论文：土沉香无性繁殖试验初报

:土沉香无性繁殖试验初报 摘要:在土沉香天然分布区之一的云南省普洱市西盟县 进行了这一珍贵树种的扦插和嫁接繁殖试验.试验结果表明, 土沉香属于扦插难生根树种,愈伤组织生根类型,在试验设 计的几个处理中，生根率最高的是abt 2 号 100 mg/l 处理 的半木质化插条，生根率达22%，其次是 naa 100 mg/ l处 理的半木质化插条和 abt 2 号100 mg/l 处理的1 a生木质 化插条，生根率均为12%，插穗假活时间长达30~40 d，生 根所需时间约50~90 d,采用半木质化接穗在夏季进行切接， 30 d左右成活，嫁接成活率达52%. ;无性繁殖;扦插繁殖;嫁接繁殖;生根 率;成活率 s792;s723.132 experiment on asexual propagation of aguilaria sinensis niu huan-qiong lu xue-xiang wang ya-li liu fang 1 (1.yunnan forestry vocational technology college, kunming 650224, china; 2. forest bureau of ximeng, ximeng 665700, yunnan, china) abstract: the experiment was focused on asexual propagation of aquilaria sinensis in ximeng county, yunnan, one natural distribution area of this rare species, including cutting and grafting. the results showed that the rooting ability of aquilaria sinensis was weak after cutting, and it belongs to the type of callus, the rooting rate about cutting of semi-lignified branches with abt #2 100 mg/l treatment was the highest at 22%, followed by the cutting of semi-lignified branches with naa 100 mg/l treatment and cutting of lignified branches with abt #2 100 mg/l treatment, both were 12%, the false living time was as long as 30 to 40 days, it needed 50 to 90 days to rooting, but in spite of some shortages, the grafting survival rate of semi-lignified branches in summer was 52%, with about 30 days to healing. key words: aquilaria sinensis; asexual propagation; cutting propagation; grafting propagation; rooting rate; survival rate 土沉香为瑞香科植物白木香aguilaria sinensis (lour) gilg的含有树脂的心材.主产海南、广西，福建等省 区，云南西双版纳和思茅地区有野生资源分布,1,.沉香是 由于树干损伤后被真菌侵入寄生，在菌体内酶的作用下，使木薄壁细胞贮存的淀粉产生一系列变化，形成的香脂经多年沉积而得.沉香是一种珍贵的高级香料，名贵中药材，随着国际市场需求量的增大，其价格不断攀升，上等沉香每公斤价格高达数万元，市场供不应求,2,5,.由此带来的过度伐木采香，使得土沉香资源濒临灭绝，沉香树已被国家列入二类保护物种，国际粮农组织已将8个沉香属植物列入世界濒危植物,4,. 县位于云南省思茅市西南部，地处东经99?18′,99?43′、北纬22?25′,22?57′.总面积 1 353.57 km2.新县城位于勐梭镇优美的勐梭龙潭南段.全县除勐梭镇有一块200余 hm2的河谷川坝外，其余均为山区.境内山峦叠嶂，沟壑纵横，最高海拔2 458.9 m，最低海拔590 m.受孟 加拉湾西南暖湿气流影响，属亚热带海洋性季风气候，立体气候明显，降水量丰富，年均降水量2 758.3 mm，居云南省之首，其中夏秋季节降水量占全年的90.1,.年均气温15.3?，无霜期319 d.年均日照2 204.7 h，风速年均2.5 m,s.西盟县优越的自然条件非常适合土沉香的生长，在海拔590~1 400 m范围内均有天然零星分布.但近年来境外不法分子(主要是越南人)的偷砍盗伐非常猖獗，大量 野生植株已被破坏. 子繁殖较容易.但因为破坏严重，大树已很难见到，种子难以获得，这严重制约了土沉香的人工规模化栽培.研究无性繁殖技术，利用扦插、嫁接等无性繁殖苗木可在短期内(2~3 a)就结实的特性，建立采种母树林，逐渐缓解人工栽培对种苗的需求，促进人工栽培及其利用，并保护野生资源，这已成为当务之急.据所查文献，对土沉香的播种,3,6,和组培繁殖技术研究已有报道，且成苗率都比较高,7-8,，关于扦插的研究最近有一篇论文,10,，但对嫁接、压条的研究未见报道. 1试验与 考虑到气候环境等多方面因素的影响，试验地点设在土沉香的天然分布地之一的西盟县林业局苗圃.该苗圃位于西盟县新县城，海拔1 155 m，地形平坦.经土壤取样测定，土沉香原生地和苗圃地的ph分别为5.3和5.1,有机质含量分别为3.0%和2.8%,速效n含量分别为5 mg/kg和10 mg/kg,质地均为沙壤土.实验项目包括枝插、根插、嫁接和压条. 1.1扦插繁殖试验 2007年3月、8月和12月进行了3次扦插试 验，后两次试验设计是在分析第一次试验结果的基础上，选用了不同生根剂种类和浓度.具体扦插试验设计如表1~表2所示. 1)采条:采集伐桩基部生长健壮、芽饱满的当年生半木质化枝条.采回后及时制穗. 2)枝条处理:选择发育健壮，粗1 cm左右的枝段，截成长10~15 cm带3~4个芽的插穗，下切口要紧贴芽的位置.插条用高锰酸钾0.5%溶液消毒10 min，然后生根粉溶液浸泡1 h后扦插. 3)土壤消毒:用代森锌水溶液2 g/m2消毒. 4)管理:注意温度、湿度和光照，遮荫80%左右. 5)观察:对萌芽时间、愈伤组织形成情况、生根情况进行观察. 1.2嫁接繁殖试验设计 3所示. 1)砧木:用2~3 a生的实生移植苗. 2)接穗:取自10 a左右生的母树树冠中下部外围的当年生、1~2 a生，芽饱满的枝条，带3~4个芽做接穗. 3)嫁接:采用常规劈接或切接法，接穗削面长2.5~3 cm,嫁接后用塑料薄膜封住接穗顶端切口，以防水分渗入和病菌感染. 4)管理:用遮荫网遮荫，注意水分、杂草、光照等管理. 1.3根插繁殖试验 条，伐桩附近能见到天然下种更新的小苗，但在树根分布范围内即使被挖掘过的疏松地块，都未见到有萌蘖苗.因资源被大量偷盗，很难见到大苗和大树，即使偶尔找到1~2株稍大些的树，也是在悬崖峭壁人力难及的地方，无法进行压条实验.但从野外采到部分1~2cm粗的根段，在苗圃地根插20株进行试验. 2 2.1扦插繁殖试验 3次扦插试验结果见表4.对扦插结果进行单因素方差分析以验证不同处理对扦插成活率的影响，结果表明差异极其显著(表5). 2.1.1扦插时间对生根率的影响 从表4可以看出，该试验总体生根率很低,但夏季半木质化扦插的成活率(最高达22%)依然高于12月木质化枝条的成活率(最高达12%),最低的是春季3月的木质化枝条扦插, 仅有经naa200 mg/kg处理成活的4株，生根率为4%. ,夏季的半木质化枝条因为生活力强,扦插生根需要时间较木质化枝条所需时间短,生根率也较高.但12月木质化枝条的成活率较春季3月高,可能与当地水热条件好,没有冬季,沉香木冬季也不休眠有关.而3月份扦插时,部分枝条上的芽已开始萌发,扦插时间偏晚,影响了生根. 2.1.2生根药剂对生根率的影响 4可以看出,2007年3月初进行第一次扦插试验时使用了国光naa、naa和iba 3种生根剂，最后仅有naa200 mg/kg处理成活了4株.因此，在当年8月和12月的扦插中，改用了naa、abt 1号、abt 2号3种生根剂，结果表现出abt 2号和naa处理有一定的生根率,而abt 1号各处理未见生根成活株. 2.1.3药剂浓度对生根率的影响 8月和12月的2次扦插中选用了naa、abt 1号、abt 2号3种生根剂，设计了100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg 3种浓度，扦插基质全部使用苗圃土壤、沙和珍珠岩的混合物(大约各占30%).试验结果表明,abt 2号和naa 2种药剂都是 100 mg/kg浓度 处理较200 mg/kg浓度处理效果好,300 mg/kg浓度处理未见生根株,最好的是abt 2 号100 mg/kg浓度处理,在8月和12月的扦插成活率分别为22%和12%,其次是naa 100 mg/kg浓度处理,在8月和12月的扦插成活率分别为12%和8%;abt 2号200 mg/kg浓度处理2次生根率分别为10%和6%;naa 200 mg/kg浓度处理2次生根率都为4%. 2.1.4生根过程 .半木质化枝条扦插后7 d(木质化枝条扦插半个月)左右可见到芽萌动,但实际上是“假活”,一直到插后30~60 d左右新梢长达2~5 cm时，因枝条营养消耗完,叶片开始枯萎脱落,拔起插条可看到入土部分韧皮部变黑腐烂，切口未见愈伤组织.此时部分未死亡的插条开始在切口韧皮部形成愈伤组织,并逐渐分化出根系而成活. 很低.沉香木扦插假活时间长，大约插后60 d以后才开始形成愈伤组织，80 d以后才开始形成根系,使扦插成活.假活时间长，可能与其木质疏松，韧皮部纤维长,水分容易输送且当地湿度大有关.而低浓度处理较高浓度处理生根率高，愈伤组织形成时间长且较困难，与哪些生理特性有关还待做进一步研究. 2.2嫁接繁殖试验 ,易拉裂，因此只进行了对大多数树种都适宜的切接法和劈接法嫁接试验，未进行芽接试验.试验结果如表6所示. 在2007年8月、2008年3月和2008年7月进行了3次嫁接试验.砧木是从山上挖掘的1~2 a生天然更新实生小苗，在苗圃地移栽成活后再嫁接.2008年3月的嫁接试验用的是劈接法.夏季用的是半木质化枝条切接，切口削面长2~2.5 cm，不过髓心，短削面长1cm，过髓心.在2007年8月的嫁接试验中，j3(半木质化的接穗)接芽10 d左右萌动，但因未对接穗顶端进行包裹处理，也未对苗床进行遮荫，以致雨水随接穗顶端渗入枝条，枝条从上至下逐渐变黑而死亡，成活率仅12%.而采用的1 a生和2 a生枝条接穗大约都在嫁接后的7~15 d逐渐干枯死亡，仅1 a生枝条接穗有4%的成活率. 2008年3月，因砧木数量有限，只进行了劈接试验，成活率为20%. 2008年7月的嫁接试验中，吸取了前次试验的经验，对接穗顶端用薄膜进行封口包扎，以防止雨水从接穗顶端渗入枝条，并对苗床进行遮荫以减少蒸发.结果表明，1 a生、2 a生和当年生枝条接穗成活率分别为12%、0%和52%. 1 a生木质化枝条嫁接后20 d左右，未干枯的接穗 开始萌芽，50 d 左右，愈伤组织形成，新梢长2 cm左右，嫁接成活.半木质化接穗夏季嫁接后10多天开始萌芽，1个月左右成活.而春季3月枝接的成活仅有20%，这可能与嫁接时间较晚有关.因此，对当地最适宜的嫁接时间还有待进一步探索. 3结论与讨论 3.1扦插繁殖试验 1)土沉香属于扦插难生根树种.在所进行的3次试验中使用了abt 1号、abt 2号、国光naa、naa几种生根试剂,表现最好的是abt 2号生根粉100 mg/kg 浓度处理,成活率也仅为22%,其次是naa100 mg/kg浓度处理，成活率为12%;200 mg/kg浓度的abt 2号生根粉处理成活率为10%; 2)在夏季7~8月扦插比春季3月扦插成活率高,但总体成活率仍比较低. 3)采用半木质化枝条扦插后，插穗“假活”时间长达50~70 d，部分新梢长达2~5 cm时叶片才开始枯萎脱落,枝条逐渐干枯死亡.而此时若插条开始在切口韧皮部形成愈伤组织,就能逐渐分化出根系，扦插成活.土沉香属愈伤组织生根类型，生根时间长达60~90 d， 4)影响植物扦插生根的因素有树种的特性、母树的年 龄和插条的生长状况、环境因素等.在本次试验中，插条采自野外伐桩基部的萌条，母树年龄15~20 a，可能母树年龄较大是生根率比较低的原因之一;植物生长调节剂可以促进生根，兰芹英在用土沉香的成熟胚组培试验中采用naa 1 000 mg/l浸泡幼苗，诱导生根率达85%,9,.但一般认为树种或品种特性是影响扦插生根的主要因素，因而根据生根的难易程度把树种分为容易生根类型、一般类型和难生根类型，土沉香属于难生根树种.张玉臣等在尖峰岭热带林业试验站的研究结果也表明，土沉香属于难生根树种，其用1 a生实生苗的半木质化枝条作插穗，经iaa 1 500 mg/l 和 1 000 mg/l速蘸处理的生根率最高分别达40.17%和36.07%，naa1 500 mg/l处理生根率达33%.扦插试验中，大多数生根需要40~90 d.云南省西盟县林业局苗圃试验点与中国热带林业研究所尖峰岭热带林业试验站的气候环境不同，试验所用种源、生根剂和环境条件也不同，这些对扦插试验成活率都会造成不同的影响.因此，对土沉香生根的机理和能有效促进生根的生长调节剂还需做进一步的研究探索. 3.2嫁接繁殖试验 1)从10 a生左右结果母树树冠外围采取生长健壮、 芽饱满的当年生半木质化枝条作接穗，嫁接成活率比1 a生枝条高，2 a生枝不宜作接穗. 2)在夏季7~8月嫁接比春季3月效果好. 3)因土沉香材质疏松，水分易丧失，嫁接时需对接穗顶端用薄膜进行封口处理，以防止雨水随接穗顶端渗入枝条，并对苗床进行遮荫，以减少蒸发. 4)在嫁接试验中，切接法较好.切口长削面长2~2.5cm，不过髓心，短削面长1 cm，过髓心.当年生枝接穗成活率达52%. 接穗的质量、嫁接技术、环境因子等.本试验采用的是本砧嫁接，砧木和接穗的亲和力应该是比较强的.影响嫁接成活率的主要因素有2方面:?因资源破坏严重，可采接穗的母树很少，且山高坡陡，采集接穗非常困难，因此接穗的质量难以保证;?苗圃设施条件有限，嫁接后的管理水平也存在不足，影响了嫁接成活率.如果以上2方面得到改善，在当地夏季(7月)进行半木质化枝条切接，嫁接成活率会得到提高. : ,1,国家重点保护野生植物名录中华人民共和国野生植物保护条例,z,.国务院令第204号,1999. 2,宋细福.沉香木现况与台湾繁殖之探讨,j,.高经济农业,2005(3). 3,黄智慧.西盟县土沉香人工培育技术,j,.林业调查,2006,31(6):81-84. 4,田耀华,原慧芳,倪书邦,等.沉香属植物研究进展,j,.热带亚热带植物学报,2009,17(1):98-104. 5,陈振福,李荣,冯江.药植物土沉香的育苗技用术,j,.福建农业学报,2008,14(18):173-173. 6,付开聪,张绍云.云南土沉香资源保护与开发,j,.中国野生植物资源，2009,28(6):37-43. 7,黄赛,吕德任.土沉香增值培养适宜培养基的研究,j,.现代农业科学，2008,(8):13-14. 8,徐强兴,吴妃华,周立赖.土沉香的组培快繁技术研究,j,.广东农业科学，2006,19(8):44-46. 9,兰芹英,方春研.土沉香成熟胚的组织培养与植株再生,j,.广西农业生物科学， 2001,20(3):231-232.