SC_T7219.3-2015三代虫病诊断规程第3部分：鲢三代虫病.doc

SC_T7219.3-2015三代虫病诊断规程第3部分：鲢三代虫病.doc ICS 65.020.30 B 50 SC 中华人民共和国水产行业 SC/T 7219.3—2015 三代虫病诊断规程 第3部分:鲢三代虫病 Protocols for diagnosis of Gyrodactylosis— Part 3: Infection with Gyrodatylus hypophthalmichthysi 2015-02-09 发布 2015-05-01 实施 中华人民共和国农业部发布 前 言 SC/T 7219《三代虫病诊断规程》为系列标准: ——第1部分:大西洋鲑三代虫病; ——第2部分:鲩三代虫病; ——第3部分:鲢三代虫病; ——第4部分:中型三代虫病; ——第5部分:细锚三代虫病; ——第6部分:小林三代虫病; 本部分为SC/T 7219的第3部分。 本部分按照GB/T 1. 1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由 农业部渔业渔政管理局提出。 本部分由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC 156)归口。 本部分起草单位:中国科学院水生生物研究所、全国水产技术推广总站。 本部分主要起草人:李文祥、王桂堂、邹红、吴山功、陈爱平。 三代虫病诊断规程 第3部分:鲢三代虫病 1范围 本部分规定了鲢三代虫病的感染对象与临床症状,鲢三代虫/1沖〇灿汸 的采集与固定、形态 学鉴定的方法以及鲢三代虫病的判定。 本部分适用于鲢、鳙的鲢三代虫病的流行病学调查、诊断、监测和检疫。 2性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SC/T H03水生动物产地检疫采样 3试剂和材料 3.1乙醇:分析纯。 3.2甘油。 3.3饱和苦味酸铵:分析纯。 4仪器和设备 4.1解剖盘、剪刀、镊子、解剖针和手术刀。 4.2体视显微镜和带测微标尺的光学显微镜。 4.3盖玻片、载玻片和培养皿。 4.4电子天平。 4.5样品管。 5感染对象与临床症状 5.1感染对象 鲢三代虫能感染链(SJwer carp)和鳙(Arirffc/if/iw 等。 5.2临床症状 鲢三代虫主要寄生于体表,病鱼常出现蹭擦池壁、跃出水面的行为;有些病鱼反应迟钝,常在水流缓 慢 的地方出现,体表因黏液增多变成淡灰色,背鳍、尾鳍和胸鳍的边缘出现糜烂。 6三代虫采集及固定 6.1病鱼采集 仔细观察待检鱼类的临床症状和行为,搜取具有典型症状的鱼类。采样方法、样品数量、样品封存 和 运输应符合SC/T 7103的规定。 6.2三代虫样品的采集 6.2. 1现场采集 剪取鳍条、鳃丝或刮取部分体表黏液,置于载玻片上。滴加数滴清水,置于体视显微镜下观察。用 解剖针将三代虫从鳍条或鳃丝或体表黏液中分离,用吸管吸出,放在盛有清水的培养皿中,每尾病鱼至 少采集成虫10条。 6. 2. 2固定病鱼中的米集 剪取病鱼鳍条或鳃丝放在载玻片上,逐滴加人自来水浸泡1〇 min,置于体视显微镜下观察。发现三 代虫后,用解剖针将虫体分离,放在盛有清水的培养皿中;同时,镜检固定病鱼所用容器底部的沉淀物。 如发现有从鱼体脱落的三代虫,用吸管吸出,放在盛有清水的培养皿中。 6.3三代虫样品的固定与保存 加一滴清水到载玻片上,用吸管吸取一个虫体置于水滴中,轻轻地盖上盖玻片。用一张滤纸在盖玻 片边缘缓慢吸水,直到水基本吸干为止。加上一滴APG溶液(饱和苦味酸铵溶液与甘油等比例混合液) 到盖玻片边缘,直到浸满盖玻片与载玻片之间的空隙。 用于形态学鉴定的虫体样本可用70%酒精保存,用于PCR鉴定的虫体样品可用95%酒精保存。 7鲢三代虫的鉴定 鲢三代虫运动如尺蠖;虫体呈长叶形,体长〇. 2 mm~0. 5 mm,体前有2个头器,无黑色眼点;虫体 后端具几丁质的伞状后吸器,其上有1对锚钩、16个边缘小钩和1根腹联结片;锚钩基部较长,约为锚 钩全长的1/2,腹联结片上宽下窄,突起间长大于腹联结片长,可依此进行鉴定。 鲢三代虫后吸器的锚钩、边缘小钩和腹联结片的形态特征、测量部位及其大小见附录A。如果虫体 后吸器的形态特征和测量大小与附录A相符,则可判定为鲢三代虫。 8鲢三代虫病的判定 鲢、鳙感染鲢三代虫,且病鱼临床症状符合5. 2描述,则判定为鲢三代虫病。 附录A (规范性附录: 鲢三代虫后吸器的形态测量 A. 1鲢三代虫后吸器锚钩的测量部位及大小见图A. 1。 图A.1锚钩的测量部位及大小 A. 2鲢三代虫后吸器边缘小钩的测量部位及大小见图A. 2。 10 |xm ? ? ? 说明: a --- 全长(24_ 0 jum?26. 0 yn); c -----柄部长:19. 0 pm?20. 0 pm)。 b——镰部长:5. Oym?6. Q pm); 图A. 2边缘小钩的测量部位及大小 A. 3鲢三代虫后吸器腹联结片的测量部位及大小见图A. 3。 说明: e ------ 膜长::19. 0 /xm?25. 0 ^m); a------联结片长(16. 0 "m?19. 0 pm); f——中间总宽度:25. 0 pm?33. 0 pm); gb ------突起间长(18. 0 pm?21. 0 pm); ——基部总宽度(26. 0 ?35. 0 m)。 Mc------基部宽度:7, 0 jLtm?10. 0 pm); d——中间宽度(5. 7 pm?7. 6 pm); 图A. 3 腹联结片的测量部位及大小