侧孢芽孢杆菌BL 硕士论文

侧孢芽孢杆菌BL 硕士 黑龙江大学 硕士学位论文 侧孢芽孢杆菌BL-21降解有机磷农药作用的研究 姓名:金术超 申请学位级别:硕士专业:生物化学与分子生物学微生物分子生物学 指导教师:沙长青杜春梅 20060612 中文摘要 中文摘要 本试验研究了侧孢芽孢杆菌菌株,, ,,降解有机磷农药的特性、降解条件、降解酶的细胞分布和初步分离纯化、降解农药的特性与质柱关系及水胺硫磷的代谢途径。 菌株,, ,,降解有机磷农药特性的研究结果明，该菌株对有机磷农药的降解具有广谱性，尤其是能较好地降解水胺硫磷，降解率达,,,,,,。该菌株能够耐受,,,,,的水胺硫磷，降解水胺硫磷的过程呈现动态变化，并且与菌体的生长趋势有一定的相关性。 该菌株降解水胺硫磷的虽佳培养基配方为:蔗糖,(,,，,，,,，,,,,,(,,,，,,,，、,,,、,,,,,均为,(,,,，,,,,,(,,,,、,,,,,(,,,,均为, ,,,,。最佳降解条件为:,,, ,,,角瓶装量,,,,,、,, ,、培养温度,,。,、,,,,,,,,。添加适量的,,,,,,,(一,,,能够增强茼株,,,,,的降解能力，金属离了对水胺硫磷的降解牢没有影响。 茼株,,(,,的有机磷农药降解酶为组成型胞内酶，酶的分子量大小为,,,,，酶活为,(,,,,。对菌株,,一,,质粒研究的结果表明，菌株降解有机磷农药的特性与质粒无关，是由基因组控制的。 用气质联机对水胺硫磷降解产物的分析表明，菌株,,一,,降解水胺硫磷产生,，, 二甲氧基硫代磷酰胺酯和水杨酸异丙酯等中蚓产物，,，,?一,二甲氧基硫代磷酰胺酯呵进步分解成无机磷、硫化物、氨气等产物:水杨酸异丙酯降解为水杨酰胺，水杨酸及其它有机酸，进一步降解为二氧化碳和水，毒性显著降低。 添加中间产物的研究结果表明，,(,,,一,(,,,的水杨酸促进了水胺硫磷的降解，琥珀酸和乙酸对水胺硫磷的降解没有明显影响。关键词;侧孢芽孢杆菌有机磷农药 水胺硫磷 降解 英文摘要 ,,,,,,;, ，, ,,, ,,,,,,,, ,, ,,,, ,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,, ,,, ,,;,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,一,, ,,;,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,, ;,,,,,,,,, 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目前，世界上有机磷农药商品己达上百种，是国内外应用最广泛的一类农药。我国是农业大国，也是世界上农药使用量最大的国家。据统计，我国平均每年使用,,万吨农药，其中有机磷农药就有三十余种，包括杀虫剂、杀菌剂、除草剂等。我国有机磷农药的产量占全国农药总量的一半以上，占全世界总产量的,,,。专家预测，,,,,,年，中国农药的使用量将达到每年,,万吨，相应的有机磷农药的用量还会持续居高不下。 黑龙江大学硕士学位论文 然而，随着农业可持续发展理念的形成、发展和深入，随着人们对环境质量、生态平衡、健康标准尺度的提高。有机磷农药的危害引起了全世界的广泛关注，并由此在一定程度上限制了某些有机磷农药品种的生产和销售，甚至停产。如，,,,,年中国农业部颁布公告，停止受理甲拌磷等, ,种高毒、剧毒农药的新增登记。自,,,,年,月,日起，开始撤销甲胺磷、久效磷、甲基对硫磷、乙基对硫磷、磷胺,种高毒农药的生产、销售使用的有关证书。,,,,年,月,日，将全面禁止这,种农药的使用。但是，由于有机磷农药的使用量大，期限长，已经对环境、生态、人体健康造成了巨大的危害和深远的影响。,(,(,有机磷农药的危害,(,(,(,严重污染环境 有机磷农药污染环境的途径主要有三个:(,)田间的正常施用。王一茹等研究表明有机磷农药在农田施用时，只有,,一,,的农药作用于害虫或病菌，还有,,,一,,,的农药附着在农作物的表面，其余的农药会直接进入环境，污染土壤、水和空气，同时破坏了整个生态平衡,,。(,)农药包装物和未使用农药的随意丢弃。(,)农药工业废水的排放和意外泄漏都会造成对环境的污染…。,(,，,(,破坏生态平衡 有机磷农药施用，破坏 了自然界天敌与害虫之间的生态平衡，导致天敌数量急剧下降及抗药性害虫数量增加，这样就得再次使用农药，造成恶性循环。土壤中的农残导致土壤中的生物多样性相对降低，多种种类的生物减少，土质降低，生产能力下降“,。有机磷农药可进入水体，污染水源，在水生生物体内残留富集，严重时甚至引起水生生物的大面积死亡，严重破坏了自然界的生态平衡。 第,章绪论,(, , ,危害人体健康 有机磷农药具有致癌性、致畸性、致突变性。对人和哺乳动物危害最大。王毓秀等,的研究表明，有机磷农药可降低生物的免疫能力并诱发肿瘤，损害神经系统等:潘小琴等“调查表明，有机磷农药对胚胎及胎儿的发育具有明显的副作用;另外，有机磷农药导致近年来男性不育率明显增加。 有机磷农药具有强烈的神经毒性。(,)能引发人体神经和免疫系统疾病的发生，如海湾战争综合症、帕金森综合症等,。(,)导致农药中毒事件时有发生。据,,,,年中国农业科学院的研究报告，平均每年农药中毒人数达到,,(,万。, , ,(,影响经济贸易 目前，由于我国农产品的有机磷农药残留超过国际标准，已严重影响了我国的对外贸易和经济发展。如，,,,,,,,,,年，对广西省的蔬菜品种进行分析的结果表明，近,,,的样品中有机磷检测呈阳性。 农药残留是发达国家设置贸易“绿色壁垒”的重要手段。我国的农产品出口严重受阻。近几年欧盟对我国茶叶农残限量的规定项目不断增多，,,,,年,月日本出台的“新食品卫生法”通过各种措施提高茶叶农残的检出率。,,,,年,月日本的横滨、东京两地检疫所报道了两例中国进口菠菜毒死蜱超标。最近，有机磷农药已被美国环保局列为最先接受再登记和残留限量再评价的一类农药，这些规定严重阻碍了我国的出口贸易。,(,(,减少有机磷农药危害的措施 目前，农业可持续发展要求既要提高粮食产量又要保护我们的环境，这样就要求我们从以下两方面进研究，一一是加快生物农药的开发;二是加强对有机磷农药消除方法的研究。 有机磷农药的消除方法主要有物理的、化学的、生物的方法。其中 黑龙江大学硕士学位论文生物方法具有方便、快捷、有效的优点，不会造成二次污染。已经成为研究农药分解的首选方法。，。生物降解有机磷农药主要是利用微生物及其产品进行生物修复，是消除和解毒高浓度农药残留和中毒的一种安全、有效、快捷、廉价的方法。,(,微生物降解有机磷农药的研究进展 自然界中微生物资源十分广泛，种类繁多，代谢途径多种多样，已成为农药污染生物修复的重要生物资源。,(,(,微生物降解有机磷农药的研究历史 自,,,,年,,,,,,,,,,,,,,,,,,,等人报道黄杆菌具有降解二嗪哝和对硫磷的能力以来，对微生物降解有机磷农药的研究迅速展开。尽管只有短短的,,余年，却取得了巨大的成效。 最初的几年(,,,,—,,,,)，研究多集中在对降解剧毒有机磷农药的菌株的筛选和选育方面。如:,,,,,;,,等(,,,,)分离到一株具有降解对硫磷的作用的假单胞菌(,,,,,,,,,,,)。,,,,,等(,,,,)分离到一株能够降解对硫磷黄杆菌(,,,,,,,;,,,,,,)。 ,,,,年以后，对微生物降解有机磷农药的研究已经进入酶和基因的水平，同时不断有新的降解有机磷农药的菌株被报道。如:,,,,年,,,,,,,,,,,,,克隆表达了缺陷假单胞菌(,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,)的对硫磷水解酶基因。,,,,,,,,,,,,,,(,,,,)等人对来自缺陷假单胞菌(,,,,,,,,,,)的具有降解农药能力的磷酸三酯酶进行了纯化及性质研究。,,,,,(,,,,)的研究表明土壤中黄曲霉(,,,, ,,,,,,,,,,,,,)和, ,,,,,,,对有机磷农药具有降解能力。 ,,,,年至今，在深入研究降解机理的同时，部分降解有机磷农药的微生物及其酶制剂已经得到了应用，并且考虑到了多种菌降解的联合效应。如:李顺鹏和沈标(,,,,)等人研究了降解甲基对硫磷细菌的生态 第,章绪论学效应及其应用。曹志方等将假单胞菌,,—,(,,,,,,,,,,,)和瓶形酵母菌,,,,, ,,,,,,,,,,,,)组成联合菌，在甲胺磷生产废水,,,生化处理工艺上进行小试。,,,,,;,,等将对硫磷水解酶固定于多孔玻璃微粒制成固定化酶，对对硫磷的净化率达到,,,。,(,(,降解有机磷农药的微生物种类 目前已经分离的降解有机磷农药的微生物有细菌、真菌、放线菌、藻类等，在生物修复中有广泛的应用。常见有机磷农药降解微生物见表,。从表,可以看出，多种菌可降解同一种农药，一种菌又可降解多种农药，这表现出了微生物种类及其功能的多样性。 表,降解有机磷农药的微生物种类药 甲胺磷 芽孢杆菌(,,;,,,,,)、假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、曲霉菌?,,,,,,,,,,)、青霉菌 ,,,,,, ,,,,)、瓶形酵母菌 (,,,,;,,,,,,)、鲁氏酵母(,,;;,,,,,,;,, ,,～业,巴型竺,:燮搓董塑堑堕～曼丝型婪～～竺塑～“::对硫磷 黄单胞杆菌(,,,,,,,,,,,)、大肠杆菌(,省;,,,,;,,,)、根瘪细菌(,,,,,,,,,)、 芽孢杆菌(,,;,,,,,)、假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、黄杆菌(,,,,,,,;,,,,,,)、产 碱菌(,，;,,,,,,,,)、短杆菌(,,,,,,,;,,,,,,)、固氮极毛杆菌(,,,,,,,,,,)、 不动杆菌(一;,,衄,,,,，)、青霉菌(,,,,;,,,,,,)、曲霉菌叫,,,,,,,,,,)、术霉 菌(,,,;,。,,,,,)、节杆菌(,,,,,,,,;,,,)。。…“””,。, 甲基对硫磷 假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、产碱菌(,,;,,,,,,,,,)、芽孢杆菌(,,;,,,,,)、黄杆 菌(,,,,,,,;,,,,“川)、短杆菌(,,,,,,,;,,,,,,)、木霉菌(,,,;,,,,,,,)、链 格胞菌(,，,,,,,,,,)、邻单胞菌属(,,,,,,,,,,,)、丈比目鱼黄杆菌 ～兰塑生～塑～竺～:塑蔓～～丝竺～纽～～:夔宣堕～～丝～～丝～丝:丝～:,:水胺硫磷 黄杆菌(,,,,,,,;,,,,,)、动性球菌属“„。“马拉硫磷 假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、节杆菌(,,,,,,,,;,,)、黄杆菌(,,,,,,,;,,,,,,)、 根瘤细菌(,,,,,,,,,)、术霉菌(,,,;,,,,,,,)、黄曲霉(,,,,,,,,,,,,,,,,,)、 聚多曲霉(,,,,,,,,,,, ,,,,,,,)、微球菌(,,;,,;,;;,,)、米曲霉(,,,,,,,,,,, ,,,,,,)、放射形士壤杆菌(,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,;,,,)“”…。„ 甲拌磷 硫杆菌(,,,,,,;,,,,,)、假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、小球绿藻(,,,,坩,,,)…。，久效磷 假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、黑蓝节杆菌(,,,,,,,,;,,, ,,,,;,,,,,,)、巨大芽孢 杆菌(, ,,,,,,,,,,)、铜绿假单胞菌(,,,,,,,,,,,)”””乐果 芽孢杆菌(,,;,,,,,)、假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、曲霉菌卅,,,,,,,,,,)、不动杆 菌(,;,,,,,,,;,,,)、铜绿假单胞菌(,,,,,,,,,,,)、 聚多曲霉(,,,,,,,,,,, ,,,,,,,)、黑曲霉(,,,,,,,,,,, ,,,,,)“””氧化乐果 臣大芽孢杆菌(,,,,,,,,,,,)川。“„。“毒死蜱 黄杆菌(,,,,,,,;,,,,,,)、固氨极毛杆菌(,,,,,,,,,,)、微球菌(，,,;,,;,;;,,)二嗪哝 假单胞苗(,,,,,,,,,,,)、芽孢杆菌(,,;,,,,,)、节杆菌(,,,,,,,,;,,,)、黄杆 荫(,,,,,,,;,,,,,,)、链霉菌(,,,,,,,,,;,,),“。?。。”杀螟松 黄单胞杆菌(,,,,,,,,,,,)、芽孢杆菌(,,;,,,,,)、产碱菌(,,;,,,,,,,,)、镰 』～堕,旦～～:～～型。,,墨堕壁 堡望照堕,丝竺生型～～堂,:芏赶萱～』丝竺～堡～竺, :: 黑龙江大学硕士学位论文 ,(,(,微生物降解有机磷农药机制的研究 微生物降解有机磷农药的机制非常复杂，是许多科学工作者热衷研究的课题。,(,(,(,微生物降解有机磷农药的代谢方式 目前普遍认为微生物对有机磷农药的降解主要有,种代谢方式:(,)微生物直接以有机磷农药作为生长基质，在分解代谢该有机物的过程中获取生命活动所需的物质和能量。(,)通过共代谢反应产生既能代谢转化生长基质又能代谢转化目标污染物的非专一性酶,,,?,。(,)街忠陨系奈? 镏旨湫 荒勘晡廴疚铩玻保梗薄?深入研究共代谢和协同代谢可为较难降解的有机磷农药的生物降解提供新的思路。,(,(,(,有机磷农药降解酶的作用方式 (,)酶的产生方式:无论微生物采用哪种方式来降解有机磷农药，都需要酶的作用。降解酶的产生有两种方式:一是微生物本身含有可降解该有机磷农药的酶系基因，在接触到该农药时，会在较短时间内产生降解酶;二是微生物本身并不具有有机磷农药的降解酶系，当环境被农药污染后，因基因适应性改变而形成具有降解效果的酶。 (,)酶的作用过程:通常降解有机磷农药的酶可分为胞内酶和胞外酶。,,,,,,等【,,,将微生物胞内酶的降解作用分为,个步骤，首先是农药吸附在微生物细胞表面，这是一个动态平衡过程;然后吸附在细胞膜表面的农药分子进入细胞膜内，在生物量…定的情况下，化合物对细胞膜的穿透率决定了化台物穿透细胞膜的量;最后是化合物进入微生物细胞内与降解酶结台发生酶促反应。 (,)酶的作用位点:在降解酶的作用下，有机磷中的,,,，,,,，,。,等键被打断，使有机磷农药被降解，生成简单无机化合物。,,,,,,,等 第,章绪论警孚营,，,耵 ?,,(?„鼍,„弘,窑?,, 黑龙江大学硕士学位论文 (,)有机磷酸脱水酶(,,,,,,,,,,,,,,, ,;,, ,,,,,,,,,,,(,,,,) 有机磷酸脱水酶是一类从一些交替单胞菌(,,,,,,,,,,, ,,)中分离 纯化的，它们有共同的结构域，具相似的催化性质。,,,,对沙林(,,,,,)和索曼(,,,,,)类神经毒气的脱毒能力优于有机磷杀虫剂。一般在,,,(,,,(,，温度,,,,,?，活性最高。它们都由一条多肽连组成，可被,,,，激活,。 (,)相关的其它酶类 ,一,水解酶是,,,,,,,等…发现的一种新型的有机磷水解酶。,(,水解酶对异硫磷有很高的水解活力，而对其他底物只有微弱的水解作用。,,,,是从放射形土壤杆菌(,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,;,,,)中获得的，可水解多种有机磷化合物，且可以水解,,,不能水解的亚胺硫磷和倍硫磷。,,;,(,,,,,,,,,, ,, ;,,,,,,)是,,,,等”从菌株,,,,,,,,,,中鉴定出的一种酶，有很强的磷酸三酯酶活性，具有较强的底 物专一性，鳌合剂不影响其活性，表明该酶的活性不依赖于金属离子，是一种新型的磷酸三酯酶”。,(,(, ,编码有机磷农药降解酶基因的种类 随着人们对有机磷农药降解酶的研究，相继克隆到了有机磷农药降解基因,,,，,,,，,,,,，,,,,等，其中多数基因位于质粒上，只有,,,,基因位于染色体上，其与。芦堪因的核苷酸序列有,,,的相似性，通过对降解基因的研究有利于通过基因工程技术提高微生物降解农药的能力……。,(,(,降解有机磷农药微生物及其酶制剂的应用 经历了多年的深入研究，有些降解有机磷农药的微生物及酶制剂已经得到了应用，并展现出较好的前景。,(, ,(,降解有机磷农药活体微生物的应用 ,,,,,,等用从蝇毒磷污染的土壤中分离的菌株制成生物过滤柱，在 第,章绪论 ,,,,,内可将污水中,,,,,,,,的蝇毒磷降低到,(,,,,,。罗启芳等则应用 固定化细胞技术，将动性球菌与活性碳包埋于聚乙烯醇(,,,)中，可降解,,,;,高达,,,,,,,,的水胺硫磷。曹志方等将假单胞菌,,(,(,,,,,,,,,,,)和瓶形酵母菌,,,,(,,,,,,,,,,,,)组成联合菌，在甲胺磷生产废水,,,生化处理工艺上进行小试，结果表明，联合菌驯化后处理废水时，在进水,,,浓度为,,,,—,,,,,,,,范围内，甲胺磷的去除率达到,,,以上。程国锋等用甲胺磷降解菌,,;,,,, ,,(,,—,,和乐果降解菌,,,(,,(,,的菌制剂进行小区试验的结果表明，该菌剂对残留的甲胺磷和乐果有明显的去除效果。戴清华。“等的大田试验中研究表明，菌株,,一,对水稻壳中的三唑磷残留去除率为,,(,,，对糙米的三唑磷残留去除率为,,,,。,(,(,(,降解有机磷农药酶的应用 有机磷降解酶的用途非常广泛。可用于新鲜蔬菜、瓜果等农产品上残留农药的清洗脱毒;可作为有机磷农药中毒的解毒剂;可用于食品加工中农产品原料残留农药的脱毒;还可用来净化农药污染的水体和土壤。“,。 ,,,,,,,,等利用浅青紫链霉菌(,,,,,,,,,;,, ,,,,,,,,)表达系统发酵得到有机磷降解酶(,,,)的无细胞酶液，利用此酶液处理;,,,,,,,农药厂的生产废水，效果良好。 ,,,;,,,,,,,等利用固定在不同支持物上的,,,或能表面“展示”它的大肠杆菌细胞，设计了几种生物传感器，用来进行有机磷化合物的微量检测，如对对氧磷的检测浓度最低可达,(，,,,,,,。此外，美国研制出了一种催化酶系统,,,,，是由多种可降解神经毒剂和有机磷农药的酶以及灭火剂组成的，既可用于消除有机磷化合物污染又可用于灭火。这一产品的技术转让以及商业运作正在进行。,,,,等人利用基因融合技术得到了,,,的融合蛋白,,,,,—,,,(,,(,,,)，将此融合蛋白固定在柱中，当含有对氧磷的溶液通过柱子时，对氧磷迅速被降解， 黑龙江大学硕士学位论文 且酶活性高低年，，,,,产生的荧光的水平是完全一致的，可以用荧光来监 测酶的活性。 ,(,佣，,,孢芽孢杆菌的生物活性研究概况 侧孢芽孢杆菌在自然界分布极其广泛，在寒带、温带、热带均有分 布，在某些昆虫的体内、鱼体内、土壤、淡水、海水及其它生境中广泛 存在””九”“。,,,,年,,,,,等通过,,;,,,,, ,,,,,,,,,,“,的,,,,,,,序列 分析及系统发育树的构建研究把其归类为短芽孢杆菌属(,,,,曲口;,舰,)， 并命名为侧孢短芽孢杆菌(,,,,,,,;,,,,, ,,,,,,,,,,,,)。“”,“…。近几年来， 随着对侧孢芽孢杆菌的深入研究，已经发现其能产生多种有应用潜力的代谢产物。如 杀虫蛋白、抑菌物质、抗癌免疫调节物质“。,，另外侧孢芽孢杆菌还具有解磷、解钾、固氮等多种生物学功能。作为一个多功能菌株，侧孢芽孢杆菌成为国内外微生物学的,个研究热点。 ,(,(,侧孢芽孢杆菌的杀虫能力 目前，随着昆虫对转,,基因植物抗性的产生，人们正在寻找新的杀虫微生物、新的杀虫蛋白和新的杀虫基因。侧孢芽孢杆菌具有良好的杀虫效果““，发展前景良好。,(,(,(,侧孢芽孢杆菌的杀蚊虫能力的研究 ,,,,,,等““人对两株侧孢芽孢杆菌(,,,和,,,)进行研究，发现该菌对蚊科幼虫具有杀灭作用，特别是对斯氏按蚊属(,,,,,,,,, ,,,,,,,,,)杀虫能力较强，但对尖音库蚊、埃及伊蚊的毒性则因菌种而异。徐婉学和范云六“”报道侧孢芽孢杆菌,,,(,,,菌株对三带喙库蚊(,”,,,,,,,,,,,,,,,;,,,)、尖音库蚊(,(,,,,,,,)、库蚊(,,,,, ,,,,括,,,,)、白纹伊蚊(,,,,,,,,,,,;,,,)和中华按蚊(,,,,,,,,, ,,,,,,,,)具有杀虫活性。,,,,,,和,,,,,,,””所研究的,,株侧孢芽孢杆菌中有一多半对蚊子幼虫表现出毒性。尽管侧孢芽孢杆菌具有较好的杀蚊虫活性，但科研人 第,章绪论员对其杀虫机制研究较少。,,,,,,等。”,人的研究结果表明，侧孢芽孢杆菌的杀虫活性与该菌产生的芽孢有关，而与在芽孢形成过程中培养基中存在的可溶性物质没有关系。,(,(,(,侧孢芽孢杆菌杀线虫能力的研究 ,,,,等人”“研究发现,,,,,,,;,,,,, ,,,,,,,,,,,,能够产生毒性物质，抑制线虫卵的孵化或幼虫的发育，能够防治动物体内的线虫。该毒素具有抗热及抗溶菌酶的特性，在,,—,,?加热卜,,，对线虫卵的毒性明显提高。美国已经将, ,,,,,,,,,,,,制成粉剂、溶剂等用于防治动物的线虫病。我国云南大学张克勤等““报道了,，,,,,,,,,,,,,,产生的胞外蛋白具有杀线虫的能力，该蛋白的分子量为,, ,,,，在,,。,，,,为,,时活性最强，其粗提胞外蛋白作用于线虫,,,内就表现出良好的杀虫作用，,,,能够彻底杀死线虫。组织病理学观察表明，该蛋白能够破坏线虫表皮并穿过表皮分解宿主。,(,(,(,侧孢芽孢杆菌杀其它类害虫的能力 侧孢芽孢杆菌除了能够杀蚊虫及线虫之外，还对多种害虫有杀灭作用。法国巴斯德研究所证实,(,,,,,,,,,,,,除了能产生杀蚊虫细菌毒素外，还能杀灭黑蝇“”及白蛆“…。,,,,,,等””人的研究表明, ,,,,,,,,,,,,还能杀死烟草甲虫、蜗牛及贻贝等软体动物。,,,,,,等人“,?研究发现曰,,,,,,,,,,,对鞘翅目的,,,,,,,,,, ,,,,,,,幼虫的致死率为,,(,,,，对鳞翅目的,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,有一定的致病力。此外，张书方等。“研究发现侧孢芽孢杆菌菌株,,,,对蛴螬的致病率达,,,,。,(,(,侧孢芽孢杆菌代谢产生的抑菌物质 侧孢芽孢杆菌除了具有杀虫活性之外，还.