妇康凝胶的研究

妇康凝胶的研究 提 要 目的:制备用于治疗女性宫颈炎、阴道炎的中药复方制剂“妇康凝胶”，对其制备工艺、质量、初步稳定性和药效学、毒理学进行了考察研究。方法:采用正交试验法，以苦参碱和总生物碱得量为指标考察苦参的提取工艺和精制工艺;以挥发油得量为指标考察了莪术、苍术的提取工艺;以产品的成型性、细腻性、稳定性为指标考察了凝胶的成型工艺。采用薄层色谱法对方中药物进行了定性鉴别，采用高效液相色谱法对君药苦参中的苦参碱进行了含量测定，制定了质量标准。考察了制荆的初步稳定性。进行了药效学和毒理学豹研究。结果:苦参以水提酵沉并过,型阳离子交换树脂柱法精制后入药;莪术、苍术在药效学筛选的基础上，确定以二者的挥发油入药;冰片以乙醇溶解后入药。实验优选了以羟丙甲纤维素为凝胶基质，以甘油润涨法制备凝胶，甘油的用量为,,,，吐温(,,的用量为,(,,。质量标准研究中所建立的方法可准确的进行定性、定量检测。药效学与毒理学实验明该制剂具有明显的抗炎、止瘁作用，对阴道黏膜和皮肤无刺激性和致敏性。结论:“妇康凝胶”为较理想的治疗女性生殖系统炎症的中药制剂。样品细腻、均匀、 妇康凝胶;羟丙甲纤维素:凝胶剂;苦参碱;高效液相不油腻，质量可控。关键词 色谱法 妻盼者、粤师同? 艇龟,文公褒…一 ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,，,,,;,,) ,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,,;, ,， ,,,:,,,,,,,,,,， ,,, ,,,, ,,,,,;,,,,,,,,,:,,, ,,,,,,,,,:,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,;, ,,,,,;,:,, ,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ;,,, ,,, ,,,,,,,, ,,,,,?, ,,,,,,,, , ,,, ;,,,,, ,,,,, ,,,,,,,, ,(,,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,;,,,(,,,,,;,,,, ,,,;,,,，？,, ,,, ,,,,,,,,,，,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,;,,,,,,,;,，,,,, ;,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,( ,,,,,,,:,,, ,,,,,;,,,, ,,, ,,,,,,;,,,,, ;,,,, ,,,, ,, ,,,, ;,,,,,,,,,, ,,,,,,;,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,百,,, ,,, ,,,,;, ,,,,, ,,,,,,,,;,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,:,,, ,,,,,;,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,;,,,,,,, ,,,,,,, ;,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,, ,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,(,,, ,,,,,,,,,,, ,,,;,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,、,,,,,, ？,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,(,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,。,,, ,,, ;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,, ,,,,，,,, ,,,,,, , ,,,, ,,, ？,,〕, ,, ,,,,,,,,,，,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,, ,,,,, ,, ,,, ,,,,,, ;,,,,,,, ;, ,,,,,,,;,,,,, ,,,, ;,,,,,, ,,,( ,,,,,,,:,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,;,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,;,,,,，,,,, ,,,, ,,, ;,,,,, ,,;,,,,, ,,,,,(,,,,,,,,;,,,, ,, ,,, ,,,, ,,,,;,,,,,,, ,,, ,,,, ;,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,, ,, ,,, ,,,,,,;,,,,,,,;, ,, ,,, ,,, ,,, ;,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,, ,, , ,,,, ,,, ,,,，,,,,,, ;,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,;,,,, ,,, ,,,, ,,,, ,,,, ,,, ,,,(,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,;,，,,,, ,,, ,,,,,, ,,, ,, ,,;,,,,,,，,,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,, ,,,,, ,,,,,, ,, ,,,;,,,, ,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,(,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,，,,,,,,,,,,,,, ,,, ,(,,(,,, ,,,,,, ,, ,,, ？,,,,,, ,,,,,,,,,,,,, ,;;,,,,, ,,, ;,,,, ,, ,,,, ,,, ,,, ？,,,,,, ;,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,(,,, ,,,,,,, ,, ,,,, ,,,, ;,,,,,,,,, ;,,,, ,,;,,,,,,,;, ,,, ,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,,;, ,, ,,,,,,,,,, ,,,; 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尚含有多种黄酮类成分如苦参酮、去甲苦参酮、苦参啶醇、芒柄花素、高丽槐素 (,,,;,,,,,)、,一甲氧基高丽槐素(,,,,,,,,,(,,,;,,,,,)、三叶豆紫檀苷 , 山东中医药失学,,,,届硕士擎位论文 (,,,,,,,,,,,,,)、降脱水淫羊蓉素(,,,,,,,,,,,,;,,,,,,)、异苦参酮 (,,,,,,,,,,,,,)、槐属二氢黄酮,(,,,,,,,,,,,,,,,,)、降苦参酮(,,,—,,,,,,,,,,)和芒柄花素等。 现代药理研究表明，苦参中的生物碱具有抗炎、抗病原微生物、抗肿瘤的作用，在临床应用中苦参具有清热燥湿、杀虫、利尿的功效，为治疗妇科生殖系统疾病如宫颈炎、阴道炎的常用中药。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第,,,页嗖我?南钕碌母飨罟娑ā?莪术“?:本品为姜科植物蓬莪术,,,;,,, ,,,,,;,,,,, ,,,(的干燥根茎。冬季茎叶枯萎后采挖，洗净，蒸或煮至透心，晒干或低温干燥后除去须根及杂质。本品主产于四川、福建、广东等省。本品主要含有挥发油类成分，目前已从中分离出,,多种成分，如,一蒎烯(,—,,,,,,)、,一蒎烯(,,一,,,,,,)、莪术醇 (;,,;,,,,)、异莪术醇(,,,;,,,,,,,,,)等。 近年来研究发现。莪术挥发油具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、(抗炎、抗早孕、降酶等功用。临床应用中具有行气破血，消积止痛之功效，可用于治疗早期宫颈癌。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第,,,页莪术药材项下的各项规定。 苍术“,:为菊科植物茅苍术,,,,;,,,,,,, ,,,;,,(,,,,,(),,的干燥根茎。茅苍术主产于江苏、湖北、河南等地。苍术主含挥发油类成分，茅苍术主成分为苍术醇 (,,,,;,、，,,,)、 茅术酵(,,,,,,,)，还含有苍术酮的衍生物等。 现代药理研究表明，苍术有抗溃疡作用，另外苍术还具有利尿效果，临床在治疗女性生殖系统疾病中有较多的应用。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第,,,页苍术药材项下的各项规定。 冰片“,:为龙脑香科植物龙脑香树脂的加工品，或用樟脑、松节油等方法合成 的加工制成品。合成冰片主要含有龙脑(,,,,,,,),,(,,,,,,(,,,，异龙脑 (,,,,,,,,,),,(,,,,,,(,,,，樟脑(;,,,,,,),(,,,,,(,,,。 现代药理研究表明，冰片具有抑菌和抗炎作用，在临床应用中具有开窍醒神、 清热止痛的功效，在妇科宫颈炎及阴道炎的治疗中，本品应用较广。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第“,页冰片项下的各项规定。 , 妇康凝肮的研宄 妇康凝胶的研究 ，中医对病因病机的论述 国家中医局——?文献查阅,药物的药理、成分、性质研究——?确定局部腔道 课题立项 ,临床需求调查 给药途径 ,苦参:优选水提、醇沉、过离子柱精制工艺 , ，提取工艺,莪术、苍术:优选双提法工艺，以药效指标 ， ，? ， 筛 —,?制备工艺研究弋 ,基质优选:亮聚糖(稳选确定以挥发油入药，水液弃去 ， 定性差)一含壳聚糖的混合基质 , , , , (成型性差)一水溶性壳聚糖(稳定性差)一其 , ， ?成型工艺, 他基质考察(确定以羟丙甲纤维素为基质) , ，附加剂优选:确定吐湿一,,等辅料种类及其用量 , ,凝胶成型;确定凝胶的成型工艺路线 —?确定凝胶的制各工艺，进行中试生产，提供质量标准及药理研究样 —?质量标准研究:原料及制剂质量标准草案的制定。采用薄层色谱法鉴别苦品 , 参、莪 术、苍术、冰片;进行凝胶剂检查项目考察:采用高效液相色谱 法测定苦参碱的含量(制定含量限度。 。。?初步稳定性研究:采用室温留样法考察制剂的初步稳定性(连续考察三个月) ,,?药效学、毒理学:进行制剂的药效学、毒理学实验研究(尚未完成，有待完善) 山东中医药大擘,,,,届硕士学位论文 妇康凝胶的制备工艺研究,(实验材料,(,仪器 ,,,,,,,薄层扫描仪(日本岛律); ,;一,,,,,型离效液相色谱仪 (日本岛津);,,,,,,(,自动平衡微量离心机(北京医用离心机厂);多功能提取罐(武汉制药机械设备公司);,,一,,,,型分光光度计(日本岛津)。,(,材料与试药苦参、莪术、苍术、冰片购自济南建联中药店。经山东中医药大学中药鉴定教研室周风琴教授鉴定: 苦参;为豆科植物苦参,,,,,,, ,,,,,,;,,, ,,,(的干燥根; 莪术:为姜科植物蓬莪术,,,;,,, ,,,;,;,,,,, ,,,(的干燥根茎: 苍术:为菊科植物茅苍术,,,,;,,,,,;, ,,,;,,(,,,,,(),,的干燥根茎; 冰片:为合成龙脑，形状为白色半透明的片状结晶; 上述各药材均符合《中国药典》,,,,年版一部各药材项下的有关规定。 苦参碱对照品;购自中国药品生物制品检定所， 批号:,,,,,,—,,,,,,，供含量测定用。 壳聚糖购自江苏启东甲壳素厂。 羧甲基纤维素钠购自上海赛璐珞厂，中国医药集团上海化学试剂厂。 羟丙甲纤维素 粘度,,,,,,,,,,,,,,?,，购自山东聊城阿华制药有限公司。 卡波姆购自上海市康成实业公司。 甘油购自中国医药集团上海化学试剂厂。 吐温,,,,购自中国医药集团上海化学试剂厂。 试药: ,,,型强酸性阳离子交换树脂(购自山东鲁抗医药集团);实验中所用化学试剂均为纯。,( 妇康凝胶的制备工艺研究 〔处方〕 苦参,,,,, 莪术,,,, 苍术,,,, 冰片,,,,(,剂型选择 目 前，在治疗女性阴道炎症方面临床多采用外治法，应用中药局部给药治疗。外用制剂是指经皮肤或粘膜给药而起全身治疗作用的制荆，它使用方便，不经肝脏 , 妇康凝胶的研究首过作用和胃肠道破坏，可更好的提高生物利用度，降低药物毒副作用，还具有给药剂量易调节及可避免产生耐药性等优点。 目前常用的制荆剂型有洗液、栓剂和泡腾片剂等，但各种剂型均存在一定不足之处。应用中药凝胶剂既可保持以上各剂型的优点，同时本身还具备分散面积大、药物容易进入到宫颈部位、并可缓慢释药、保持平稳的血药浓度的优点，为阴道用制剂较理想的剂型。因此本研究选择了中药凝胶剂这种剂型。,(,药材标准及规格, 为保证制剂疗效，应选用合格药材及适宜的饮片规格，对方中药材的质量研究如下: 苦参„”本品为豆科植物苦参,,,,,,, ,,,,,,;,,, ,,,，的干燥根。春、秋二季采挖，除去根头及小支根，洗净，干燥，或趁鲜切片，干燥。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第,,,页苦参药材项下的各项规定。 莪术”?本品为姜科植物蓬莪术,,,,,,, ,,,,,;,,,,, ,,,(的干燥根茎。冬季茎叶枯萎后采挖，洗净，蒸或煮至透心，晒干或低温干燥后除去须根及杂质。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第,,,页莪术药材项下的各项规定。 苍术嘲本品为菊科植物茅苍术,,,,;,,,,,,, ,,,;,,(,,,,,(),,的干燥根茎。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第,,,页苍术药材项下的各项规定。 冰片旧本品为无色透明或白色半透明的片状松脆结晶。 本品应符合《中国药典》,,,,年版一部第,,,页冰片项下的各项规定。,(,提取工艺研究,(,(,，艺路线的确定: 本方治疗病症为女性宫颈炎、阴道炎，经文献查阅，方中苦参的主要活性成分为以苦参碱为代表的生物碱类，具有清热燥湿，杀虫，利尿的功效，临床制剂中多用于治疗女性阴道炎及宫颈炎等。苦参中的生物碱都为喹喏里西啶类衍生物，碱性较强，且为水溶性成分，因此苦参的提取多采用水煎煮法;莪术、苍术中主要含有挥发油类成分，也为本制剂的主要有效成分;冰片为临床妇 科外用制剂中的常用药物，具有清热止痛的功效。,。 根据以上研究，可知方中主要药物的活性成分比较明确，为了筛选合理的提取 工艺，根据活性成分的理化性质，结合活性成分提取效果和各不同提取方法的药效 学试验来确定最佳的提取工艺路线。另外，凝胶剂药物用量较少，因此应对提取物 山东中医药大学,,,,届硕士擘位论文进行适当的精制，以利于制剂的成型和稳定。,(,(,,,艺路线设计: 根据上述分析，苦参与莪术、苍术中所含活性成分性质有较大的差异，因此适合于分别提取;而冰片一般不孵要提取，可直接入药。,(,(,苦参提取工艺研究:苦参中主要含有生物碱类成分，现代药理研究表明，苦参生物碱具有抗炎、抗肿瘤及抗病原微生物的作用，在本制剂中，苦参总生物碱为主要有效成分，临床用于治疗富颈炎、盆腔炎、阴道炎等“,。因此，以苦参碱及总生物碱提取率为指标进行工艺优选。为了便于制剂，拟将苦参制各成苦参总生物碱提取物入药，实验研究如下:,(,(,。,提取方法的优选:根据苦参生物碱的理化性质，其提取方法有水煎煮法、中高浓度乙醇回流提取法等“,。首先对上述两种方法的提取效果进行了考察，实验如下: 实验,:取苦参药材,,,,，置于,,,,,,圆底烧瓶中，加,倍量水，煎煮提取,次，每次,(,小时，滤过，合并滤液，备用; 实验,:取苦参药材,,,,，共取三份，分别置于,,,,,,圆底烧瓶中，各加,倍量,,,的乙醇、,,,的乙醇、,,,的乙醇，回流提取,次。每次,(,,，时，滤过， 合并滤液，各用。,(,(,(,苦参碱及总生物碱含量测定方法的确定: 苦参碱的含量测定方法:参考《中国药典》,,,,年版一部,,,页苦参药材项下的含量测定方法，采用薄层扫描法测定其中苦参碱的含量，方法如下: 对照品溶液的制备:称取已干燥至恒重的苦参碱对照品，加无水乙醇制成每,,,含,(,,,的溶液，作为对照品溶液.