药物分析 讲义第十六章　维生素类药物的分析

药物 讲义第十六章　维生素类药物的分析 执业药师考试辅导 《药物分析》 第十六章 维生素类药物的分析 考试要求: 的鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定(1)维生素B1 1.维生素B 方法 1 (2)维生素B片、维生素B注射液的含量测定方法 11 (1)维生素C的鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方 法 2.维生素C (2)维生素C片、维生素C注射液的鉴别、检查和含量测定方(九)维生素类药物 法 的分析 维生素E物理常数的测定、鉴别的方法、杂质检查的项目和方3.维生素E 法、含量测定的方法 物理常数的测定、鉴别的方法、杂质检查的项(1)维生素K1 4.维生素K 目和方法、含量测定方法 1 (2)维生素K注射液的含量测定方法 1 第一节 维生素B及其制剂的分析 1 重点: 1.维生素B的鉴别方法、特殊杂质检查、含量测定方法 1 2.维生素B制剂的含量测定方法 1 一、结构特点和鉴别特征 第1页 执业药师考试辅导 《药物分析》 1.共轭体系——紫外吸收 2.碱性——与酸反应、与生物碱沉淀试剂生成沉淀、可用非水碱量法测定含量 3.S——S的特征反应 二、鉴别 1.硫色素反应 维生素B在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化生成硫色素。硫色素溶解于正丁醇(或异丁醇等)中，显1 蓝色荧光。加酸荧光即消失;再加碱使成碱性，荧光又显出。 2.氯化物的鉴别——氯化物检查法 三、检查 1.硝酸盐——靛胭脂法 标准硝酸钾溶液(每1ml相当于50μgN0) 3 稀靛胭脂试液比色法。 第2页 执业药师考试辅导 《药物分析》 2.总氯量——银量法(沉淀滴定法) 滴定液:硝酸银滴定液(0.1mol,L) 指示剂:溴酚蓝指示液 3.其他检查项目 “酸度”、“溶液的澄清度与颜色”、“硫酸盐”、“干燥失重”、“炽灼残渣”、“铁盐”和“重 金属” 四、含量测定 1.维生素B的含量测定 1 维生素B为有机碱的盐酸盐，《中国药典》采用非水溶液滴定法测定维生素B原料药的含量。 11 溶剂:冰醋酸，加醋酸汞排除盐酸的干扰 滴定液:高氯酸滴定液 指示剂:喹哪啶红-亚甲蓝混合指示剂 2.维生素B片的含量测定 1 紫外分光光度法，在246nm波长处测定吸光度。吸光系数法计算。 3.维生素B注射液的含量测定 1 同片剂 历年考点: 1.维生素B的鉴别方法 1 2.维生素B的特殊杂质检查 1 3.微生物B的含量测定方法。 1 单项选择 下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光是 A.维生素A B.维生素B 1 C.维生素C D.维生素D E.维生素E [答疑编号111160101] 『正确』B 『答案解析』考察维生素类药物的鉴别方法。由题干可知，反应的试剂为铁氰化钾。能与铁氰化钾反 应先蓝色荧光的药物是维生素B，为硫色素反应。 1 配伍选择题 A.硫酸钡试液 B.硝酸银试液 C.醋酸铅试液 D.铁氰化钾试液 E.三氯化铁试液 以下药物鉴别试验中需要加入的试液是 1.维生素B的硫色素反应 1 [答疑编号111160102] 第3页 执业药师考试辅导 《药物分析》 『正确答案』D 2.苯巴比妥的丙二酰脲类鉴别反应 [答疑编号111160103] 『正确答案』B 『答案解析』考察不同类药物的鉴别方法。维生素B的硫色反应是在碱性溶液中，被铁氰化钾氧化生1 成硫色素。硫色素溶解于正丁醇(或异丁醇等)中，显蓝色荧光。所以加入的试剂是铁氰化钾，答案D。苯巴比妥的丙二酰脲反应，在碱性条件下，可与某些重金属离子反应，生成沉淀或有色物质，最常用的重金属离子试剂是硝酸银或铜吡啶试液。所以题2应选B 第二节 维生素C及其制剂的分析 重点: 维生素C及制剂的鉴别方法、杂质检查项目、含量测定方法 一、结构特点和鉴别特征 第4页 执业药师考试辅导 《药物分析》 1.二烯醇羟基——酸性、还原性 2.手性C原子——旋光 二、鉴别 1.与硝酸银试液的反应 + 维生索C分子中的二烯醇基具有较强的还原性，可被Ag氧化为去氢抗坏血酸，同时产生黑色的单质银 沉淀。 2.与二氯靛酚钠试液的反应 与二氯靛酚钠试液的反应，使玫瑰红色的试液颜色消失 3.红外分光光度法 具有羟基、羰基、C-O的红外特征吸收 三、检查 1.溶液的澄清度与颜色 紫外-可见吸光光度法420nm处测定吸光度 2.铜盐、铁盐检查 原子吸收分光光度法 248.3nm是铁的分析线波长。采用标准加入法检查，限量为百万分之二。 324.8nm是铜的分析线波长。采用标准加入法检查，限量为百万分之五。 3.细菌内毒素 4.其他:“炽灼残渣”和“重金属” 四、含量测定 1.维生素C的含量测定 维生素C具有还原性，《中国药典》采用碘量法测定维生素C的含量。 溶剂:新沸过的冷水+稀醋酸 原因:加入稀醋酸可使滴定时维生素C受空气中氧的氧化作用减慢， 使用新沸过的冷水作为溶剂，是为了减少水中溶解的氧对测定的影响。 滴定液:碘滴定液 指示剂:淀粉指示液 反应摩尔比维生素C:碘滴定液=1:1 2.维生素C片的含量测定 碘量法 第5页 执业药师考试辅导 《药物分析》 3.维生素C注射液的含量测定 碘量法 溶剂:水+丙酮 加入丙酮的目的——消除注射液内含有的抗氧剂亚硫酸氢钠对测定的影响 《中国药典》要求维生素C注射液的含量应为标示量的90.0%,110.0%。 历年考点: 1.维生素C的鉴别方法 2.维生素C的含量测定方法 单项选择题 使用碘量法测定维生素C的含量，已知维生素C的分子量为176.13，每1ml碘滴定液(0.1mol/L)， 相当于维生素C的量为 A.17.61mg B.8.806mg C.176.1mg D.88.06mg E.1.761mg [答疑编号111160104] 『正确答案』A 『答案解析』考察维生素C的含量测定方法。维生素C由于具有还原性，可以用碘量法进行测定。反 应中1mol的维生素需要消耗1mol的碘滴定液。1ml碘滴定液(0.1mol/L)为0.1mol，可以和0.1mol的维 生素C反应，所以对应的维生素C的质量为0.1mol*176.13=17.63mg，答案为A。 配伍选择题 可发生以下反应或现象的药物为 A.维生素B(盐酸硫胺) 1 B.维生素C C.两者均能 D.两者均不能 1.与碘化汞钾生成黄色沉淀 [答疑编号111160105] 『正确答案』A 2.在乙醚中不溶 [答疑编号111160106] 『正确答案』C 3.与2,6-二氯靛酚反应使颜色消失 [答疑编号111160107] 『正确答案』B 4.硫色素反应 [答疑编号111160108] 第6页 执业药师考试辅导 《药物分析》 『正确答案』A 『答案解析』考察维生素B.维生素C的鉴别方法。维生素B1具有碱性，可以与生物碱沉淀试剂反应1 生成沉淀，所以题1选A。维生素B含有S元素，可发生硫色素反应，所以题4选A。维生素C具有还原性，1 能使二氯靛酚褪色，所以题3选B。维生素B为盐酸盐，维生素C具有类似与糖的结构，都属于在水中易溶1 而在有机试剂中难溶的药物，所以题2选C。 多项选择题 关于维生素C注射液的含量测定，叙述正确的有 A.以中性乙醇作溶剂 B.滴定前先加入丙酮 C.用碘滴定液滴定 D.用淀粉作指示剂 E.维生素C注射液的含量应为标示量的99.0%,101.0% [答疑编号111160109] 『正确答案』BCD 『答案解析』考察维生素C注射液的含量测定方法。维生素C注射液与原料药一样，都是采用碘量法测定含量，以水作为溶剂，以碘作为滴定液，以淀粉作为指示剂。与原料药不同的是注射液中由于含有抗氧剂亚硫酸氢钠，为了去除亚硫酸氢钠对测定的影响，在滴定前需要加入2ml丙酮。药典要求维生素C注射液的含量应该为标示量的90-110%。所以综合上述，正确的是BCD。 第三节 维生素E的分析 重点: 维生素E物理常数测定、鉴别方法、特殊杂质检查及含量测定方法 一、结构特点和鉴别特征 维生素E包括合成型维生素E和天然型维生素E。 1.乙酰化酚羟基——水解后显强还原性 2.多个手性C原子——旋光 二、物理常数的测定 第7页 执业药师考试辅导 《药物分析》 1.比旋度 维生素E包括合成型维生素E和天然型维生素E。合成型维生素E是消旋的α-生育酚醋酸酯，天然型维生素E为右旋的α-生育酚醋酸酯。对于天然维生素，《中国药典》要求测定其比旋度。 2.折光率 维生素E为油状液体 3.吸收系数 紫外分光光度法，溶液浓度:1ml含0.1mg的溶液，在284nm的波长处测定吸光度，计算吸收系数。 三、鉴别试验 1.与硝酸的反应——水解后的还原性 维生素E在酸性条件下加热，先水解为生育酚，进一步被硝酸氧化成生育红，显橙红色。 2.红外光谱法 四、检查 1.酸度:滴定液法。加酚酞指示液0.5ml，滴加氢氧化钠滴定液至微粉红色。1.0g消耗的0.1mol/L滴定液不超过0.5ml。 2.生育酚:铈量法。 3.正己烷的检查:溶剂残留，气相色谱法。氢火焰离子化检测器(FID)检测，外标法计算。 五、含量测定 维生素E的含量测定方法很多，目前《中国药典》、USP、BP等均采用气相色谱法进行 内标法加校正因子 内标物正三十二烷 固定相硅酮(OV-17) 单项选择题 维生素E特殊杂质检查，含量测定方法 用气相色谱法测定维生素E的含量，中国药典(2005年版)规定采用的检测器为 A.紫外检测定器 B.荧光检测定器 C.热导检测器 D.氢火焰离子化检测器 [答疑编号111160110] 『正确答案』D 『答案解析』考察维生素E的含量测定方法，各国药典均采用气相色谱法测定维生素E的含量，对有机化合物，气相色谱多采用氢火焰离子化检测器进行检测。 第8页 执业药师考试辅导 《药物分析》 检查维生素E中的游离酚时，采用方法应为 A.对照法 B.灵敏度法 C.紫外分光法 D.滴定法 E.旋光法 [答疑编号111160111] 『正确答案』D 『答案解析』维生素E制备中中引入的游离酚(生育酚)具有还原性，中国药典采用氧化还原滴定法(铈量法)进行检查。在选项中，只有滴定法符合要求。 配伍选择题 A.炽灼残渣 B.酸度 C.生育酚 D.正已烷 E.溶液的澄清度 以下维生素E检查方法所对应的检查项目是 1.取供试品1.0g，加乙醇和乙醚各15ml，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定，消耗氢氧化钠滴定液不得超过0.5ml [答疑编号111160112] 『正确答案』B 2.取供试品0.10g,加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈滴定液(0.01mol/L)滴定，不得超过1.0m [答疑编号111160113] 『正确答案』C 『答案解析』考察维生素E的杂质检查方法。题1关键词，氢氧化钠滴定液，可以得知要测定的是酸性物质，所以检查的是维生素E的酸度，答案为B。题2关键词，硫酸铈滴定液，可以得知要测定的是还原性的物质，所以检查的是维生素E的杂质生育酚，答案为D。正己烷检查用的是气象色谱法。 第四节 维生素K及其制剂的分析 1 重点: 维生素K物理常数测定、鉴别方法、特殊杂质检查及含量测定方法 1 一、折光率的测定 维生素K为油状液体，《中国药典》规定测定其折光率。按“折光率测定法”测定，应为1.525,1.528。 1 二、鉴别方法 第9页 执业药师考试辅导 《药物分析》 1.呈色反应:维生素K在碱性条件下可分解呈色 1 维生素K与氢氧化钾的甲醇溶液反应，溶液显绿色;置热水浴中即变成深紫色;放置后，显红棕色。 1 2.高效液相色谱法 3.紫外-可见分光光度法 维生素K具有萘醌的结构，有特征的紫外吸收光谱。最大吸收波长、最小吸收波长、吸光度比值 1 4.红外光谱法 醌、烯、苯环、邻位取代苯的特征红外吸收峰。 三、检查 1.甲萘醌:甲萘醌在氨碱性条件下与氰基乙酸乙酯反应呈蓝色 2.顺式异构体:高效液相色谱法分离顺反式结构。按峰面积归一化法计算。 四、含量测定 1.维生素K的含量测定 1 高效液相色谱法，采用内标法加校正因子测定维生素K的含量，内标物质是苯甲酸胆甾酯。使用硅胶1色谱柱，为吸附色谱。 2.维生素K注射液的含量测定 1 高效液相色谱法。使用非极性化学键合相十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，无水乙醇-乙醚(95:5)为 流动相，属于反相色谱。 多项选择题 维生素K的鉴别方法、特殊杂质、含量测定方法 1 《中国药典》中应进行折光率测定的药物有 A.维生素B 1 B.维生素C C.维生素E D.维生素K 1 E.葡萄糖 [答疑编号111160114] 『正确答案』CD 『答案解析』考察维生素E.K的物理常数测定。只有液体药物才会测定折光率，在选项中液体药物为1 维生素E和维生素K，所以答案为CD。 1 1.能发生硫色素反应的药物:维生素B 1 2.能与硝酸银反应生成黑色单质银的药物:维生素C 3.能使二氯靛酚钠褪色的药物:维生素C 4.在酸性条件下水解后，能被硝酸氧化显橙红色的药物:维生素E 5.能与氢氧化钾甲醇溶液呈色的药物:维生素K 1 6.用碘量法测定含量的药物:维生素C 7.用气相色谱法测定含量的药物:维生素E 8.进行折光率检查的药物:维生素E，维生素K 1 维生素类药物 典型药物 化学鉴别 特殊杂质检查 含量测定 第10页 执业药师考试辅导 《药物分析》 硫色素反应(铁氰化钾氧?硫色素，加正丁醇?蓝硝酸盐(靛胭脂原料:非水溶液滴维生素B 色荧光) 法) 定法 1 氯化物反应 总氯量(银量法) 制剂:UV 溶液澄清度与颜硝酸银反应(黑色?) 原料:碘量法 维生素C 色 二氯靛酚钠反应(褪色) 制剂:碘量法 铜盐、铁盐(AAS) 酸度(滴定液) 维生素E 硝酸反应(水解后被硝酸氧显显橙红色) 生育酚(铈量法) GC 正己烷(GC) 甲萘醌(比色) 呈色反应(氢氧化钾甲醇溶液?绿色，加热?深紫原料:吸附HPLC 维生素K 顺式异构体1色?红棕色) 制剂:反相HPLC (HPLC) 第11页