免疫放射分析技术

免疫放射分析技术 一、技术特点 1. IRMA反术系术中术用的术术物术免疫球蛋白。易于提术和术行化术术～术术抗的比碘体 活度术高～有利于提高分析的敏度～且不同抗的术术方法基本相同～而在灵体RIA中术用的术术物是抗原。抗原术术繁多～化术各术～术术术得术品～术术方法亦多术多术学构异。2. 在IRMA反术系术中使用术量的术术抗～直接抗原术合～不存在术术合的术术反术体与争～因此反术速度术快～使使用术和力术低的术可隆抗～也能术足术术要求～而在即体RIA中抗是微量的～所以一定要用高术和力的多可隆抗体体 3. IRMA使用的术术抗和固相抗原在反术中都是术量的～只有待术术品加术术差才体会 影分析术果～因此响IRMA的批和批术术;内异CV%,比术小～而RIA使用的抗体和术术抗原在反术中是固定量的～加术术差可术重影术定术果。响 二、术术原理 将体体与体核素术术在抗上～然后以术量的术术抗待术抗原术合～未术合的术术抗通术和固相的抗原免疫吸附术术合而去除～溶液中的放射性待术抗原的含量呈正相术。根与 据术术术程的操作步术不同～有以下术术型几 1. 直接IRMA法 将与体温待术抗原术量的术术抗术行育～使二者术合～然后加入固相抗原免疫吸附术再次育～吸附游的术术抗。心去除淀物～术定上液中放射性强度～根据温离体离沉清 术准曲术可得知待术术品中抗原的含量。即 2. 抗术心双体IRMA法 在待术抗原依次加入固相抗和术术抗～反术后形成固相抗;内体体体Ab1,-抗原-术术抗;体Ab2,术合物～洗术去除游的术术抗～术定固相抗或术 上免疫术合物离体体体 的放射性强度～根据术准曲术可得知待术术品中抗原的含量。此法术用于术术有多即个 决定簇的多术和蛋白术抗原。 3. 术接IRMA法 生物科研www.biom.cn 提醒,此法是在上述抗术心法的基术上～术一步改良术双体 用核素术术抗Ab2的抗;羊抗或抗鼠的体兔IgG,～反术后形成固相抗;体Ab1,-抗原 -Ab2-*Ab3;术术抗抗,的四重免疫术合物。其中～体Ab3可作术通用术术～可省去术术术术不同抗原的特性抗。异体 4. BSA-IRMA法 是生物素将-术合素系术;BSA,引入免疫放射分析～建立的新一代IRMA。此法最大的术点是使用生物素化抗和以核素术术术合素术示踪术～可以通用于 术、体甾体 前列腺素等小分子物术的术术。由于1抗分子上可术术十生物素分子～而每个体数个 个与术合素又可4生物素分子术合～而术生多术放大效术。同术生物 素术合素个从与 之术的术和力要比抗原抗术的术和力大体10万-100万倍～二者术合术术定～因此～极 使其敏度、特性和精密度都大大提高。目前一些超敏度 的灵异灵IRMA分析术术盒就是术用上述原理制成的。 三、术术材料与 1. 术术抗体 2. 固定抗原吸附术 3. 术准抗原 4. 待术术本 5. γ术术和低心机数温离 四、操作方法 以固相抗法术定血中促甲腺素;双体清状TSH,术术例 1. 按下逐一加术;加术量术ml～均术术管,双 *术准管T术术管 00.150.51.541560150TSH术准品200200200200200200200200待术血清200125I-TSH抗体100100100100100100100100混～匀37?育温120min 弃清上;T*除外～以下同,～加2ml洗术液～放置2min弃清上～再加2ml洗术液～放置2min 弃清将上～各管倒置在吸水术上 2. 用γ术术分术术量各管放射性强度～以管数两cpm的均术表示～分术术算术合率;B%～即B/T *100%, 3. 用B%术术坐术～不同术度的TSH术准品术坐术术制术准曲术～然后根据术术管的横B%～从即术准曲术中可术得相术的TSH含量。