兽用注射用白油的物化性质分析和乳化性能研究

兽用注射用白油的物化性质分析和乳化性能研究 华南理工大学 硕士学位兽用注射用白油的物化性质分析和乳化性能研究 姓名:骆东 申请学位级别:硕士 专业:应用化学 指导教师:柳松 20080501 摘 要 随着禽流感等流行病在全球范围内的流行，生产免疫效果好的灭活疫苗的需求日益迫切。随着抗原纯度越来越高，亚单位疫苗、合成肽疫苗等被广泛应用，佐剂增强抗原的免疫原性的作用显得尤为重要。油乳佐剂可以使多种抗原产生高滴度抗体，是动物疫苗中应用最广泛的佐剂之一。作为油乳佐剂的主要原料，白油的组分及其乳化稳定性对疫苗的活性有着重要影响。而复合乳化剂的,,,值、乳化剂含量以及二硬脂酸铝的含量都对白油乳剂的稳定性有重要影响。本论文对两种白油的组分进行了分析和比较，探讨了造成两者佐剂活性差异的影响因素。此外还对不同馏程的白油制备,,,型乳状液的乳化稳定性作了研究。 本文使用减压蒸馏、,,—，,、,,、,—,—,法、,,—,,,、,,,,,,对白油，与白油，，进行了分析。结果发现，两者的主要差异为:白油，含有更多的芳烃杂质;白油，碳链长度分布为,,,,,,,，以高沸点馏分为主，白油，，则为,,,,,,,，馏分相对较轻;白油，的平均分子量为,,,，环烷基碳含量约为,,,。白油，，的平均分子量为,,,，环烷基碳含量较高，达到,,,;白油，正构烷烃总相对含量为,,(,,，且分布比较均匀，白油，，正构烷烃总含量为,,(,,，但在轻馏分中的含量特别高。另外，白油，各馏分的环烷基含量随馏分变轻而增加。,,—,,,测定支化度的结果和族组成估算结果一致。 使用,,,,,,,,,,,,,,,复合乳化剂制备,,,乳状液，发现两种白油以及白油，的几个馏分在适合的条件下都能制备出较稳定的乳状液。白油，及其各馏分在,,,值为,(,时得到最稳定的乳状液，而白油，，在,,,值为,(,时乳状液最为稳定。较佳的乳化剂含量是,,或,,。白油，的二硬脂酸铝最佳含量为,,，白油，，为和,(,,。相同条件下，乳状液的稳定性与白油粘度有关，粘度较大的白油在比较宽的,,,值和乳化剂含量的范围内都能形成比较稳定的乳状液，粘度较小的样品在偏离最佳条件后稳定性下降明显。关键词: 白油; 油乳佐剂; 族组成分析; ,,,型乳状液; 稳定性 ,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,;,,,,, ,,,,,,,, ,,;, ,, ,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,， ,, ,,,,,;, ,,;;,,,, ,,,, , ,,,,,,,;,,,, ,,,,,, ,?;,?,, ,,, ,,,, ,,, ,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,;,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,;,,,, ,,,, ,,,,,,,,，,,;,,, ,,,,,;,,,,, ,, ,,(, ,,,, ,,, ,,,, ,,,,,,(,,,,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,印,,,,, ,, ,, ,,, ,,,,;, ,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,，,,, ;,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,, ,，, ,,,,,,,锄, ,,,,,,,;, ,, ,,,,,,, ,;,,,,,, ,, ,,;;,,,,?,,, ,,,,,，;,,;,,,,,,,,, ,, ,舢,, ,,,, ,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,, ,, ;,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,砌,,,,,,,;, ,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,, ,,, ,,,,,,,,(,,,,,,,,,, ,, ,,,姗, ,, ,, ,,,,,,,,,,,血, ,,, ,,,, ;,,,,;,,,,,,, ,,, ;,,,,,,,，,,,,,,,;, ,,;,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,, ,,,;, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,;,,,,,, ,,,, ,,,,,,,(,,,,,,,,, ,, ,,,;,,,, ,, ,,,,, ,,, ,, ,,,, ,,,,,,,( ,,, ,,,,, ,,,, ,,;,,, ,,,,,,,,,,,，,?,,？,，,,,,,,，,(,(, ,,,,,,，,,,,,, ,,,, ,, ;,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,, ， ,,, ,,,,, ,,, ，，(,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,，,,,,,,,,;,, ,矾, ,, ,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,:,,,,, ,, ,,, ,,, ， ;,,,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,; ,,,,,,姆,,,,,, ;,,,, ,,,,,, ,, ,,,,, ,,, ， ,,,, ,,,,,,, ,, ,,,, ,，，，,,,,, ,,,,, ,,, ，， ,, ,,,，,,,,,，,,,, ,置,,,, ,, ;,, ,,,;,,,, ,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,, ,,,,, ,,, ,,, ， ,, ,,,，,,, ,,, ,,,;,,,,,, ,, ,,,,,丘,;,,,,(,,,,,,, ,,,,;,,,, ,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,, ,,,(,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,, ，， ,, ,,, ,,, ,舭?,,,,,,,, ;,;,,,,(,,, ,, ;,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,(,,,,,,,, ;,,,,,,, ,, ,,,,,,,, ,, ,,,,, ,,, ， ,, , ,(,,，,,, ,,,, ,,,, ;,,,,,, ,, ,,,,, ,,,;,,,,? 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粒 じ镏破沸枰 尤胗椭 愿纳破じ锏募庸ば阅埽话子驮谝潜砗偷缌Ψ矫嬗米鼍 芤瞧饕潜淼娜蠡 ?溲蛊骷暗缋绿畛溆糜停 娇蘸托羌屎叫凶鲆貉褂秃腿蠡 停 绲缱釉 图扑慊 娜蠡 取,?瞪希 子椭饕 糜诘骷炼 锼橇希 抟脚浞胶徒慌淙蠡 粒 背婕恋幕 ?突蚍稚?恋取,保 保 ?国内外白油生产状况 国外白油生产技术有发烟硫酸磺化法，气态三氧化硫磺化法和催化加氢法等。自,,,,年,,,,,,,,公司建成第一套白油加氢装置以来，随着对白油产量、 华南理,大学硕士学位论文品种、质量要求的不断增长以及环境保护要求愈加严格，加氢法生产白油得到了快速发展，目前，国际上采用加氢法生产的白油约占白油总产量的,,,以上。【,,, 我国的白油生产比国外起步要晚半个多世纪，虽然现在的自油工业有了较大的发展，但生产工艺技术相对落后，白油质量和档次低，与国外先进水平相比，仍有很大的距离。国内白油生产工艺主要有发烟硫酸和三氧化硫磺化法、加氢精制法。用磺化法工艺生产的白油占的比重相当大。而白油加氢精制法从开始研究应用至今也有近,,年时间，但是发展缓慢，用加氢法生产的白油不到白油总产量的,,,。【,,, 磺化法生产白油的原理,,,】是:润滑油基础油含有少量的不饱和烃、芳烃以及,，,，,等杂原子化合物，这些杂质是味道、颜色的来源。用发烟硫酸进行磺化时，有效的磺化剂是质子化的焦硫酸,,,,,,，和,,,,,,,。(,,,,,，,,,,)。在整个磺化过程中发烟硫酸既是磺化剂，又是氧化剂，杂质与硫酸起可逆的磺化反应和氧化反应。反应所生成的产物一部分沉下来进入酸渣，另一部分溶于油中，这部分产物具有很强的极性，用极性溶剂从非极性的油中抽提出来。其工艺路线【,,】为:原料油一磺化一中和抽提一白土精制一过滤一白油 用硫酸酐(,,,)代替发烟硫酸可以提高磺化过程的收率。缩短磺化过程时间，生成的酸渣量几乎减少一半。同时，磺化剂用量也可减少。工艺流程包括:工艺空气的压缩和干燥;熔硫、,,,产生:油磺化和酸渣分离;磺酸的中和和萃取;尾气处理;粘土处理等，,, 上述方法成本较低，但生成的大量酸渣难以处理，造成了严重的环境污染，而且白油的质量不如催化加氢法。加氢精制法生产白油，其主要原理是通过高压加氢，使原料油中的硫、氮、氧等非烃化合物氢解，使烯烃、芳烃选择加氢饱和，并能脱除金属和沥青胶质等杂质。在加氢过程中的主要反应为脱硫、脱氮、脱氧、烯烃和芳烃的饱和以及加氢脱金属【,,】。其工艺流程为:用进料泵和压缩机使原料油及氢气升到反应压力，混合后通过加热炉将物料加热到需要的温度，在反应器中，在高压、低温及贵金属催化剂存在的条件下，对异构脱蜡加氢生成油进一步加氢精制，饱和其残存的芳烃，反应产物经过换热、冷却，汽液分离器，低分油经换 热、蒸汽汽提、减压干燥后作为产品出装置。,,,,该方 , 第一章绪论法虽然投入较大，但产品质量好，收率高，环境污染小。,(, 油乳佐剂的研究进展 以注射用白油为油相制备的,,,型乳液被广泛应用于兽医领域，因其突出的佐剂活性被作为疫苗佐剂使用。由于自油含有微量稠环芳烃，有致癌作用，因此注射用白油的质量要求比其他领域严格得多。 免疫佐剂(,,,,,,,,,,,,,,)，简称佐剂(,,,,,,,,)是一类可先于或与抗原一起注入到动物体内，可非特异性地增强机体对该抗原的特异性免疫应答或改变免疫应答类型的物厨,,,。自从,,,,,【,,,在,,,,年首次发现在疫苗中加入琼脂、金属盐、卵磷脂等物质可以增强机体免疫应答后，佐剂被广泛地应用于各种抗原物质的免疫上。由于抗原纯度越来越高，亚单位疫苗、合成肽疫苗等被广泛应用，佐剂增强抗原的免疫原性的作用显得尤为重要。佐剂种类很多，如铝盐佐剂、油乳佐剂、脂质体佐剂等等。其中，油乳佐剂可以使多种抗原产生高滴度抗体，被广泛应用于新城疫、鸡减蛋综合症等疫刮列,，是动物疫苗中应用最广泛的佐剂之一。近年来，它在人 在其可以增强疫苗活体的应用成为研究的热点。,(,(, 油乳佐剂的作用原理 性的作用被,,,,,,等【,,】首次报道后，油乳剂作为疫苗佐剂使用已经有几十年历史。其作用机理尚不完全清楚，大致上可以有如下解释【,,】:首先，乳状液在注射部位的贮库效应能延长抗原在体内的存留时间，缓慢释放抗原，从而持续刺激机体，提高抗原的免疫原性;第二，乳剂能够包裹抗原，保护其不被体液中的酶迅速分解，延长抗原刺激机体的时间:第三，乳剂会在注射部位引起细胞浸润，促使抗原呈递细胞(,,,,)如巨噬细胞、淋巴细胞等聚集和增殖从而提高免疫应答水平;此外，油乳?艏粱箍梢源碳じ髦窒赴 蜃尤纾桑蹋 病?桑蹋 兜鹊姆置冢 俳 固宀 荆玻常薄?乳剂的活性与其物理性质密切相关，包括乳状液类型、粘度、稳定性等。不同类型乳状液释放抗原的动力学行为各不相同:水包油型乳剂(,,,)最快，油包水型(,,,)较慢，水包油包水型(,,,,,)介于两者之间【,,,。粘度和稳定性的差异也会导致佐剂活性的不同。影响这两者的因素很多，包括表面活性剂的结构、浓度和亲水亲油平衡(,,,)值、油水相比、乳化工艺等。,,,,,,,,,, 华南理工大学硕士学位论文研究了在不同粘度及稳定性下，乳液的佐剂活性，发现粘度太大的乳液会使活性降低，而稳定性好的活性也比较好。,,,,,,,,〔,,】等以不同的,,,值的佐剂作对比，发现合适的,,,值能使乳剂的贮库效应更明显，释放抗原更慢，因此免疫.