大鼠股静脉注射三种硬化剂后的病理变化

大鼠股静脉注射三种硬化剂后的病理变化 蚌埠医学院学报990604 蚌埠医学院学报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE BENGBU 1999年 第24卷 第6期 Vol.24 No.6 1999 大鼠股静脉注射三种硬 化剂后的病理变化 杨培生 李宏为 蔡伟耀摘要 目的:比较三种硬化剂的致硬化 作用和局部毒性。方法:将152只SD大鼠随机分为5鱼肝油酸钠组n48、1乙氧硬化醇 组n48、消痔灵注射液组n48和对照组n8，每只大鼠以自身对照分别将三种硬化剂注 入股静脉内及其周围，于注射后2 h,3周取静脉及其周围组织行组织学检查。结果: 24 h后，5鱼肝油酸钠组和1乙氧硬化醇组均发生坏死性炎症伴明显中性粒细胞浸润; 而消痔灵组发生“凝固性坏死”伴轻度炎细胞浸润。72 h后，肉芽组织开始修复并逐 渐纤维化。消痔灵于静脉周围注射后产生更明显的纤维化;而静脉内注射则产生严 重的淤血水肿和血栓形成。结论:消痔灵可能成为一种高效、并发症少的理想硬化 剂。关键词 硬化溶液 消痔灵 食管静脉曲张中国图书资料分类法分类号 R 571.3 Pathological changes after the intra or parafemoral vein injection of three sclerosants Yang PeishengLi HongweiCai WeiyaoDepartment of Emergency SurgeryAffiliated Hospital of Bengbu Medical CollegeAnhui 233004Abstract Objective:To compare the sclerotic and local toxic effect of the three sclerosants.Methods:One hundred and fifty-two Sprague-Dawley rats were divided at random into 4groups:5 Sodium morrhuate groupn481 Aethoxysclerol groupn48Xiaozhilinggroupn48 and control groupn8.The three sclerosants were injected respectively intoeach groupthrough intra or parafemoral vein.The rats were killed for histopathologicalexamination 2 hours,3 weeks after injection.Results:In both 5 Sodium morrhuate groupand 1 Aethoxysclerol groupnecroinflammation occured accompanied by remarkableneutrophil infiltrationwhereas in Xiaozhiling groupcoagulation necrosis occuredaccompanied by slight neutrophil infiltration 24 hours after injection and 72 hours laterfibrosis of the granulation tissue started to appear.Xiaozhiling induced remarkable densefibrosis in the parafemoral injected veinswhereas very severe congestionedema andthrombus were induced in the intrafemoral injected veins.Conclusions:Xiaozhiling is a highefficient with low complication sclerosant.Key words sclerosing solutionXiaozhilingesophageal vericesfile:///E/qk/bbyxyxb/bbyx99/bbyx9906/990604.htm(第 1,6 页)2010-3-22 15:12:35蚌埠医学院学报990604 经内镜注射硬化剂治疗食管静脉曲张 endoscopic injection sclerotherapy foresophageal varicesEIS已有半个多世纪的历史，其 疗效已为大量的临床随机对照研究所肯定〔1〕。EIS控制食管静脉曲张破裂出血的 急性止血率达85,95，死亡率小于5，目前已成为食管静脉曲张破裂出血期治疗的“金 标准”〔2〕。通过10余年的临床实践，笔者体会到，虽然EIS有虾玫牧菩В 瓒啻 畏锤醋?溆不 练侥苁骨 啪猜鱿 В灰环矫媸够颊咴黾油纯嗪头延茫 ??,瘛 ?鲅 龋 笶IS不得不暂时停止;另一方面，消失的曲张静脉也常会出血和复发等。 “消痔灵注射液”是根据祖国医学“酸可收敛，涩可固脱”的理论，以中药五倍子的主 要成分鞣酸和硫酸钾铝明矾为主研制而成〔3〕，临床上用于三期内痔的治疗，1,2 次注射后治愈率达90以上，且无溃疡、出血、肛门狭窄等并发症〔4〕。为此，笔者 将国际上应用较多的乙氧硬化醇AS、国内应用较多的5鱼肝油酸钠SM和消痔灵注射 液予以比较，研究三种不同硬化剂的致硬化作用和其毒性，现作初步报道。1 材料 与方法1.1 实验动物 雄性SD大鼠152只，重量200,250 g。随机分为5鱼肝油酸钠 组、1乙氧硬化醇组、消痔灵注射液组，每组48只，另8只作为生理盐水对照组。1.2 实验方法 每只大鼠的两侧股静脉分别采取股静脉内注射和股静脉周围注射法，作为自身对照，比较两种不同的注射方法。用2.5戊巴比妥钠1ml/kg腹腔内注射麻醉，经腹股沟区切开皮肤约1.0,1.5 cm从皮下脂肪中分离出股静脉属支。股静脉内注射组A组:从股静脉属支内分别注射5鱼肝油酸钠0.2 ml1乙氧硬化醇0.2 ml，消痔灵注射液0.3 ml至股静脉内按二倍推荐剂量，注射前用缝线将股静脉连同股动脉和股神经暂时阻断，使硬化剂在股静脉内保留1 min不至回流，注射后压迫出血点至不出血为止。股静脉周围注射组B组:将硬化剂直接注射于股静脉周围，剂量同上。分别于注射后2 h、24 h、72 h、1周、2周、3周将大鼠处死，取股静脉及其周围组织行病理学检查，并观察整个下肢的血供、炎症、溃疡和坏死等，按炎症和血栓分级标准记录见表1。为了排除手术操作所带来的影响，取对照组8只大鼠，将股静脉及其周围按上述相同方法注射生理盐水。组织病理学检查用HE染色和Masson染色。1.3 统计学方法 采用χ2检验和两样本比较的秩和检验。 表1 炎症和血栓的分级标准 炎症: 下肢淤血明显，皮肤及整个下肢淤血、水肿，呈暗红色，接近坏死 程度较上述轻 仅血管周围水肿淤血，肢体淤血不明显 血管周围轻度水肿，渗液清 血栓: 股静脉及属支内均有血栓 股静脉属支内血栓 file:///E/qk/bbyxyxb/bbyx99/bbyx9906/990604.htm(第 2,6 页)2010-3-22 15:12:35 蚌埠医学院学报9906042 结果2.1 大鼠股静脉注射乙氧硬化醇后的病理变化 1大体改变:72 h内，股静脉内和股静脉周围注射乙氧硬化醇所引发的炎症相近，差异无显著性0.05，而股静脉内组血栓形成率显著高于股静脉周围组χ20.00P, χ212.08P,0.005。72 h后，两组的血栓、炎症和纤维化程度差异均无显著性χ20.27P,0.05见表2。2镜下改变:2 h:无论是股静脉内组还是股静脉周围组，血管内皮均见脱落，部分股静脉内有血液成分的沉积或血栓形成，少量中性粒细胞浸润;股静脉周围组织坏死较严重。24 h:除上述变化外，炎细胞数量明显增多，炎细胞类型以中性粒细胞和单核细胞为主。72 h:炎细胞由早期的细胞类型转变为以淋巴细胞、单核细胞和纤维母细胞为主，并出现一定数量的毛细血管，股动脉和周围肌肉组织也可见一定数量的炎细胞浸润。1,3周:以修复相为主，由单核细胞、淋巴细胞和成纤维母细胞、毛细血管等组成的肉芽组织逐渐成熟、老化、并纤维化。血管内和血管周围的纤维化程度差别不明显，肉芽组织内也见少量的异物巨细胞和含铁血黄素颗粒。 表2 SD大鼠股静脉注射1乙氧硬化醇后不同时间的变化ni8 血栓 炎症 纤维化 时间 死亡数死因 A B A B A B 2h 3 1 8 8 — — 1麻醉 24 h 6 2 8 8 — — 1下腔静脉栓塞 72 h 8 2 8 8 — — 1周 3 1 1 3 — — 血管外组2例溃疡 2周 0 0 0 0 轻度 轻度 3周 0 0 0 0 轻度 轻度 2.2 大鼠股静脉注射5鱼肝油酸钠后的病理改变 1大体改变:72 h内，股静脉内和静脉周围注射硬化剂后血栓形成差异有显著性χ224.47P,0.005;炎症反应程度均以静脉内注射明显，但发生例数间差异无显著性uc0.25P,0.05。72 h后，炎症情况和血栓形成差异均无显著性χ22.95和χ20.10P,0.05，但静脉周围组的纤维化更明显见表3。2镜下改变:2 h:静脉内、外注射组见炎症、水肿和一定数量的血栓形成，炎细胞浸润程度轻。24 h:炎症坏死程度明显加重，炎细胞积聚，部分区域见成堆的炎细胞和坏死组织，炎细胞以中性粒细胞为主。72 h:上述改变转变为以淋巴细胞、单核细胞和纤维母细胞为主的肉芽组织，出现一定数量的毛细血管和坏死区。1,3周:肉芽组织逐渐成熟、老化，形成纤维组织。 表3 SD大鼠股静脉注射5鱼肝油酸钠后不同时间的变化ni8 血栓 炎症 纤维化 时间 死亡数死因 A B A B A Bfile:///E/qk/bbyxyxb/bbyx99/bbyx9906/990604.htm(第 3,6 页)2010-3-22 15:12:35 蚌埠医学院学报990604 2h 7 1 8 8 — — 1下腔静脉栓塞和内脏梗死 24 h 8 2 7 8 — — 1下腔静脉栓塞和内脏梗死 72 h 7 2 8 8 — — 2下腔静脉栓塞 1周 6 3 8 7 — — — 2周 2 0 0 0 中度 重度 3周 0 0 0 0 中度 重度2.3 大鼠股静脉注射消痔灵后不同时间的病理改变 1大体改变:股静脉内注射硬化剂后几分钟即可见下肢淤血、水肿，72 h内和72 h后，股静脉内组和股静脉周围组的血栓形成差异均有显著性χ24.76和χ28.75P,0.05和P,0.01，以股静脉内组为严重。两组炎症例数虽差异无显著性χ20.00P,0.05，但炎症反应程度仍以股静脉内组为甚;股静脉周围组有更明显的纤维化。并见4只大鼠股静脉内注射硬化剂后下肢脱落，部分见血栓形成见表4。2镜下改变:2 h:股静脉周围组和静脉内组均发生一定程度的“凝固性坏死”，血管内皮完全脱落，部分见血栓形成。24 h:上述凝固性坏死伴轻度炎细胞浸润，以中性粒细胞和单核细胞为主。72 h:由淋巴细胞、单核细胞、纤维母细胞和毛细血管组成的 ,3周肉芽组织逐渐老化并纤维化，静脉周围组纤维肉芽组织伸入凝固性坏死区。1 化更明显。 表4 SD大鼠股静脉注射消痔灵后不同时间的变化ni8 血栓 炎症 纤维化 时间 死亡数死因 A B A B A B 2h 8 3 8 8 — — 2 24 h 8 8 8 8 — — 1 72 h 8 7 8 8 — — — 1周 8 0 8 8 — — — 2周 1 0 0 0 轻度 重度 — 3周 0 0 0 0 轻度 重度 —file:///E/qk/bbyxyxb/bbyx99/bbyx9906/990604.htm(第 4,6 页)2010-3-22 15:12:35 2 h,3周均无明显纤维化和血栓形成。3 讨论蚌埠医学院学报9906042.4 对照组 3.1 将1乙氧硬化醇用两种不同的方法注射后72 h内，静脉内组的血栓形成率显著高于静脉周围组，两组的炎症反应程度差异无显著性。接下去的1,3周内，静脉内组和静脉周围组均产生一定程度的以肉芽组织逐渐老化并纤维化为特征的改变。这提示，在急性出血时，静脉内注射可能较快地产生疗效，若将两种方法联合应用，将产生更理想的疗效。文献中，1乙氧硬化醇以曲张静脉粘膜下注射为主。据Grobe等报道〔5〕曲张静脉内注射硬化剂后，在20,60的患者中，硬化剂也将循穿刺针眼回渗到粘膜下层，因此并非单纯静脉内注射的结果。笔者认为，静脉内注射后，也或轻或重地引起静脉周围的炎症和纤维化，将静脉内注射和粘膜下层注射法结合应用，一方面可以发挥两种注射方法的作用，另一方面可以减少曲张静脉旁粘膜下注射的硬化剂剂量，从而减少并发症的发生率，将产生更为满意的疗效。3.2 5鱼肝油酸钠是传统的硬化剂，多年来已有深入的研究。本组结果显示，静脉内和静脉周围注射5鱼肝油酸钠后早期，前者的血栓形成率较后者高P,0.05,P,0.01，炎症反应则差异无显著性，注射后24,72 h，组织间有成堆的炎细胞积聚。注射后1,3周，无论是静脉内还是静脉周围，均产生满意的纤维化，但血栓基本再通。结合文献资料，笔者认为，5鱼肝油酸钠注射后，能产生较严重的损伤，从而必然引起明显的修复反应。这一方面能达到有效的治疗目的;另一方面，也将产生更多的并发症。结合国内目前多应用5鱼肝油酸钠的状况，应注重其并发症的预防。10余年来，上海瑞金医院应用小剂量5鱼肝油酸钠1,2 ml于曲张静脉内加曲张静脉周围粘膜下注射，取得满意疗效，并发症极少，73例急诊注射者仅1例伴发肺部感染，而无食管并发症出现〔6〕。3.3 消痔灵股静脉内注射后，短时间内出现明显的下肢淤血、水肿和血栓形成。这提示消痔灵不能用于静脉内注射，否则有引起异位栓塞的危险。消痔灵注射于股静脉周围后，2 h既能引起“凝固性坏死”和血管内膜损伤、血液成分沉积，并 有一定的血栓形成，72 h内，凝固性坏死不伴有明显的炎细胞浸润;72 h后，以肉芽组织逐渐包围坏死区的方式将坏死吸收并逐渐纤维化，纤维化程度远较上述两种硬化剂明显，并未见明显的液化、坏死。这种明显的纤维化理应产生理想的“硬化”效果;另一方面，应用于治疗食管静脉曲张，严重的纤维化可能引起食管狭窄。在内痔治疗上，将消痔灵注射液用普鲁卡因稀释到50,70的浓度，既能产生理想的疗效，又不致产生肛门狭窄、直肠溃疡等并发症〔4〕。笔者认为，若采用基本符合食管静脉曲张组织学特征的动物模型，进一步研究消痔灵的致硬化作用和局部毒性，有可能找到一个合适的剂量和浓度，既可减少注射次数而达到满意的“硬化”效果，又不致产生严重的食管狭窄，使硬化剂注射疗法的状况大为改观。作者单位:233004 蚌埠医学院附属医院急诊外科杨培生;上海第二医科大学附属瑞金医院李宏为，蔡伟耀参考文献1 Korula JYamada SBalart LAet al.A prospectiverandomized controlled trial of chronicesophageal variceal sclerotherapy.Hepatology198553? 584file:///E/qk/bbyxyxb/bbyx99/bbyx9906/990604.htm(第 5,6 页)2010-3-22 Westaby DHayes PCGimson AESet al.Controlled 15:12:35蚌埠医学院学报9906042 clinical trial of injection sclerotherapyfor active variceal bleeding.Hepatology198992?2743 史兆岐，周济民，何秀明，等.用“775”液注射疗法治疗三期内痔的临床研究.中级医刊，1980，11?514 王善立.用“775”液注射疗法治疗三期内痔的几点体会.中级医刊，1980，11?545 Grobe JL.Venography during endosopic injection 蔡伟耀，李宏sclerotherapy of esophageal varices.Gastrointest Endosc1984301?66 为，杨卫平，等.经纤维胃镜注射硬化剂治疗食管曲张静脉破裂出血73例分析.中华外科杂志，1993，314?217 收稿日期 1999-02-14file:///E/qk/bbyxyxb/bbyx99/bbyx9906/990604.htm(第 6,6 页)2010-3-22 15:12:35