增敏荧光光谱法测定复方新诺明中的磺胺甲恶唑

增敏荧光光谱法测定复方新诺明中的磺胺甲恶唑 增敏荧光光谱法测定复方新诺明中的磺胺 甲恶唑 第19卷第6期分析试验室 2000年l1月ChineseJourna1ofAnalysisLaboratory Vo1.19No.6 2000一l1 . 增敏荧光光谱法测定复方新诺明中的磺胺甲唑 / , 亘堡春保,潘祖亭 (武汉大学化学与环境科学学院,武汉430072) 肿R宁7. 67j 摘要:提出了在溴化十六烷基三甲铵(cTAB)存在下,pH为40的HAc— NaAc缓冲溶液中,增敏荧光光谱法测定复方新诺明中磺胺甲口噩唑(SMz)含量 的新方法.磺胺甲嚆唑浓度在0.08,0.8#g/mL范围内,蔗光强度与磺胺甲口噩 唑浓度呈良好的线性关系,方法的检出限为0.016.ug/mL(6.32×10mol/L). ,方法已用于测定复方新诺明中磺胺甲唾唑的含量. 关键:茎查查兰兰墨耋,建壁.兰兰;,澳化十六烷基三甲铵乏中圈分类号:0657.32文献标识码:A文章编号:1000-0720(2000)06—0027—03 磺胺甲砥唑(Sulfamethoxazole,简写SMZ)是 磺胺类抗菌药物的一种,常与增效试剂甲氧苄氨嘧 啶TMP一同组成复方药剂,抗菌效果更佳.其测 定方法主要有电化学法],色谱法],分光光度 法:,荧光光度法等.AarsenioMunozdela pena等人曾利用It-CD/尿素增敏荧光法测定了 与TMP配合的复方药剂中SMZ的含量,并研究 了TMP的存在对SMZ荧光强度的影响,结果表 明:当SMz:TMP>2:1(m/m)时,TMP对 SMZ的含量测定均无影响.在复方新诺明中, SMZ;TMP一5:1(m/m),本研究表明TMP对 该法的测定无干扰,与文献报导相吻合.实验发现 表面活性剂CTAB对SMZ同样有良好的增敏效 果,荧光强度和sMz的浓度在0.08,0.8#g/mL 范围内呈良好的线性关系,可用于复方新诺明中 SMZ含量的测定. 1实验部分 1.1仪器及试剂 F一4000荧光分光光度计(日立公司),HA 180M电子分析天平(AND公司),pHS一2型酸度 计(上海第二分析仪器厂). SMZ溶液:准确称取10ragSMZ对照品 (中国药品生物制品检定所),以无水乙醇溶解,转 入100mL棕色容量瓶中定容,使用前用水稀释至 收稿日期:2000—01—03;恪订日期l2000—04—18 作者简介:罗兆福(1945一),女.副教授 10,ug/mL(3.95×10mol/L)的工作液;0.1 moi/LHAc—NaAc缓冲液(pH4.0),0.05g/mL CTAB溶液(O.137mol/L),其它所用试剂均为分 析纯.以上所用试剂,经检验无荧光杂质. 1.2实验方法 移取适量SMZ工作液(10,ug/mL)于25mL 容量瓶中,加2mLHAc—NaAc缓冲液,3mL CTAB溶液,加水稀释至刻度,混匀,于荧光分光 光度计上测定其相对荧光强度并绘制其激发和发 射光谱图.荧光激发和发射波长的狭缝宽度分别为 10nm和5nm;扫描速度为120nm/min. 2结果与讨论 2.1SMZ的激发和发射光谱 SMZ在不同条件时的荧光激发和发射光谱如 图1所示.由图可见,SMZ自身具有一定强度的荧 光,其最大激发和发射波长分别为261nm和346 nm,但加入一定量的CTAB后,荧光强度明显增 大,且最大发射波长转移至342nm,而最大激发波 长不变. 2.2介质的pH值对荧光强度的影响 介质的pH值是影响本体系荧光强度的重要 因素,实验结果如图2所示.结果表明,体系的pH ?6时,CTAB无明显增敏,甚至产生猝灭效应, pH?5时,荧光强度才有明显的增强,在pH3.8, 27 第19卷第6期分析试验室 2000年?月Chinese]ournalofAnalysisLaboratory V0I.19.No6 2000—11 4.7时,荧光强度最大,且变化很小,故本实验选择 加入2mL浓度为0.1tool/L的HAc—NaAc缓冲 溶液(pH4.O). 囝1SMZ的荧光激发和发射光谱 Fig.1.Excltmtionspectraandemtsslonspectraof$MZIn twokha出ofmedlure 1,——s一3.16×10一mol/L.CCJAB一0}2,——s? 一3.16×1Otool/L,一0.016tool/L 囝2体系酸度的影响 Fig.2.Eff~tofpHinme~um —— Ct’TAB一0F——f哪B=0.016mol/LaMz一3.16× 10一IlIO1/L 2.3CTAB用量的进择 在上述实验条件下,实验了0.05g/mL CTAB的用量对荧光强度的影响,结果表明,当 CTAB用量达3mL时(即CCTAB=0.016mol/L), 荧光值达最大,且荧光值至少在CCTAB=0.016, 0.082mol/L范围内基本稳定,为此,本实验选用 3mL. 2.4乙醇含量对荧光强度的影响 分别实验了有无CTAB存在时乙醇含量对体 系荧光强度的影响.结果表明,当体系中不含 CTAB时,乙醇对SMZ荧光有增敏效应,且荧光 强度随乙醇含量的增大而增大;而当体系中含有 CTAB时,乙醇含量的影响结果恰好与上述相反, 体系的荧光强度随乙醇含量的增加而减小.其机理 类同于乙醇对cD/尿素体系的影响机理口,由于 乙醇分子比SMZ易于进入胶束内芯,从而导致游 离的SMZ增多,荧光强度减小.故本实验直接采 用水稀释标准溶液为工作液,测其相对荧光强度. 2.5激发光照时间和自然放置时问的影响 研究表明,体系无CTAB时,sMz的荧光值 随激发光照时间而增大,而当体系中含CTAB时, 体系的荧光强度随激发光照时间增大而减小,故选 定的体系不宜经长时间紫外光照射后再读数.按实 验方法配制的溶液自然放置至少可在30rain内稳 定. 2.6工作曲线,检出限及精密度 在选定的实验条件下测定SMZ浓度和荧光 强度的关系,结果见表1,结果表明在0..8,0.8 ~g/mL浓度范围内,SMZ浓度与荧光强度呈良好 的线性关系,方法的检出限为0.016t~g/mL,即 6.32×10一mol/L,相对标准偏差为1.1. 表l工作曲线的数据一5)(gg/mL) TIh.1Resultsofcalibrationcurve 3样品测定 取复方新诺明片剂(SMZ400mg}TMP 80mg/粒)4粒(广卅『自云山制药厂),准确称量后 研细混匀,称取相当于10mgSMZ粉末,以无水乙 醇溶解并定容于100mL棕色容量瓶中,取适量上 层清液,用水稀释至约含SMZ10~g/mL,移取适 量此溶液,按上述实验方法测定,分析结果见表2. 经检验片剂中共存物对该法均无干扰,本法与 1990版中华人民共和国药典双波长分光光度法相 比较简易,快速且灵敏度高. 第19卷第6期 2000年11月 分析试验室 ChineseJournalofAnalysmLaboratory Vo1.19No.6 200011 表2样品的分析结果 Tab.1Detemtnationresultsofsamples 参考文献 [1]冯颖铎,汪瑷,王京苏.分析试验室,1997t16(6): 33 [2]杨惠荐,王志华,丁天惠.分析仪器,1998t(1):52 r3]HassouJ3~tMEM,AhalLett,1997,30(13){234l [4]IssaYM.AminAS,AnalLett,1994,27(6): l147 [5]~rzasNevadoJJ,LemusGallegoJM,CastanedaP G.Fresenius’JAhalCheratl992343:723 [6]庞志功,汪宝琪,赵俊杰,王娜.分析化学,1994, 22(4)363 [7]AarsenioMunozdelapena,FransiscoSalinas,Iasbel Duran—Meras,MariaDoloresMoreno.Ahallett, 1994.27(10):l893 DeterminationofSulfamethoxazolein SinominbyMicellarEnhancedspectrofluorimetry LUOZhao一}n,zHANG”yao,HUANGChun— baoandPA?Z”一ting’(CollegeofChemistryand EnvironmentScience,WuhanUniversity,Wuhan 430072),FenxiShiyanshi,2000,19(6):27,29 Abstract:InHAc—NaAc(pH4.0)mediumwith CTAB,anewmicellarenhancedspectrofluo— rimetrlcmethodfordeterminationofsulfamethox— azoleinsinominwasdeveloped.Thelinearrela— tlonshipbetweenfluorescenceintensityandcon— eentrationofsulfamethoxazoleiskeptintherange of0.08,0.8~,g/mL.Themethodwasappliedto determinationofsulfamethoxazoleinsinomin tabletswithsatisfactoryresults. Keywords:MieellarSpectrofluorimetry;Sinomin; bro— Sulfamethoxazole;Cetyltrimethylammonium— mide:PharmaceuticaIAnalysis 2g