仙竹降糖胶囊的药效学实验及其作用机制研究

仙竹降糖胶囊的药效学实验及其作用机制研究 仙竹降糖胶囊的药效学实验及其作用机制 研究 第9卷第5期 2003年l0月 中国实验方剂学杂志 ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae Vo1.9.No.5 0ct..2003 仙竹降糖胶囊的药效学实验及其作用机制研究 马替,高雪枝,朱爱华,张艺芳,杨钧 (1广州中医药大学,广东广州510405;2陕西中医学院,陕西成阳712083; 3陕西中药研究院,陕西西安712000) 摘要:仙竹降糖胶囊的药效学实验结果显示:口服仙竹降糖胶囊可明显降低肾上腺素性高血糖大鼠的血糖水平,明显降低 四氧嘧啶性糖尿病大鼠的血糖含量,MDA含量,提高SOD活力及胰岛素水平,降低甘油三酯和胆固醇含量.对正常小鼠的血 糖,糖耐量未见明显的影响.提示仙竹降糖胶囊对高血糖大鼠具有保护胰岛B细胞,抗脂质过氧化及调节机体代谢的作用,并 在此基础上从方药组成分析该方治疗糖尿病的作用机制. 关键词:仙竹降糖胶囊;药效学;糖尿病;作用机制 中图分类号:R285.5文献标识码:B文章编号:1005—9903(2003)05—0045—03 糖尿病(diabetesmellitus,DM)是由于胰岛素分 泌绝对或相对不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性 降低,引起糖,蛋白,脂肪,水和电解质等一系列代谢 紊乱的综合征.随着我国人群平均寿命的延长及生 活水平的提高,糖尿病患者总数也将以每年至少100 万数量增加,成为我国医疗卫生工作的防治重点…. 糖尿病病程长,目前尚无根治方法.对于长期口服 西药磺脲类和双胍类降糖药能否促使血管合并症的 发生和发展尚有一定的分歧,且长期服用易产生继 发性失效.而中医药治疗该病历史悠久,积累了丰 富的经验.仙竹降糖胶囊属中药复方制剂,起先以 中药煎剂用于临床,发现有明显降低血糖,缓解症状 的效果,又经过对处方的不断精减,修改,稳定,经浓 缩提纯而制成胶囊,之后观察数百例糖尿病患者,初 步统计总有效率96%,未发现任何不良反应,安全 可靠,疗效确切,故欲从药理学角度对其进行深入研 究,以期探究中医药治疗糖尿病的确切疗效及作用 机制.’ 1材料与方法 1.1受试药物仙竹降糖胶囊(由黄芪,仙灵脾,玉 竹,生地等组成),由陕西中医学院仙竹降糖课题组 提供,批号990812,每1g胶囊折合生药4.2g.临用 时按生药量用蒸馏水配成所需浓度的混悬液.阳性 对照药:参芪降糖胶囊(97)卫药准字Z一114号,中 国咸阳保健品厂生产,批号981003;优降糖:天津市 力生制药厂生产,批号9903004;降糖灵:山东省医药 收稿日期:2002-10-25 工业研究所制药厂生产,批号990204;盐酸肾上腺素 注射液:山西大同第二制药厂生产,批号980901. 1.2主要试剂四氧嘧啶(Alloan)美国Sigma化学 公司产品;血糖测定试剂盒,上海科华一东菱诊断用 品有限公司,批号990722;胆固醇测定试剂盒,北京 中生生物工程高技术公司,批号990811;甘油三酯测 定试剂盒,北京中生生物工程高技术公司,批号 990927;SOD测定试剂盒,南京建成生物工程研究 所,批号991014;MDA测定试剂盒,南京建成生物工 程研究所,批号990517;胰岛素放射免疫分析测定试 剂盒,北京北方生物技术研究所,批号991026. 1.3受试动物ICR种小白鼠,雌雄兼用,体重18 , 22g,动物合格证号:医动字第08—24号;SD种大 鼠,雌雄兼用,体重180,230g,动物合格证号:医动 字第08—25号,均由陕西省中医药研究院实验动物 中心提供.标准颗粒饲料喂养. 1.4实验仪器721型分光光度计,上海第三分析 仪器厂生产;FJ一20008Pr一放射免疫计数器,西安医 科大学第一附属医院内分泌实验室提供;930荧光光 度计,上海第三分析仪器厂生产. 2实验方法与结果 2.1对肾上腺素性高血糖大鼠血糖水平的影响 将健康大鼠60只,随机分为6组,分别为空白对 照组,仙竹降糖胶囊小,中,大剂量(0.17,0.5,1.5g/ kg)组,参芪降糖胶囊(0.5g/kg)组,降糖灵(0.075g/ kg)组,均按1ml/100g体重的体积灌胃,空白组给等 体积蒸馏水,每天一次,连续15d,末次给药前禁食不 禁水12h,末次给药后1.5h,各组均ip肾上腺素 ? 45? 第9卷第5期 2003年lO月 中国实验方剂学杂志 ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae Vo1.9.No.5 Oct..2003 0.5mg/kg,同时用葡萄糖溶液1g,剂量灌胃,加速 模型建成,分别测造模后1h,2h,3h的空腹血糖变 化.均剪尾采血,用葡萄糖氧化酶法测定血清血糖 含量.结果见1. 表1结果表明:仙竹降糖胶囊可使肾上腺素性 高血糖大鼠血糖水平降低. 2.2对四氧嘧啶性糖尿病大鼠血糖,血脂,SOD, MDA,胰岛素水平的影响选取健康大鼠70只, 禁食不禁水12h,ip四氧嘧啶160mg/kg后72h剪尾 采血测定血糖.将造模大鼠中血糖较高及较低的 30只剔除,选血糖水平接近的高血糖大鼠40只(血 糖值16,21mn~l/L).随机分为5组,每组8只.分 别为模型对照组,仙竹降糖胶囊小,中,大剂量 (0.17,0.5,1.5s/ks)组,降糖灵(0.o75s/kg)组,另取 健康大鼠8只作空白对照,灌胃给药方法同上.末 次给药前禁食不禁水12h,末次给药后1.5h剪尾采 血,葡萄糖氧化酶法测定大鼠血清血糖,GPO—PAP 法测定甘油三酯,CHOP—PAP法测定胆固醇,黄嘌 呤氧化酶法测定SOD,TBA法测定MDA含量,放射 免疫法测定胰岛素水平,结果见表2. 表2结果表明,经四氧嘧啶糖尿病大鼠造模后, 血糖升高,血清胰岛素水平下降,体内自由基生成增 多,MDA含量增加,SOD含量降低,甘油三酯,胆固 醇含量升高.仙竹降糖胶囊组能明显地抑制上述变 化,保护胰岛素分泌,降低MDA含量,提高SOD活 性,与模型组相比较有显着统计学意义,且其抗氧 化,降血糖,增加胰岛素分泌作用强于降血脂作用. 2.3对正常小鼠血糖的影响取小鼠60只,雌雄 各半,随机分为6组,每组10只.分别为正常对照 组,仙竹降糖胶囊小,中,大剂量组(0.2,0.6,1.8g/ kg),参芪降糖胶囊(0.6g/kg)组,优降糖(0.025g/ks) 组.正常对照组给于蒸馏水.各组均灌胃给药,容 量为0.1ml/10g,每天1次,连续15d.末次给药前禁 食不禁水12h,末次给药后1.5h,眼静脉丛采血,用 葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖含量.结果见 表3. 表3仙竹降糖胶囊对正常小鼠血糖影响(n=10;?s) 表1仙竹降糖胶囊对肾上腺素性高血糖大鼠水平的影响(n=10;?s) 注:组问进行t检验.与空白对照组比较P<0.05.一P<0.Ol. 表2仙竹降糖胶囊对四氯嘧啶型糖尿病大鼠血糖,血脂,SOD,MDA,胰岛素水平影响(n=8?s) 注:组问t检验,与模型对照组比较P<O.05,P<O.Ol;模型对照组 与空白对照组比较P<O.Ol. ? 46? 第9卷第5期 2003年l0月 中国实验方剂学杂志 ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae Vo1.9.No.5 Oct.,2003 表3结果表明:仙竹降糖胶囊对正常小鼠血糖 无明显的影响. 2.4对葡萄糖耐量的影响取健康小鼠60只, 分组同2.3.对照组灌服等容量蒸馏水.给药容量 均为0.2ml/10g,每天1次,连续15d.末次给药前禁 食不禁水12h,末次给药1.5h,各组均灌胃给于葡萄 糖2g/kg溶液,分别于0,0.5,1,2h测定血糖水平. 结果见表4. 由表4可见:仙竹降糖胶囊对葡萄糖耐量无明 显影响. 3讨论 3.1关于动物模型的选择本实验选四氧嘧啶性 和肾上腺素性两种高血糖动物模型.四氧嘧啶是胰 岛B细胞毒剂,通过产生超氧自由基而破坏B细胞, 使细胞内DNA损失,并激活多聚ADP核糖体合成酶 活性,从而使辅酶?含量下降,导致mRNA功能受 损,B细胞合成前胰岛素减少,致使胰岛素缺少,而 致高血糖.肾上腺素可促进肝脏和肌肉糖原分 解,促进糖异生,导致血糖升高H.两种动物模型分 别从不同途径致生高血糖,有利于从不同角度观察 仙竹降糖胶囊的疗效,以作机理分析. 3.2对胰岛B细胞的保护作用仙竹降糖胶囊,可 使四氧嘧啶性糖尿病大鼠血糖明显降低,胰岛素水 平升高,说明经该药治疗后胰岛B细胞已有一定程 度的修复或再生,并可进一步促进B细胞释放胰岛 素,使胰岛素维持正常水平.表2中降糖灵组胰岛 素水平与模型对照组无显着差异,说明该药不能促 进胰岛素分泌. 从以上实验结果来看,仙竹降糖胶囊无论对肾 上腺素性,还是四氧嘧啶性高血糖动物模型均具有 明显的降糖作用.而对正常小鼠,血糖及糖耐量水 平并无明显影响,而从其组方来看,主要是择黄芪以 入脾,仙灵脾以入肾,共为君药.其中黄芪为补气之 品,自古便为治疗消渴之良药,早在《名医别录》便有 “止渴”的记载,现代药理研究显示,黄芪能增强机体 免疫功能.仙灵脾温肾助阳,既可助脾以化气,又振 奋肾中元气,促进机体代谢.有人认为”阳虚”对体 液免疫有刺激作用,可使免疫功能低下的小鼠脾脏 淋巴细胞数目增加J.此二药分别从先后天着手, 培补正气,均可增强免疫机能.同时,方中佐以生 地,玉竹之甘寒柔弱以养阴增液,既可与仙灵脾共同 调节机体阴阳之消长,又可辅助君药共奏增强机体 免疫力之功.从而提高机体抗病恢复能力,体现了 中医治疗疾病从整体机能调节的优势所在. 参考文献: [1]史轶蘩.协和内分泌和代谢学[J].北京:科学出版社, 1999.1304. [2]宋丽晶.三消治治疗糖尿病的药理研究[J].中成药, 1993,15(4):29. [3]陈卫辉.麦冬多糖对正常和实验性糖尿病小鼠血糖的 影响[J].中国现代应用药学杂志,1998,l5(14):21. [4]陈奇.中药药理研究方法[M].北京:人民卫生出版社, 1993.815. [5]陈灏珠.内科学[M].第四版.北京:人民卫生出版社, l99l6.176. [6]李广勋.中药药理毒理与临床[M].天津:天津科技翻译 出版社,1992.100. ? 47?