirus. The disease often appears sepsis process. The disease incidence and mortality rates were high, on the chicken is a threat of serious diseases, can not be ignored, notably in prevention. Colibacillosisrefers to some or all caused by pathogenic 、colibacillus the local or systemic infections disease. Main cause Chicken severe diarrhea 、、、、Swollen head syndromeperitonitissalpingitissynovitissepticaemia,etc. In this paper, based 、，on Isolation and identification of bacteriaisolation and identification of virusAnd through a series of counter-measures diagnosis and treatment measures ,,chicken Newcastle diseaseColibacillosisTreatment Key words: I 1 前 言 [1] 鸡新城疫,Neweastle diseasa～ND,又称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟～是由鸡新城疫病毒引起的一种急性、高度接触性传染病～死亡率较高～对养鸡业造成了严重危害～国际兽 [2]医局将新城疫列为A类疾病。国内外集约化养鸡场对该病的免疫也均已纳入正常的免疫之中～但由于免疫程序不合理或免疫方法不当～鸡新城疫仍时有发生。 大肠杆菌病是指部分或全部由致病性大肠杆菌所引起的局部或全身性感染的疾病。主要引起鸡严重腹泻、肿头综合症、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎和败血症等。近年来～随着养鸡业的发展～以及临床上用药的不合理性使大肠杆菌的耐药谱越来越宽～耐药菌 [3]株不断出现。鸡大肠杆菌病已成为危害养鸡业主要传染病之一～给养禽业带来了重大的经济损失。 近年来～随着规模化、集约化鸡生产的发展～鸡病出现混合感染的病例呈增长态势。然而～一旦发生了鸡新城疫和大肠杆菌并发～但常因诊断者经验不足或过于草率导致误诊～给养殖户造成了巨大的经济损失。因此～这种混合感染的发生和流行应该引起养殖户和临床兽医的高度重视。 2 流行病学调查 根据报告显示～某养殖户从外地某孵化场购入雏鸡1000只～网上育雏～1日龄接种马力克疫苗～以后的接种按当地常规免疫程序进行。鸡舍用百毒杀消毒～不定期用环丙沙星、庆大霉素等进行投药。49日龄时下午天气突变～没及时关窗～50日龄时开始有轻微呼吸道症状～用泰乐菌素、诺氟沙星等投服两天～效果不明显～且病情加重～至54 [4]日龄时共发病210只～死亡26只～发病率为21%～死亡率为2.6%。 3 临床症状 发病初期体温升高可达到42.5，43.5?～精神沉郁～羽毛松乱并无光泽～垂头缩颈～翅膀下垂～冠和肉髯发绀～眼半闭或全闭似昏睡状态。现出明显的呼吸道症状～病鸡张口伸颈～气喘～呼吸困难～常有“呼噜”声响～咳嗽～口腔中分泌物增多～摇头并有吞咽动作～试图将黏性分泌物排出。下痢～排黄白色或黄绿色稀粪。 4 剖检变化 口、咽、喉、鼻腔、气管内有大量的淡黄色粘液～心包肥厚浑浊～附有大量纤维性渗出物～心包液增多,鸡腺胃乳头肿胀并出现明显的出血点,肌胃角质层下有轻微的出血点及出血斑～有的形成不规则的溃疡,小肠黏膜有出血点,肝肿大、边缘钝圆～中间有小的白色结节～整个肝脏被一层纤维素性薄膜包裹,腹腔内有腹水。脾、肾多有充血 ～[56]和淤血,法氏囊不肿大～但有轻微出血。 5 实验室检验 5.1 细菌的分离鉴定 5.1.1 涂片镜检: 无菌采集病死鸡的病料,肝、肺、肾、心,涂片后～用革兰氏染色～镜检可见革兰 1 [7]阴性、粗短、两端钝圆的小杆菌～多呈现出单个分散状况～个别呈现出双排列状况。 5.1.2 分离培养: 取病料接种在增菌培养基中～温度为37?过夜～接种伊红亚甲兰培养基、麦康凯培养基、血液培养基和血清培养基～37?培养24h后～在伊红亚甲兰培养基上菌落呈黑色～带金属光泽,麦康凯琼脂平板上生长出边缘整齐～稍凸起～表面光滑湿润的深红色圆形菌落,在血培养基上菌落呈灰白色～不溶血。革兰氏染色镜检细菌形态为中等大小的杆菌～革兰氏阴性。 5.1.3 生化试验: 挑培养基上的单个菌落分别接种于硫化氢、吲哚、葡萄糖、乳糖、甘露醇生 化培养基上～臵于37?温箱中培养24 小时后观察。硫化氢不反应～吲哚产酸～葡萄糖、乳糖、甘露醇产酸产气。 5.1.4 药敏试验: 在普通琼脂培养基、麦康凯培养基上同时涂抹菌落后贴上药敏纸片～臵于37?的恒温箱中培养24小时后观察。2种培养基同时对头孢氨苄、氯霉素高敏～对庆大霉素中敏, [8]将分离的病原菌进行药敏试验。结果显示该菌对环丙沙星头孢唑啉和恩诺沙星敏感。 5.1.5 抗体监测: 发病鸡群按1%随机采集血样12份～无菌分离血清～用新城疫血凝抑制试验测定抗体～抗体阳性数5份,29、210、29、27、29,～阴性数7份,20、22、22、24、21、20、24,～保护率仅为41%。 表1 分离病原生化试验结果 葡萄麦芽甘露山梨鼠李 蕈糖 果糖 木糖 乳糖 蔗糖 糖 糖 醇 醇 糖 + ? + ? + + - + + - 半乳MR试VP试七叶硝酸盐还 吲哚 HS 尿素 明胶 2糖 验 验 苷 原 + + - - - + - - - 注:?产酸产气～+产酸～-阴性 5.2 病毒的分离鉴定 5.2.1 分离培养: 将其病料制成乳悬液～冻融3次～15000r/min离心20min～取上清液接种于9日龄鸡胚和鸡胚成纤维细胞。接种胚第一代和第二代48，72h死亡率为80%;第三代24，48h死亡率100%。 处理的病料接种鸡胚成纤维细胞～第一代接种后72h出现细胞病变(CPE)～第二代接种后48，72h出现CPE～第三代接种后24，56h出现CPE。代次越高～CPE越来越明显。 2 5.2.2 血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI): 随机采取鸡心血10份～分离血清～测定HI效价。用4个单位的鸡新城疫诊断抗原做HI试验。结果鸡新城疫抗体水平参差不齐～病鸡的抗体很低。接近为0～健康鸡的抗体 [9]很高～为1:156以上。 5.2.3 动物实验 5.2.3.1 雏鸡接种试验 取病料乳悬液和分离了的病毒分别接种20日龄雏鸡8只。给每只鸡进行肌肉注射～计量为0.2mL～同时设立对照组。接种的鸡分别于接种后2，6d死亡。死前表现的临诊症状和死后的病理剖解特征与自然病例相似。 5.2.3.2 鸡胚接种试验 取发病早期病鸡的气管分泌物～加生理盐水制成1:5的悬浮液～按每毫升加入青霉素和链霉素各2000个单位～臵4?冰箱中2小时～然后离心沉淀～取其上清液按每胚0.2毫升的计量～接种于10只9日龄鸡胚的尿囊腔内～经37?恒温孵化～鸡胚在48小时左右死亡～死胚生长发育受阻～全身出血。 6 治疗和预防 6.1 治疗 6.1.1 防制原则 根据症状进行隔离、注射疫苗、口服药物等全面治疗。 6.1.2 防制方法 6.1.2.1 隔离 在发现病鸡时要立即隔离～尽量减少病毒和细菌的继续传播和扩散,同时每天用0.2%的百毒净、菌毒杀等消毒药喷雾消毒1次～保持鸡舍的环境卫生。 6.1.2.2 疫苗、药物 第一天将所有鸡用新城疫?系疫苗4 倍量肌注～同时用0.02%的氟呱酸和1%的大肠杆菌净拌。第二天除用上述药物拌料外～同时饮水中加饮0.2%的克毒抗炎王及0.1%的菌毒威～连续用药5天。对个别情况较重的病鸡在肌注疫苗后～同时肌注特效救鸡液、庆 [10]大霉素～连续用药5天。 6.1.2.3 维生素、中草药 为促使体质和产蛋性能恢复～在治疗过程中～饮水中加入多种维生素。在饲料中加入促进愈后产蛋性能恢复的增蛋散、蛋宝宝等中草药制剂～连续用药10天。 6.2 预防 根据流行病学、临床症状、剖检变化及实验室诊断～ 确诊为新城疫与大肠杆菌混合感染～并立即采取以下防治措施。 6.2.1 加强饲养管理 除给予最佳的营养水平～并保证鸡群良好的健康状况外～还要隔离病鸡、淘汰残鸡、 3 深埋死鸡、清除垫料～对饮水用具、笼具、地面、墙壁要进行彻底消毒～杜绝强毒的污染和浸入。 6.2.2 用药防治 饮水中加入鸡新城疫高免血清和白细胞介素-2～2，3小时内饮完～病重者用鸡新城疫高免血清2ml/只～滴口2次(间隔6小时);用阿莫西林饮水～连用服用3天;同时在饲料中加入Vc和电解多维～连用7天。用过阿莫西林后隔1天～全群用新威灵(梅里亚产)双倍量肌注。 6.2.3 提高舍内温度 在鸡舍通道内用炭炉加温～使舍内温度提高到27?左右。 6.2.4 进行全面的清理 坚持每天冲洗栏舍1次～保持舍内空气清新～减少臭味～并用氯进行消毒～防止病原体扩散。 采取以上综合措施后～病情逐渐好转～6天后死亡停止～大部分鸡食欲增加～ 精神良好～恢复正常～个别出现扭头、转圈等神经症状者～也呈现出好转的状况。 7 讨 论 随着养鸡业的发展～禽病也逐渐复杂化～多种疾病混合感染的病例逐渐增多～ 发生传染病时～要考虑有无其他传染病的并发和继发～尤其在某病易感日龄。大肠杆菌是条件性致病菌～鸡群应激时易发病。病菌随发病鸡群粪便排出体外～污染饲料、饮水～场内消毒不严～通风不良～水槽、食槽长时间不清洗～舍内局部环境差等～如果饲养管理不当～首先会引起大肠杆菌病的暴发～导致机体局部免疫和体液免疫水平下降～免疫效果不可靠～在鸡群发生大肠杆菌病期间～肌体体质下降～抵抗力降低～因而造成新城疫疫情的并发。 近年来～对大肠杆菌病来说～尽管在理论上对其有效的抗生素很多～但由于鸡大肠杆菌致病性菌株对药物的敏感性不一致～应尽量选择敏感的抗生素或抗菌药进行治疗。 [11]多年来～人们长期广泛应用和滥用抗生素～造成耐药菌株迅速增加。因此～一旦发生大肠杆菌病～应首先进行药敏实验～然后根据药敏实验结果拟定治疗～以免贻误治疗时机～造成不应有的损失。 鸡新城疫是危害养鸡业较为严重的疾病～对有条件的鸡场应定期进行新城疫抗体检测。30，35日龄～HI效价应在5?2以上,40日龄到开产前HI效价应逐渐上升到7?2以上～达不到时应立即补免。该养殖户虽已进行了新城疫疫苗接种～但鸡群还是发病～说 [12]明免疫失败～以下因素都可能导致免疫失败:鸡群是在亚健康的状况下进行免疫、鸡舍内的有害气体浓度过大、使用疫苗的器具没有刷洗干净、不能保证鸡群中的每只鸡都 [13]能饮到疫苗、疫苗的接种途径不当、疫苗的稀释液及稀释浓度错误各种应激因素等。 再加上气候变化～免疫抗体下降后～鸡的机体引发新城疫同时与大肠杆菌病混合感染～造成死亡增加。由于鸡群体重不达标、均匀度差、有隐性疾病感染等原因也会影响 4 免疫质量。由于母源抗体、疫苗毒力、接种方式、应答能力等因素。对免疫效果都有影响～抗体水平参差不齐～因此预防接种前～应详细了解被免疫鸡健康状态～以提高免疫 [14]质量～避免免疫失败。并且对免疫鸡群应定期监测～了解抗体水平～随时进行补救～减少不必要损失。 疫苗的种类、质量、免疫的方法及免疫的时间等都能影响到免疫效果。大多数养殖户为节省人力采用饮水免疫时～虽然注意保持水质清洁～但往往忽视了鸡在不同日龄、不同季节的饮水及停水时间等因素～认为只要喝上含有疫苗的水就行了～造成免疫均匀 [15]度较差。有些养殖户为图省事～把ND、IB、IBD等疫苗混在一起使用～造成疫苗的干扰和抑制作用～或同时注射或在相隔很短的时间内注射使用～都容易造成机体产生不同抗原而相互干扰～致使免疫失败～而一些免疫抑制性疾病(如马立克氏病、法氏囊病等)也会干扰或抑制新城疫抗体的产生～导致免疫效果降低。 建立健全免疫档案。免疫接种记录对鸡场是必不可少的～它使各种免疫情况有据可查。因此务必作好免疫详细记录～健全免疫档案。免疫接种记录内容应包括接种日期、鸡的品种、日龄、数量、所用疫苗名称、生产厂家、批号、生产日期、有效期、稀释剂 [16]及稀释倍数、接种方法、接种剂量、操作人员等。 治疗细菌性疾病～应用抗生素时～应作药敏试验～选择敏感高效药物～以免耽误治疗。 参考文献 [1] 殷震,刘景华主编.动物病毒学[M].第2版,北京:科学出版社,1997:259，261. 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[16] 高信钦.肉鸡新城疫和大肠杆菌病混合感染的诊疗报告[J].福建畜牧兽 医,2007,(02):177，180. 6 致 谢 大学生活一晃而过～回首走过的岁月～心中倍感充实～当我写完这篇毕业论文的时候～有一种如释重负的感觉～同时感慨良多。 首先诚挚的感谢我的论文指导老师崔焕忠老师。他在忙碌的教学工作中抽出时间来审查、修改我的论文。还有教导过我的所有老师们～你们严谨细致、一丝不苟的作风一直是我学习、工作中的榜样,你们循循善诱的教导和独具匠心的思路给予我无尽的启迪。 感谢四年中陪伴在我身边的同学、朋友～感谢他们为我提出的有益的建议和意见～有了他们的支持、鼓励和帮助～我才能充实的度过了四年的学习生活。 7