硫酸脱氢雄甾酮

硫酸脱氢雄甾酮 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-32 版序：2005-1 页码：第1 页，共4 页 用途： 用免疫学定量测定人血清或血浆中硫酸脱氢雄甾酮 （Dehydroepiandrosterone sulfate DHEA-S）的含量。电化学发光免疫测定试剂， 适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。 概述: DHEA-S属类固醇激素，由前体胆固醇在肾上腺皮质区合成而来。测定DHEA-S是辅助诊断多毛症和女子男性化的重要手段，此外还可用于androgenisation、高催乳素血症、多囊性卵巢综合征的诊断和排除肾上腺皮质产生雄激素的肿瘤。 DHEA-S仅有微弱的雄激素活性，但其代谢产物，如雄烯二酮和睾酮，有较强的雄激 素活性，能间接地引起多毛症和女子男性化症。从7岁起DHEA-S升高，30岁后开始又逐步下降。单纯的DHEA-S升高有临床意义。其它可导致DHEA-S过度产生的因素还有遗传性肾上腺皮质酶缺少、肾上腺皮质增生及产生雄激素的肿瘤。DHEA-S分泌进入血流的速率仅稍高于DHEA，但由于DHEA-S的半衰期约为一天，其浓度要高出1000倍。与其它类固醇激素比较，DHEA-S在体内循环时不与载体蛋白质结合，加上浓度 高和变化小，是了解肾上腺皮质雄激素产生情况的良好指标。与睾酮一起，DHEA-S测定是了解多毛症患者体内雄激素水平是否升高的初筛试验中值得选择的方法。约 84%的患多毛症妇女雄激素升高。该测定的主要目的是排除产生雄激素的肿瘤（来 自于肾上腺皮质或卵巢）。在妇女此类肿瘤产生的DHEA-S高于700µg/dl。Elecsys DHEA-S采用竞争法原理和DHEA-S特异的多克隆抗体。标本中内源性的DHEA-S与钌标记的DHEA-S衍生物相互竞争生物素化抗体上的结合位点。 原理： 采用竞争法原理，整个过程18分钟完成。 ? 第1步：15µl标本与生物素化的抗DHEA-S抗体混匀，形成免疫复合物，数量取决 于标本中待测物的浓度。 ? 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒和钌（Ru）标记的DHEA-S衍生物。生物素化的抗DHEA-S抗体上未结合的位点被占据，形成抗体-半抗原复合物，通过生物素、 链酶亲和素之间的反应结合到微粒上。 ? 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质 被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 ?检测结果由机器自动从曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。 试剂： M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-32 版序：2005-1 页码：第2 页，共4 页 R1：生物素化的兔抗DHEA-S抗体（灰盖），1瓶，9ml。浓度600ng/ml，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH6.8。含防腐剂。 R2：Ru(bpy)32+标记的DHEA-S（黑盖），1瓶，9ml。浓度0.5ng/ml，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH6.8。含防腐剂。 储存和稳定性： 存放在2－8 度，切莫倒置。 未开封，可稳定至标明的保质期。 开封后，2－8 度12周； 放在Elecsys2010上，8周；（使用后放回2－8度；如置20－25度，约20小时）。 标本采集和准备： 血清：按标准常规方法采集。 血浆：肝素、EDTA-K3、枸橼酸钠、氟化钠和草酸钾抗凝均可。标本在2－8度可稳定2天，-20度可稳定2个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。不要加 热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 检测步骤： 提供的材料： 货号：03000087，100人份的Elecsys DHEA-S试剂盒包含： ? M 链霉亲和素包被的微粒 ? R1 生物素化的抗DHEA-S抗体 ? R2 三联吡啶钌标记的DHEA-S－多肽 需要的材料（未提供）： ? Elecsys DHEA-S定标液（CalSet）货号03000095 ? Elecsys 通用质控品（PreciControl Universal）货号11731416 ? Elecsys2010分析仪 ? Elecsys系统缓冲液（ProCell）货号11662988 ? Elecsys 测量池清洗液（CleanCell）货号11662970 ? Elecsys 添加剂液（SysWash）货号11930346 ? Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean) ）货号11933159 ? Elecsys 2010反应杯（Assay Cup) 货号11706802 ? Elecsys 2010吸样头（Assay Tip) 货号11706799 ? Elecsys 系统清洗液（SysClean） 货号11298500 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-32 版序：2005-1 页码：第3 页，共4 页 方法： 按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。 仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果 特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。 将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制 试剂温度和开/关试剂瓶盖。 定标： 每批DHEA-S试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用 CalSet定标液定标。 定标频率： 每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标 定即根据下列要求： ? 一个月（同一批号试剂） ? 7天（放置仪器上的同一试剂盒） ?根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。 质控： Elecsys 通用质控品（PreciControl Universal）1和2以及其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各 的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应 采取校正。 计算： 对每一个标本，仪器会自动计算DHEA-S含量,单位是µmol/l，µg/dl或ug/ml 换算方法µmol/l×36.846=µg/dl µg/dl×0.02714=µmol/l 干扰因素： 该方法不受黄疸（胆红素<13mg/dl）、溶血（血红蛋白<0.56g/dl）、脂血（脂质<2000mg/dl）和生物素<36ng/ml等干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰 （600U/ml）。17种常用药物经试验对本测定无干扰。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗 体的干扰。Elecsys DHEA-S测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来 进行诊断。 检测范围： 0.003?27μmol/l或0.100?1000μg/dl 稀释： 高于检测范围的标本可用低DHEA-S含量的人标本稀释。建议1:5稀释。稀释后的标本DHEA-S含量必须高于1.5μmol/l或45μg/dl。如内源性DHEA-S可忽略不计， 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-32 版序：2005-1 页码：第4 页，共4 页 结果应乘上稀释倍数或按以下计算：C=c+4(c-D)C=标本中真实的DHEA-S浓度；c=测得的DHEA-S浓度；D=稀释液中DHEA-S浓度 正常参考值： 在德国临床中心对424位女性和389位男性进行检测： 年龄(岁) 50th percentile 5th – 95th percentile n µg/dl µmol/l µg/dl µmol/l 女性: 10–14 15 168 4.56 54.4 – 255 1.48 – 6.92 15–19 30 140 3.80 66.6 – 306 1.81 – 8.30 20–24 30 236 6.39 158 – 412 4.29 – 11.2 25–34 60 183 4.96 98.0 – 315 2.66 – 8.55 35–44† 83 161 4.38 60.8 – 338 1.65 – 9.17 45–54† 89 121 3.28 35.4 – 256 0.96 – 6.95 55–64 59 76.7 2.08 18.9 – 205 0.51 – 5.56 65–74 29 64.4 1.75 9.40 – 246 0.26 – 6.68 > 75 29 60.9 1.65 12.0 – 154 0.33 – 4.18 男性: 10–14 18 113 3.07 49.5 – 245 1.34 – 6.65 15–19 30 325 8.81 133 – 553 3.61 – 15.0 20–24 27 351 9.54 210 – 496 5.70 – 13.5 25–34 56 277 7.51 163 – 425 4.42 – 11.5 35–44 68 221 6.00 110 – 424 2.99 – 11.5 45–54 45 219 5.94 44.3 – 321 1.20 – 8.71 55–64 69 138 3.75 51.7 – 305 1.40 – 8.28 65–74 55 90.2 2.45 33.6 – 140 0.91 – 3.80 > 75 21 56.2 1.53 16.2 – 149 0.44 – 4.04 如有必要，各实验室应自己测定一个正常值范围。