T01总胆红素
总胆红素(T-BIL)测定
钒酸盐氧化法
1. 原理
血清中的直接和间接胆红素在一定条件下被钒酸盐氧化成胆绿素,监测反应前后450nm处(胆红素吸
收峰)的吸光度下降可求出总胆红素的浓度。
2. 标本采集:
2.1 标本采集前病人准备:受检者空腹。
2.2 标本种类:血清、肝素或EDTA 血浆。
2.3 标本要求:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静
脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。标本置37?水浴箱30min,
45min后离心分离血清,上机测试。
3. 标本储存:标本收集后应立即测定,注意避光,否则需冷冻保存,且不可反复冻融。 4. 标本拒收标准:细菌污染、溶血、脂血标本不能作测定。
5. 试剂
5.1 试剂名称:总胆红素测定试剂盒。
5.2 试剂生产厂家:上海科华东菱诊断用品有限公司。
5.3 包装规格:R1 96ml×2支, R2 48ml×1支。
5.4 试剂盒组成:
组 成 初 始 浓 度
R1:柠檬酸缓冲液 100mmol/L
表面活性剂? 适量
R2:磷酸盐缓冲液 10mmol/L
偏钒酸钠 4mmol/L
5.5 试剂储存条件及有效期:2,8?避光保存,有效期一年。 6. 仪器设备:
TOSHIBA 120FR全自动生化分析仪。
7. 操作步骤:
反应类型:终点法 主波长:450nm 次波长:546nm
Sample:5ul R1:140ul R2:35ul
S,R1:5分钟 ,R2:5分钟
试剂参数详见说明书。
定标操作以及样本检测常规操作,见《生化分析仪操作规程》。 8. 结果计算:
?A测定
c, ×C O ?A 标准
式中:c—— 测定血清T-BIL浓度,umol/L;
—— 标本管吸光度; A测定
A—— 标准管吸光度; 标准
C—— 校准血清中T-BIL浓度,umol/L; 0
?A ,A2,A1
仪器直接读出测定结果,无需计算。
9. 质量控制:每天使用RANDOX水平1、水平2质控和临床标本同时检测,结果在控制范围内。 0. 生物参考区间:3.42,20.5 umol/L 1
11. 操作性能:
0,684 umol/L; 11.1线性范围:
11.2 精密度: 批内变异系数CV?6%,批间极差?6 %。
11.3 准确度:与质控血清靶值相对偏差应?10 %。
12.超出范围结果处理:如果结果超过684 umol/L,需用蒸馏水稀释后测定,结果乘以稀释倍数。 13. 注意事项:
13.1 由于胆红素遇光要崩解,样品和标准品要远离直射光源。
13.2本试剂能抗抗坏血酸对测定的干扰(50mg/L以下),但溶血对测定有影响,若遇到溶血样本,请先做血清空白测试。
13.3请勿将R1与R2混合成工作液使用。
14. 临床意义:
胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强,几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中,胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血(肝前黄疸)、实质的肝损伤(肝性黄疸)和胆管堵塞(肝后黄疸)都会导致血液胆红素增高,形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症,称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多,使60,70%的婴儿血液出现总胆红素增高。