祛风止痒酊对实验动物的抗过敏和止痒作用

祛风止痒酊对实验动物的抗过敏和止痒作用 祛风止痒酊对实验动物的抗过敏和止痒作 用 华 W 西 C 药 J 学 - 杂 P 志 S2O08.23(5):556,558 祛风止痒酊对实验动物的抗过敏和止痒作用 刘晋华,李玉萍,尤光甫 (解放军251医院,河北张家El075000) 摘要:目的研究祛风止痒酊的抗过敏与止痒作用.采用过敏与瘙痒模型,观察不同剂量祛风止痒酊对实验动物过 敏反应和全身与局部皮肤搔痒的影响.结果抗过敏试验显示,祛风止痒酊能不同程度地抑制抗血清诱发的大鼠同种被动 皮肤过敏和2,4一二硝基氯苯所致的小鼠迟发性超敏反应;大剂量时还可增加小鼠的胸腺指数及脾指数;止痒试验显示,祛风 止痒酊能明显降低右旋糖酐诱导的小鼠搔痒发作次数及搔痒持续时间,并能增加豚鼠耐受磷酸组胺的致痒阈.结论祛风 止痒酊具有良好的抗过敏,止痒作用. 关键词:祛风止痒酊;抗过敏;止痒 中图分类号:R96文献标识码:A文章编号:1006—0103(2008)05—0556—03 ExperimentalstudyofQufengZhiyangtinctureonanti——allergicandanti——prurituseffects LIUJin—hua,LIYu—ping,YOUGuang—flu (No.251HospitalofPL4,Zhangfiakou075000,China) Abstract:OBJECTIVETostudytheeffectsofQufengZhiyangtinctureonanti—allergicandanti—pruritus.METHODSThe effectsofanti——anaphylaxisandanti——pruritusonexperimentanimalsofQufengZhiyangtincture indifferentdoseswereobservedby hypersusceptib.1iyanditchingmodels.RESULTSInanti—anaphylaxisassay,QufengZhiyangtinctur ecouldinhibitthehomolo? gouspassivecutaneousanaphylaxisinratsbyantiserumanddelayed—typehypersensitivity(DTH)ofm iceinducedby2,4一dinitro- chlorobenzol(DNCB).HigherdosageofQufengZhiyangtincturecouldincreasetheindexesofthymusa ndspleenonDTHinmice.In anti—pruritusassay,QufengZhiyangtincturecoulddecreasescratchingfrequencyanddurationinduce dbydextranandincreaseitch— thresholdofcavycausedbyhistaminephosphate.CONCLUSIONQufengZhiyangtincturehasthesigni ficanteffectsofanti—anaphy— laxisandanti—pruritus. Keywords:QufengZhiyangtincture;Anti—allergic;Anti—pruritus CLCnmber:R96Documentcode:AArticleID:1006—0103(2008)05—0556—03 祛风止痒酊是由苍耳子,蛇床子,地肤子,黄柏, 苦参等加工而成的复方中药制剂,具清热解毒,祛风 止痒等功效,主要用于治疗神经性皮炎,湿疹,荨麻 疹,皮肤搔痒等症.现采用相应的动物模型和方法, 研究祛风止痒酊的抗过敏与止痒作用. 1实验部分 1.1试药,动物和仪器 祛风止痒酊(自制);赛庚定霜剂(常州第四制 药厂,批号:050703);右旋糖酐一4O(上海长征富民 药业有限公司,批号:0503163);2,4一二硝基氯代苯 (DNCB,北京化学试剂厂,批号:980317);磷酸组胺 (中国科学院上海生化所东风生化技术公司,批号: 9302044);伊文思蓝(中国医药公司北京采购供应 站进口分装,批号:891225).6,7周龄5SD大鼠 (合格证号:SCXK(京)2002—0003)体重150,200 g,6,7周龄昆明种小鼠(动物合格证号:SCXK(京) 2002—0011,6兼用,体重18,22g豚鼠,(动物 合格证号:SCXK(京)2002—0026,北京维通利华实 验动物技术有限公司)6兼用,体重250,300g. U一530型紫外可见分光光度计(日本Jasco). 1.2方法与结果 1.2.1祛风止痒酊的制备将苍耳子,蛇床子,地 肤子,黄柏,苦参,冰片等9味中药,除冰片的药味粉 碎成粗粉外,置渗滤容器中,65%乙醇渗滤3次,冰 片用适量乙醇溶解后与渗滤液混匀分装,制成含生 药2g?ml的祛风止痒酊,实验时用65%乙醇配成 不同浓度的试验用液. 1.2.2统计方法实验结果均以?s示,组间 差异采用t检验. 1.2.3对大鼠同种被动皮肤过敏反应的影响 50只同种6大鼠随机均分为空白对照组(蒸馏水), 祛风止痒酊各剂量组(10%,20%,30%),阳性对照 组(赛庚定霜剂).在抗原攻击前,连续3d将受试 药液或对照液均匀涂于大鼠双耳正反面,给药体积 为1ml?kg,.取体重90—100g5SD大鼠,天花粉 作者简介:刘晋华(1954一),女,河北任邱,主任药师,从事临床药学与药物分析工作. 第5期刘晋华,等.祛风止痒酊对实验动物的抗过敏和止痒作用557 以4%氢氧化铝凝胶配成5g?L混悬液,注射于大 鼠4个足跖,每侧0.1ml,于致敏后14d颈动脉取 血,3×10r?min,,4~C离心15min,分离血清,置 一 20?冰箱备用. 被动皮肤致敏及抗原攻击:大鼠乙醚麻醉后背 部中线两侧距脊柱1.5cm处剃毛,约2cmX2em, 以1:10稀释的抗血清背部皮内注射,每侧两点,间 隔1.5,2.0cm,每点0.1ml.48h后进行抗原攻 击,静脉注射天花粉10mg?kg,;用1%伊文思蓝溶 液配制成2mg?ml,,注射体积各为5m卜kg,,3O rain后脱颈处死大鼠,翻转背部皮肤,剪下带有蓝色 的皮肤,置入盛有8ml丙酮一生理盐水(7:3)试管 内浸泡48h,3X10r?min,,4?离心15min.取上 清液于610nm测定吸光度,计算抑制率.实验结果 显示,祛风止痒酊各剂量组均能明显抑制48h大鼠 同种被动皮肤过敏反应,与空白对照组比较有显着 性差异(P<0.O1,P<0.05),并呈一定的量效依赖 性关系. 表1祛风止痒酊对大鼠同种被动皮肤过敏的影响(i?.,l=10) Table1Effeet~ofQufengzlfiyangtinctureonhomologouspassive cutlln~usanaphylaxisinrats(?-,l=10) 与空白对照组比较:P<0.05,十{P<0.01 1.2.4对小鼠迟发型超敏反应的影响取昆明 种小鼠50只,随机均分为空白对照组(蒸馏水),祛 风止痒酊各剂量组(10%,20%,30%),阳性对照组 (赛庚定霜剂).于每只小鼠背部SC20l5% DNCB丙酮中性麻油溶液致敏,并将小鼠腹部去毛, 2cmx2cm,分别将受试药液或对照液均匀涂于剃 毛区,每日2次,连续7d,给药体积为1ml?kg... 末次给药1h后,以1%DNCB溶液均匀涂于小鼠右 耳,每只20l,激发过敏反应,左耳为对照.涂耳 24h后,脱颈椎处死小鼠,剪下双耳耳廓,以直径8 mm打孔器摘取左右耳片称重,以两侧耳重的差值 作为迟发型超敏反应值,计算肿胀度;摘取胸腺,脾 脏称重,以10g体重的胸腺和脾重量表示脾指数和 胸腺指数.结果显示,祛风止痒酊各剂量组均可抑 制DNCB所致小鼠的迟发性超敏反应,与空白对照 组比较有显着差异(P<0.01,P<0.05);祛风止痒 酊高剂量组还可增加胸腺和脾脏重量(P<0.01, P<0.05),提示其有免疫增强作用. 表2祛风止痒酊对小鼠迟发型超敏反应的影响(i?,,l=10J Table2EffectsofQut’engZlfiyangtinctureondelayedhypernsi- 廿vityreactioninmice(i?,Jl=10) 组别耳肿 mg 胀度/数/ 101.胸腺指数 mg?lgJ一 空白对照组一 祛风止痒酊l0 祛风止痒酊20 祛风止痒酊3O 赛庚定霜剂5 与空白对照组比较:}P<0.05,$P<O.01 1.2.5对磷酸组胺致痒作用的影响取豚鼠50 只,随机均分为空白对照组(蒸馏水),祛风止痒酊 各剂量组(10%,20%,30%),阳性对照组(赛庚定 霜剂).各组豚鼠右后足背部剃毛2cmx2cm,分 别将受试药液或对照液均匀涂于剃毛区,每Et2次, 连续2d,给药体积为1ml?kg,.给药第3天,用粗 砂纸分别擦伤剃毛处,以伤及表皮,有轻度渗血为 度.在伤口局部分别涂受试药液或对照液1次.涂 药10rain后,分别在每只豚鼠创面处滴0.05ml 0.01%磷酸组胺溶液,此后每隔3rain依次递减磷酸 组胺的浓度(0.0l%,0.02%,0.03%,0.04%…), 直至豚鼠出现回头口舔右足时,记录每只豚鼠所给 予组胺的总量.以此总量为致痒阈,并比较各组的 致痒阈.祛风止痒酊各剂量组均可不同程度地提高 豚鼠致痒阈,抑制由组胺引起的皮肤搔痒,与对照组 比较有显着性差异(P<0.0l,P<0.05). 表3祛风止痒酊对豚鼠磷酸组胺致痒反应的影响(i?s.=10) Table3EffectsofQtffengZidyangtinctureOilhistamine—phos. phateinduceditchingIlinea—pig(x?,=10) 与空白对照组比较:P<O.05,}P<0.01 1.2.6对右旋糖酐致痒作用的影响取昆明种 小鼠50只,随机均分为空白对照组(蒸馏水),祛风 止痒酊各剂量组(10%,20%,30%),阳性对照组 (赛庚定霜剂).各组小鼠右后足背部剃毛2cmx2 cm,分别将受试药液或对照液均匀涂于剃毛区,每 Et2次,连续3d,给药体积为1ml?kg,.末次给药 1h后,于各组小鼠尾静脉注射0.02%右旋糖酐5 m卜kg,,以小鼠前爪搔抓头部,后爪搔抓躯干,嘴咬 全身各部位作为搔痒指征,观察并记录30rain内小 鼠搔痒次数及搔痒持续总时间.祛风止痒酊各剂量 组均可明显减轻右旋糖酐所致小鼠的搔痒次数及搔 痒持续总时间,与对照组比较有显着性差异(P< ? l2O6965455 OOO0O 士???? 9ll5243637 33343 ? + 73l94223l2 OOOOO ???士士 60399 1l28O 33333 $ ++??:兮 ?土??士 卯??卯 32llO 华 W 西 C 药 J 学 . 杂 P 志 S20o8.23(5):558,560 0.01,P<0.05). 表4祛风止痒酊对小鼠右旋糖酐致痒反应的影响(x-t-s,n=10) Table4Effectsofqufengzhiyangtinctureondextraninduceditch inmice(X?s.n=10) 与空白对照组比较:P<0.05;,itP<0.01 2讨论 现代医学研究表明,神经性皮炎,湿疹,荨麻疹, 皮肤搔痒等皮肤病大多与变态反应,炎症及微循环 障碍等因素有关.I型变态反应(速发型过敏反 应)主要由IgE抗体介导.IgE的Fe端与肥大细胞 表面特异受体结合形成IgE复合物,可使肥大细胞 致敏.当抗原攻击时,抗原与肥大细胞脱颗粒,继而 释放组胺,慢反应物质等多种生物活性物质导致变 态反应发生.?型变态反应(迟发型超敏反应)则 由T细胞介导,抗原进入机体使T细胞致敏,当再 次接触抗原时,致敏T细胞分化增殖,释放各种淋 巴因子及直接杀伤靶细胞,约24h后,出现以单核 细胞浸润为主的局部炎症反应.文中实验表明,祛 风止痒酊不仅能显着抑制抗血清诱发的大鼠同种皮 肤速发型过敏反应,还能明显拮抗2,4一二硝基氯 苯导致的小鼠迟发型超敏反应,表明具有抗I型和 ?型变态反应的作用.大剂量祛风止痒酊还能增加 免疫器官的重量,提示可能具有免疫调节作用. 皮肤搔痒的发病机制目前尚不完全清楚,但研 究表明组胺是一种可引起皮肤搔痒的重要介质J. 文中实验表明,祛风止痒酊既可显着提高组胺引起 的皮肤搔痒豚鼠致痒阈,又可明显减轻右旋糖酐所 致小鼠的搔痒次数及搔痒持续总时间,显示其具有 良好的抗组胺止痒效果. 参考文献: [1]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生 出版社,2002.1407—1416. 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[5]张开明,王刚,尹国华,等.最新皮肤病学理论与实践[M].北 京:中国医学科技出版社,2000.16. 收稿日期:2007—06 栀子苷大鼠在体肠吸收动力学的研究 杜先华,牛欣,冯前进,杜红,李海燕 (1.北京中医药大学,北京100029;2.山西中医学院,山西太原030024) 摘要:目的研究栀子苷大鼠在体肠吸收动力学的特征.方法采用大鼠在体肠吸收模型,UV法 和HPLC法分别测定酚红 和栀子苷的含量.考察药物质量浓度,不同肠段对栀子苷吸收的影响.结果栀子苷20, 120g?ml对小肠吸收速率常数 无影响;十二指肠,空肠,回肠,结肠的胁值分别为0.0240,0.0251,0.0234,0.0239h,,各肠段的吸 收速率常数勋无显 着性差异.结论栀子苷在大鼠肠道的吸收呈一级动力学过程,为被动扩散.栀子苷具广泛的吸 收窗,可制成缓释制剂. 关键词:栀子苷;肠吸收动力学;紫外光谱法;高效液相色谱法 中图分类号:R96文献标识码:A文章编号:1006—0103(2008)05—0558—03 Studyonabsorptionkineticsofgeniposideinratintestines DUXian—hua,NIUXinh ,FENGQian—jin,DUHong,LIHai—yan (1.BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,China;2.ShanxiCollegeofChineseMedicine,Taiyuan030024,China) Abstract:OBJECTIVEToinvestigatetheabsorptionkineticsofgeniposideinratintestines.METHODSTheconcentrationsof phenolredandgeniposidebyinsituperfusioninratsweredeterminedbyUVandHPLC.respectively.Theeffectsofdrugconcentra. tionsandvariousintestinalsegmentsontheabsorptionhadbeenstudied.RESULTSTheconcentrationsof20—120恤g?ml一hadno 基金项目:国家”十五”攻关课题(2004BA721A46) 作者简介:杜先华(1969一),女,副教授,主要从事中药新制剂研 究.E—mail:dxhbeijing@163.corn 通讯作者(Correspondentauthor)