植物根系活力的测定

实验二 植物根系活力的测定 植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。本实验学习测定根系活力的甲烯蓝法。 【原理】 根据沙比宁等的理论，植物对溶质的吸收具有面吸附的特性，并假定被吸附物质在根系表面形成一层均匀的单分子层;当根系对溶质的吸附达到饱和后，根系的活跃部分能将吸附着的物质进一步转移到细胞中去，并继续产生吸附作用。在测定根系活力时常用甲烯蓝作为吸附物质，其被吸附量可以根据吸附前后甲烯蓝浓度的改变算出，甲烯蓝浓度可用比色法测定。已 2知1mg甲烯蓝形成单分子层时覆盖的面积为1.1m，据此可算出根系的总吸收面积。从吸附饱和后再吸附的甲烯蓝的量，可算出根系的活跃吸收表面积，作为根系吸收活力的指标。 【、仪器与试剂】 1.材料:植物根系。 2.仪器及用具:分光光度计;移液管;烧杯;比色管。 -1-1-13.试剂:0.01 mg•mL甲烯蓝溶液;0.0002 mol•L(0.075 mg•mL)甲烯蓝溶液。 【方法与步骤】 -11. 甲烯蓝曲线的制作 按表2,1用0.01 mg•mL甲烯蓝溶液配制系列标准溶液，于660 nm处测定吸光度，以甲烯蓝浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 表2,1 甲烯蓝系列标准溶液的配制 管号 试剂/mL 0 1 2 3 4 5 7 -10.01 mg•mL甲烯蓝/mL 0 1 2 3 4 5 6 蒸馏水/mL 10 9 8 7 6 5 4 -1甲烯蓝浓度/µg•mL 0 1 2 3 4 5 6 2. 将待测的植物根系洗净沥干，浸在装有一定量水的量筒中，用排水法测定根系的体积(或用体积计测定)。 -13. 将0.0002 mol•L的甲烯蓝溶液(每毫升溶液中应含0.075 mg甲烯蓝，为消除溶液配制和比色误差，其含量需要重新进行比色，查标准曲线确定)分别倒入3个小烧杯中，编号，每个烧杯中溶液体积约10倍于根系的体积。准确记下每个烧杯中的溶液量。 4. 将洗净的待测根系，用吸水纸小心吸干，然后依次浸入盛有甲烯蓝溶液的烧杯中，每杯中浸1.5 min，注意每次取出时，都要使根上的甲烯蓝溶液流回到原杯中去。 5. 从3个小烧杯中各吸取甲烯蓝溶液1 mL，用去离子水稀释10倍后，于660 nm处测定吸光度，根据标准曲线，查得各杯浸根后甲烯蓝的浓度。 【结果与计算】 2(1)总吸收面积(m)=[( c—c’)×v+(c—c’)×v]×1.1 111222 2(2)活跃吸收面积(m)= [(c—c’)×v]×1.1 333 22(3)活跃吸收面积%=根系活跃吸收面积(m)/根系总吸收面积(m)×100% 2-323(4)比表面积(cm?cm)= 根系总吸收面积(cm)/根体积(cm) -1式中 c:各杯未浸泡根系前的甲烯蓝浓度(mg•mL); -1c’:各杯浸泡根系后的甲烯蓝浓度(mg•mL); v:各杯中的溶液量(mL)。 【思考题】 1. 在TTC法和甲烯蓝法测定根系活力的过程中哪些环节容易产生误差,如何减少这些误差, 2. 在TTC法中，保温结束后加硫酸与否对实验结果有何影响,