【doc】小剂量17β雌二醇对去卵巢大鼠松质骨的作用

【doc】小剂量17β雌二醇对去卵巢大鼠松质骨的作用 小剂量17β雌二醇对去卵巢大鼠松质骨的 作用 生鳖盘声—年8月第19卷第4期ChinJEndocrinolMetab,August2003,Vol19,N0.4 小剂量17{3雌二醇对去卵巢大鼠松质骨的作用 杨川廖二元戴如春王闻博伍贤平 ? 327? ?基础研究? 【提要】10月龄sD大鼠200只分为3组:去卵巢大鼠;去卵巢大鼠1713雌二醇干 预组;假手术组. 发现小剂量1713雌二醇对卵巢切除所致的松质骨丢失有防治作用. 【关键词】雌二醇;去卵巢大鼠;松质骨丢失 Effectsoflowdose1713estradioloncancellousboneofovariectomizedratsYANGChuan.0 Er一}rl1.ctn. DA1Ru—chun,WANGWen— bo,UXian-ping.InstituteofMetabolismandEndocrinology,XiangyaSecondHospital ofCentralSouthUniversit~.Changsha410011 【SummaryJTwohundredSDratsweredividedintothreegroups:ovariectomized,ovariect omizedplus estradioltreatmentandSham.operated.ThepreventiveandtherapeuticeffectofthelOW.dos e17Bestradiolon cancellousboneIOSSinoveriectomizedratswasfound. 【Keywords】Estradiol;Ovariectomizedrat;CancellousbonelOSS (ChinJEndocrinolMetab,2003,19:327-328) 雌激素替代疗法(ERT)治疗绝经后骨质疏松(雌激素缺乏 性骨丢失)仍存在给药量和给药方法的问题".一般雌激素给 予量越大,防止骨丢失,保持骨密度的作用就越强,但同时,其 导致阴道流血,子宫内膜癌,乳腺癌等副作用也越明显.而 补充小剂量的雌激素,可以减少雌激素带来的许多副作用.小 剂量ERT对雌激素缺乏导致的骨量丢失也有,定的作用,但 尚缺乏系统研究.本研究的目的旨在对小剂量1713雌二醇对 去卵巢大鼠的骨丢失及其后果进行长程(21周)而系统的动态 观察. 一 ,对象和方法 1.对象:本校动物室提供10月龄雌性SD大鼠200只,无 生育及哺乳史.按体重随机的方法共分为3组:去卵巢大鼠 (VOX组)65只,体重(304.8?39.2)g;去卵巢大鼠17B雌二醇 干预组(ERT组)68只,体重(305.0?28.6)g;假手术组(SHAM 组)67只,体重(305.9?36.3)g. 2.实验方法:(1)1713雌二醇干预:在去卵巢手术后第2天 按10的剂量进行1713雌二醇(Sigma公司)肌肉注射,每 天一次,一直到处死大鼠前1天.(2)实验步骤:3组大鼠均进 行全身及活体腰椎的骨密度检查,并进行去卵巢手术,假手 术.到手术后3,9,15及21周分别放血处死大鼠.小心去除 腰椎6及右侧股骨,胫骨的附着软组织,进行骨密度测定,骨计 量分析和骨生物力学实验.(3)子宫内膜的观察:处死动物取 出子宫后,用10%的福尔马林固定,取材后由本院病理科进行 石蜡包埋及切片,HE染色,显微镜观察. 3.统计方法:3组的计量资料分析用ANOVA法,两组间的 比较用最小显着差法(1eastsignificantdifference,LSD).计数资 料用秩和检验.以上方法均应用SPSS7.5统计软件分析. 二,结果 1.第6腰椎,右侧胫骨近端骨密度结果(1). 2.右侧胫骨近端骨计量学结果,见表2. 3.子宫内膜的结果(图1,3). 子宫内膜观察结果显示,应用1713雌二醇干预组的子宫内 膜腺上皮有明显的增生及鳞化,而VOX组的腺上皮与SHAM 组比较有明显的萎缩且腺腔变大,子宫内膜萎缩. (图1,3见彩插第44页) 三,讨论 1.小剂量1713雌二醇用量的确定:按徐叔云等的, 本研究每日用于sD雌性大鼠的1713雌二醇的剂量换算成为 表1离体第6腰椎和右侧胫骨近端骨密度(g/cm)(?s) 注:括号中的数目为鼠数;与去卵巢组比较,'尸<0.05;与假手术组比较,尸<0.05 基金项目:国家九五攻关课题资助(96-906--05--05;96-906--05--01) 作者单位:410011长沙,中南大学附属湘雅二医院代谢内分泌研究所;第一作者现在广州中山大学附属第二医院(原 孙逸仙纪念医院)内分泌科510120 328?堡凼塑志20o3年8第19卷第4期ChinJEndocrinolMetab,August2003,Vol19,No.4 表2右侧胫骨近端骨计量学结果(?) 注:括号中的数目为鼠数;与去卵巢组比较,P<0.05;与假手术组比较,P<O.05 50kg体重的妇女用量,约为每日t713雌二醇0.1mg.一般认 为,用于预防和治疗绝经后骨质疏松的1713雌二醇成人剂量为 1,2mg/d.而通常所指的小剂量ERT为1713雌二醇的剂量约 为0.5md.另一方面,从大鼠子宫的重量的变化来看,ERT 组[(0.704?0.202)g]恰好位于OVX组[(0.197?0.047)g] 及SHAM组[(0.907?0.202)g]中间,且与OVX组与SHAM组 均差异有显着性(均P<0.05).而血中的雌二醇浓度,也位于 两者中间[分别为(16.0?13.0)ng/L,(9.8?8.5)ng/L和 (33.1?30.9)ng/L].这些数据说明本组应用的1713雌二醇的 剂量属于小剂量的ERT. 2.小剂量1713雌二醇的作用:从上述的数据及相关的分析 可以看出,小剂量1713雌二醇起到了预防和减少由于雌激素缺 乏导致的骨量丢失的作用.腰椎和胫骨近端等松质骨较多的 区域(DEXA敏感区),对于大多数时间点ERT组与SHAM组 相比均无差别,而较OVX组差异有显着性(P<0.05).从骨计 量学的静态指标来看,ERT组与SHAM组的无差别,而与OVX 组则差异存在显着性(P<0.05).一般静态指标的变化可了解 骨质疏松模型是否成功,各干预因素是否有效.如骨小梁面积 百分率在去卵巢组较对照组显着下降,而干预组较去卵巢组明 显升高(P<0.05),这说明:(1)成功地建立了去卵巢骨质疏松 模型;(2)该种干预对去卵巢所致大鼠骨质疏松有预防作用. 如该干预组的指标达到假手术组水平,说明此干预可以防止大 鼠去卵巢所致的骨量的丢失. ERT组与SHAM组比较,在手术后3周,6周,ERT组中衡 量骨质量的各项指标较SHAM组更敏感,而在9周,12周时,两 者的差别很小,而到了15周及以后,两者的差别又有扩大的趋 势,SHAM组较ERT组的骨质量较优,在绝经早期,应用小剂量 1713雌二醇的效果是肯定的,而随着时间的延长,这种效用逐 渐减弱. 从骨计量学的动态指标可以看到,对于OVX组,无论是荧 光标记百分率,骨矿化沉积率还是骨形成率实际上从第6周起 就明显地高于ERT组和SHAM组(P<0.05).一般去卵巢组 其荧光标记百分率,骨矿化沉积率和骨形成率都有不同程度的 增加,反映了表示由于去卵巢后雌激素水平下降,骨形成代偿 性增加,即去卵巢后出现骨的高转换状态.雌激素的抗骨质疏 松作用主要是通过其抑制骨吸收来实现的. 总之,由于去卵巢后雌激素水平下降,骨形成代偿性增加, 表现为成骨细胞数目增加,功能增强;同时骨吸收作用增强,破 骨细胞数目增加,功能增强.即去卵巢后出现骨形成和骨吸收 同时增加的一种骨高转化改变,由于骨吸收大于骨形成,最终 骨量丢失. 3.小剂量|713雌二醇对子宫的副作用:雌激素对子宫作用 是国内使用ERT患者依从性差的重要原因.而小剂量的1713 雌二醇从理论上讲对子宫的副作用较小.但从本实验的结果 来看,子宫内膜腺上皮的增生和鳞化仍较明显(图1,3). 在子宫内膜的各种细胞中,腺上皮雌激素受体最多,由于 长期的雌激素的持续刺激,使之不断的增生和鳞化而最终出现 上述的情况.因而,单独减少1713雌二醇的用量是不够的,还 需要有一个周期性的给药方式或加用孕激素治疗,以拮抗雌二 醇副作用. 参考文献 1AltkornD,VokesT.Treatmentofpostmenopausalosteoporosis.JAMA, 2001,285:1415-1418. 2AlexandersenP,RiisBJ,ChristiansenC.Monofluorophosphate combinedwithhormonereplacementtherapyinducesasyner~sticeffect onbonemassbydissociatingboneformationandresorptionin postmenopausalwomen:arandomizedstudy.JCllnEndocrinolMetab, 1999,84:3013-3020. 3伍贤平,廖二元,陆泽元,等.双能X线吸收法测定大鼠骨量的评 价及去卵巢骨丢失敏感区的选择.中华内分泌代谢杂志,2000,16: 212.215. 4徐叔云,卞如濂,陈修,主编.药理实验方法学(第二版).北京:人 民卫生出版社,1991.178—180. (收稿日期:2002-03—19)