肝细胞移植治疗肝功能衰竭的研究进展

肝细胞移植治疗肝功能衰竭的研究进展 ? 188?寞用肝脏病杂志2006年6月第9卷第3期.,ainHepatol,June2006.V乩9,No.3 [J].药物不良反应杂志,2000,3:187—188. [30]游寿洲,游源洲.联苯双酯治疗急性黄疸型肝炎引起重 型肝炎1例[J].中西医结合肝病杂志,2001,Supps129. [31]高玉桂,刘耕陶,范培东,等.联苯双酯的致突变性研究 [J].中国药学杂志,1995,30(10):595—596. [32]杨明.联苯双酯,山莨菪碱降低丙氨酸转氨酶反跳疗效 观察[J].人民军医,1997,40(5:277. [33]曹海涛,金玲丽,冯利平.中药对停联苯双酯后ALT复 升的疗效[J].浙江中西医结合杂志,1998,8(5):295. [34]刘勇,杨环,刘成.祛痰活血法对抗联苯双酯停药反跳 [J].实用中西医结合临床,2003,3(6):55. [35]方福宝.联苯双酯在防治肝炎中的作用及其防反跳措施 [J].中华新医药杂志,2004,1(1):51—53. (收稿:2006—03—24) (校对:郭顺明) 肝细胞移植治疗肝功能衰竭的研究进展 徐葵花综述赵守松审校 【关键词】肝细胞移植肝功能衰竭 肝细胞移植经过近30年的发展,正由动物实验向临床过 渡,初步结果显示,肝细胞移植在肝功能衰竭和遗传代谢性肝 病方面具有很好的应用价值.现就肝细胞移植在治疗肝功能 衰竭中的研究现状作一综述. 一 ,肝细胞移檀的概念和理论基础 肝细胞移植(hepatocytetransplantation,HCT)是将正常成 年肝细胞,不同发育阶段的肝细胞,肝潜能细胞,修饰型肝细胞 以及相关生长刺激因子,通过不同途径移植到受体适当的靶 位,使之定居,增殖,重建肝组织结构,并发挥正常肝功能的肝 组织工程学手段.目前的动物实验及初步临床应用的结果表 明,肝细胞移植是治疗肝功能衰竭及肝脏基因缺陷所致代谢性 疾病的一种潜在的治疗方法L1.zJ. 肝脏是最早进行细胞移植实验的器官之一.从理论上说 HCT较原位肝移植(o~hotopiclivertransplantation,OLT)具 有以下优点[3]:?细胞移植的创伤对受体的打击相对较小,易 操作,安全性好;?OL『r供体缺乏,而来自一个肝脏的细胞可 供给多个受体,至少可部分解决供体短缺的问题;?机体对于 移植肝的排斥反应常集中于肝组织血管和血管内皮细胞周围 以及胆管上皮细胞和肝窦状隙衬垫细胞,可以认为肝细胞移植 的抗原性要低于肝移植,排异反应低于整块的肝移植;?肝细 胞通过体外培养后进一步减少细胞的表面抗原性,减少了排斥 反应;?移植肝细胞得到公认的功能替代作用包括:合成作用, 解毒作用和促进胆红素排泄作用等.植入的肝细胞能较快地 发挥代谢作用.有资料表明移植肝细胞后,血白蛋白提高,凝 血酶原时间改善.大量的动物实验证实移植的肝细胞可以减 轻亚硝胺和【)-半乳糖引起的肝坏死.很多资料提示移植肝细 胞有明显降低血氨的作用[4].移植肝细胞与宿主肝细胞紧密 结合后,肝细胞通过空间极性改变,重建胆小管结构,使经过代 谢的胆红素得到排泄;?移植肝细胞还可以通过复杂的体液分 子机制,促进宿主残余肝细胞增殖和肝功能的恢复,为肝脏的 作者单位:233004安徽省蚌埠市蚌埠医学院附院感染病科 再生提供机会;?随着肝细胞的再生而发挥其正常功能.原来 用于抑制机体排异反应的免疫抑制剂用量可以逐渐减少到停 用,避免了长期使用免疫抑制剂导致的各种不良反应;?具有 基因修饰的可能性. 二,肝细胞移檀的细胞来源 由于成人肝细胞增殖能力弱,因此寻找合适的肝细胞来源 成为当前研究的重点.肝细胞移植采用的细胞可以是自体,同 系,同种或异种的,可以是处在不同发育阶段的正常肝细胞,也 可以是骨髓细胞,肝内的卵圆细胞或胰腺细胞等.目前受关注 的肝细胞来源有以下几个:?永生化肝细胞株已有研究显示 这种永生化肝细胞可提高急,慢性肝功能衰竭模型大鼠的存活 率[5棚;?肝干细胞各类肝干细胞如肝卵圆细胞,胚胎干细胞 以及造血干细胞等移植后可分化为成熟肝细胞.有学者L7]研 究了从大鼠胚胎干细胞分化为成熟肝细胞的能力.骨髓来源 的肝干细胞(BI)LSC)可分化为肝细胞,而且在严重的排异中能 再生,可作为患者治疗排异反应的调整剂咖;?原始肝细胞或/ 和非实质细胞的共同移植;?胎肝细胞在临床应用中一个重 要的来源是从引产的胎肝分离到的肝细胞或前体;?异种肝细 胞尤其是来源于特殊无病原环境中培育的猪肝细胞[9... 近年来,有关异种HCT的研究引起了人们的极大兴趣.在肝 癌切除术中,部分正常肝不可避免地被切除,有研究[11]的目的 在于获得这些肝细胞,从中去除肿瘤细胞来提供移植细胞的来 源.断裂肝移植工程可获得高质量肝细胞的肝组织[1;?经 治疗性基因修饰过的肝细胞. 三,肝细胞移檀的部位和数? 肝细胞移植常选用的部位包括经门静脉肝内移植,穿刺脾 实质内移植,经脾动脉脾内移植,经肝动脉肝内移植以及腹腔 内大小网膜腔内移植或皮下注射.在肝结构未完全紊乱时,肝 细胞的最佳生活环境在肝脏,而在所有非肝器官中,脾脏不仅 能用作移植肝细胞进入肝实质的部位,而且被用作移植肝细胞 长期生存和起作用的部位[1引.腹腔内移植的肝细胞易使宿主 致敏,多在三天内被清除,腹腔内血供差,不能有效地支持肝细 实用肝脏病杂志2006年6月第9卷第—盟』盟!地!』:!:!: 胞的长期存活,且可能引起腹膜炎或肠粘连.如果对肝细胞的 包填方式加以改进,可能会提高肝细胞成活率.李羽等l_1]认 为经腹腔及脾移植同种异体肝细胞可明显改善I)_半乳糖诱导 的肝衰竭大鼠的存活率,而经门静脉移植则不能改善.经腹膜 或皮下注射延长了肝细胞进入肝脏的时间,并会出现持续的细 胞丢失?. 由于人体肝脏的细胞总数只是估计的数目,故肝细胞的计 算比较模糊.肝细胞通常的计算方法是每公斤体重大概是4× 1O.个肝细胞.人体大约需要2.5×10"个肝细胞才能维持人 体正常肝脏功能.当移植的肝细胞数量相当于正常肝脏功能 性肝细胞的0.01时,可使暴发性肝功能衰竭的生存率提高 15.当移植的肝细胞数量达到1O.,1O个,相当于正常肝 脏的1,1O时,肝脏有明显的再生改变.Sttom报道5例 肝功能衰竭的患者平均移植的肝细胞数量相当于正常肝脏功 能性肝细胞的0.1,0.7%,取得了一定的临床疗效.但是 并不是移植的数量越多越好. 四,用于治疗肝功能衰竭 我国重型肝炎或肝功能衰竭发生率较高,其病理特点是大 块或亚大块肝细胞坏死,破坏了肝脏的合成,代谢及排泄等功 能,同时残存的肝细胞的增殖受到多种因素的抑制,而有关肝 细胞水平上的治疗能弥补肝功能的损失,改善肝功能衰竭的预 后.先前的动物研究已显示HCT显着改善肝功能衰竭大鼠的 肝功能及生存期,阻止其颅内高压的发展.临床上许多研究均 提示HCT在血生化指标得到改善.因此,HCT正成为等待肝 移植患者的一个过渡治疗手段[1. Kobayashi等[4]将永生化基因SV40T逆转录至成人肝细 胞和妊娠21周的流产胎儿的胎肝细胞,使之永生化,再将其植 入到9O的肝叶切除大鼠的脾内,发现其有效地降低了急性肝 衰竭大鼠的血氨水平,明显延长了实验大鼠的存活时间.Chen 等[1]在I)_半乳糖引起的急性肝衰竭模型中,经脾移植dHGF (肝细胞生长因子的变异体,一种治疗性人肝细胞),延长了急 性肝衰竭大鼠的生存期.石伟等[1实验发现,只要减轻对异 种肝细胞移植的排斥反应,延长异种肝细胞在受体内的有效存 活时间,即有可能使其接近同种肝细胞移植的效果. Kobayashi等[】8]研究表明脾内肝细胞移植可用于治疗失 代偿期肝硬化等慢性肝功能衰竭.有学者发现经囊膜包裹的 永生化肝细胞植入肝硬化大鼠脾内后,凝血酶原时间,血清白 蛋白,总胆红素,肝性脑病及存活时间均显着改善,且能被修饰 上安全因子,它们能产生更好的临床价值,更深入的研究是随 着时间的推移这些被移植的肝细胞的数量或作用是否在逐渐 消失,以及相对较少的肝细胞如何能改善肝硬化的失代偿问 题[6].广泛的不同种间的HCT在肝硬化大鼠中能纠正肝衰竭 及延长其生存期.常规的免疫抑制剂允许长期有效的异种肝 细胞的再移植,也暗示了HCT能潜在地提供长期的肝功能的 支持,将有益于过渡到肝移植[103.被移植的肝细胞的分布途 径可影响移植的效果及其功能.Nagata等[19]指出直接经皮脾 内注射进行移植远比经脾动脉灌注有优势.在许多动物实验 中,肝细胞被直接注入脾髓,而在大多临床研究中,异体肝细胞 ? 189? 经脾动脉输注,肝细胞被注入动脉后很快丢失,因此在脾脏中 仅发现极少的肝细胞,从而影响了治疗的效果. 五,肝细胞移植的不良反应及处理 肝细胞移植一般情况下比较安全,但是偶尔也可发生不良 反应.?移植部位的感染,如腹膜炎,菌血症等.临床上须严 密观察,预防性使用抗生素;?受体对移植肝细胞的排异反应. 移植后应进行临床观察和免疫监测,如淋巴细胞亚群的百分 比,对细胞因子,抗体,补体等表达研究.可加用环孢菌素A, 糖皮质激素等免疫抑制剂,或进一步探讨有效的抑制排异反应 方法;?有关移植途径引起的不良反应如肝内门静脉的肝细胞 栓塞,暂时性血流动力学紊乱,毒血症,肺部栓塞及顽固性休克 等[1.因此,经血管内移植必须监测血流动力学改变,尤其是 门静脉压力,肺动脉压力的变化[2...术后常规B超检查.亦 有学者[21]报道经脾肝细胞移植后可在心,脑,肾等重要脏器发 现具有增殖能力的肝细胞,这些细胞增殖是否会引起远期并发 症还不太清楚;?胎肝细胞移植可引起发热,胸闷,腹痛等反 应,须进一步防范. 六,存在的问题及前景展望 近年来,已经有多个研究小组报道了人肝细胞移植的情 况.但是,肝细胞移植目前仍处于动物实验阶段,真正进入临 床应用还面临许多困难,如供体来源缺乏,移植后的肝细胞在 体内存活和增殖困难,肝细胞迁移引起的肺栓塞,门静脉栓 塞,肝或脾脏梗死等并发症[1.]以及移植术后免疫排异反应的 控制等.将来的研究领域包括胎肝细胞的研究,从成年肝分 离的肝干细胞,胚胎或脐血干细胞的研究及基因修饰的肝细 胞的研究等. 尽管目前肝细胞移植的研究困难重重,但从动物实验资料 和近期的临床应用的成功事例却展示了这一技术的长远,乐观 的前景.不久的将来,肝细胞移植在治疗肝功能衰竭中将发挥 重要作用.因此,值得深入研究和探索. 参考文献 EliSELDENc,cAS】RDA.THEMISM,etaLCharacter— izationoflong-termsurvivalofsyngeneichepatocytesin ratperitoneum[J].CeIITransplant,2003,12:569—578. 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(收稿:2006—01一10) (校对:郭顺明) Smads在TGF—信号转导途径中的致肝纤维化作用 周晓倩综述何云审校 【关键词】转化生长因子信号转导肝纤维化 转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF-~)超家族 包括TGF-~1,激活素(activin),骨形态发生蛋白(bonemorpho— geneticprotein,BMP),Smads为TGF-13蛋白家族重要的胞内效 应因子,为目前所知的细胞内唯一的TGF-~受体激酶的底物, 能将TGF-~信号由胞膜转入核内,Smads经磷酸化后可转导 TGF-~后信号,其作用包括细胞增生,分化及凋亡,TGF-~诱导 作者单位:550009贵阳市解放军第44医院感染病科 第一作者:周晓倩女,26岁,贵阳医学院在读研究生 Email:ZHOUZHAI123154026@yahoo.com.en 其膜受体直接与激活的Smad蛋白作用,这种激活的S-aad蛋 白可调控目的基因的转录. 1995年Raftery等[1]提出果蝇ddp基因编码的MAD (Drosophilamotheragainstddp)蛋白为一类新型,高度保守的 蛋白家族,随后Svage在新型小杆线虫中发现sam-2,3,4为 TGF-~样受体下游转导蛋白,与果蝇属中的MAD蛋白功能相 似,为统一标准将其统称为smads,为8rfla和mad的合并词. 一 ,Smads蛋白结构与分类 Smads蛋白按其功能可分为三型:?受体调节型~aad(R- Smad):包括Smadl,2,3,5,8五种亚型,其中~aad2,3在TGF-