高效液相色谱法测定复方己烯雌酚乳膏中己烯雌酚和氯霉素的含量

高效液相色谱法测定复方己烯雌酚乳膏中己烯雌酚和氯霉素的含量 高效液相色谱法测定复方己烯雌酚乳膏中 己烯雌酚和氯霉素的含量 药物鉴定2007年第l6卷第3期 高效液相色谱法测定复方己烯雌酚乳膏中 己烯雌酚和氯霉素的含量 程洪兵 (河南省濮阳市人民医院,河南濮阳457000) 摘要:目的用高效液相色谱法同时测定复方已烯雌酚乳膏中己烯雌酚和氯霉素的 含量.方法采用KromasilC-e色谱柱(250mm×4.6mm, 5m),流动相为甲醇一水(70:30),流速为0.7mL/min,检测波长为241am.结果己烯雌酚线性范围是7.5—17.5p,g/mL.r=0.9998 (=5),平均回收率为99.95%,RSD为1.35%;氯霉素的线性范围是375—875Ixg/mL,r=0.9999(rg=5),平均回收率为99.87%,RSD 为0.58%.结论高效液相色谱法操作简便,灵敏度高.重现性好,可用于复方己烯雌酚乳膏中己烯雌酚和氯霉素的含量测定. 关键词:高效液相色谱法;复方己烯雌酚乳膏;己烯雌酚;氯霉素 中图分类号:11927.2;11984文献标识码:A文章编号:1006—4931(2007)03—0016—02 DeterminationofDiethylstilbestrolandChloramphenicolin CompoundDiethylstilbestrolCreambyHPLC ChengHongbing rPeople'sHospitalofPuyangCity,llenanProvince,Puyang,Henan,China457000) Abstract:ObjectiveToestablishaHPLCmethodfordeterminationofdiethylstilbestrolandc hloramphenicolincompounddiethylstilbestrol cream.MetbadsKromasilCl8column(250mm×4.6啪.5p,m)wa8used,methanol—water(70:30)wasusedasmobilephase,theflow ratewas0.7mL/minandUVdetectionwasat241am.ResultsThelinearrangeofdiethylstilbes trolwas7.5—17.5p,g/mL(r=O.9998, =5)andaveragerecoveryratewas99.95%.RSD;1.35%.Thelinearrangeofchloramphenicol was375—875~g/mL(r--0.9999,=5) andaveragerecoveryratewas99.87%,RSD=0.58%,ConclusionThemethodissimple,pract ical,convenientandaccuratewithagood reproducibility.Itcanbeusedforthedeterminationofdiethylstilbestrolandch!oramphenico lincompounddiethylstilbestrolcream. Keywords:HPLC;compounddiethylstilbestrolcream;diethylstilbestrol;chloramphenicol 复方己烯雌酚乳膏是我院临床长期使用的一种医院制剂,其室提供);甲醇(色谱纯);乙醇(纯);水(重蒸水). 主要成分为己烯雌酚,氯霉素,基质为白凡士林,十八醇,液体石蜡2方法与结果 等,主要治疗痤疮,外阴瘙痒,阴道干燥等,且效果良好.目前虽有2.1色谱条件 用高效液相色谱法测定己烯雌酚软膏中己烯雌酚含量的报道【11.但色谱柱:KromasilC.e柱(250mm×4.6mm,5p,m);流动相:甲 未见用高效液相色谱法(HPLC法)同时测定己烯雌酚氯霉素复方醇一水(70:30);流速:0.7mL/min;检测波长:241am;进样量: 制剂中己烯雌酚和氯霉素含量的报道.本实验用HPLC法同时测定20L.在该色谱条件下,己烯雌酚的保留时间为15.12rain,氯霉素 复方己烯雌酚乳膏中己烯雌酚和氯霉素二组分的含量,该法操作的保留时间为5,82min,二者的理论塔板数均大于2000,己烯雌 简便,灵敏度高,结果满意.酚峰和氯霉素峰的分离度大于1.5,基质不干扰主成分的测定,色 1仪器与试药谱图见图1. 美国Waters515型高效液相色谱仪;SK1200H型超声波清洗2.2溶液制备 仪(上海科导超声仪器有限公司).己烯雌酚对照品,氯霉素对照品取105?下干燥至恒重的己烯雌酚对照品约0.0125g,氯霉 (中国药品生物制品检定所,批号分别为100033—2,素对照品约,,精密称定,同置mL量瓶中,加乙醇溶解. 0040606250g100 100006—200317);复方己烯雌酚乳膏及空白基质(均由我院制剂并稀释至刻度.摇匀,作为贮备液;精密量取贮备液5mL,置50mL 照品溶液,对照品溶液各10,点于同一以0.3%羧甲基纤维素 钠为黏合剂的硅胶H薄层板上,以乙酸乙酯一甲酸(8:1)为展开 剂,预平衡1h,展开.取出.晾干,喷1%三氯化铝乙醇溶液,在紫外 灯下(365am)检视.供试品溶液色谱中,在与对照药材溶液色谱相 应位置上显相同的黄色荧光斑点,而阴性对照品溶液色谱相应位 置无对应斑点,见图1D. 3讨论 用TLC鉴别以上几种中药材,简便,快速,可行性及重现性好, 结果准确,可靠,可用于该制剂质量控制.在黄芪的鉴别中.根据文献 【6—7】报道,在药典的鉴别方法中加入一步碱洗,是为了使水溶性及 酸性杂质溶入水层,减少干扰成分,让斑点分离较好,背景更干净. 作者简介:蒋学文,女,重庆永川人.药师,(电话)023—68774770 (电子信箱)jiangwen1982wen@126.corn;黄林清,本文通讯作者,副 主任药师,(电话)023—6875540l. 参考文献: ? l6? 【1】徐珞珊,金容鸾,徐国钧.中国药材学(下)【M】.北京:中国医药科技出 版社,1996:10. 【2】余传隆,黄泰康,丁志遵,等,中药辞海(第一卷,第二卷,第三卷)【M】. 北京:中国医药科技出版社,1996:4. 【3】国家药典委员套.中华人民共和园药典(一部)【M】.北京:化学工业出 版社,2000:18,78,249,291. 【4】孙长荣.霍同淑.中药材理化鉴定【M】.石家庄:河北科学技术出版社, 1993:2. 【5】杨云,张晶,陈玉婷.天然药物化学成分提取分离手册(修订版) [M】,北京:中国中医药出版社,2003:1. [6】赵文,黄亚东,许华,等.阿克苏黄芪与蒙古黄芪中皂苷成分的比 较【J】.华西药学杂志,2002,17(4):280—281. [7】倪江洪,袁冬梅,谢虞升,等.益肾丸质量的研究[J】.中国现代应 用药学杂志,2002,19(2):109—111. (收稿日期:20o6—06—22) 2007年第l6卷第3期 6_r—lllr0—— A 0l020 BC 1.氯霉素2.己烯雌酚 A,空白溶液B.对照品溶液C.供试品溶液 图1高效液相色谱圈 量瓶中,加乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液.取复方 己烯雌酚乳膏(批号为060509)约1.25g,精密称定,置小烧杯中, 加乙醇适量溶解,分多次转移至100mL量瓶中,超声提取1h,冷 至室温,加乙醇至刻度,摇匀,过滤,将续滤液作为供试品溶液.取 空白基质,按供试品溶液制备方法处理,得空白溶液. 2.3方法学考察 线性关系考察:分别取对照品贮备液3.0,4.0,5.0,6.0,7.0mL, 置50mL量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀.取20进样,色 谱图,以对照品溶液质量浓度C(bLg/mL)对峰面积A进行线性回 归,求得回归方程为己烯雌酚Al:69881Cl一1434,n=0.9998 (n=5);氯霉索A=12482C+5038,,2=0.9999(n=5).己烯雌 酚质量浓度在7.5—17.5~g/mL范围内,氯霉素质量浓度在375 875I~g/mL范围内与峰面积线性关系良好. 精密度试验:取对照品溶液,连续进样5次,记录峰面积.结果 己烯雌酚,氯霉索的RSD分别为0.74%和0.51%(n=5),明仪 器精密度良好. 重现性试验:取复方己烯雌酚乳膏(批号为060509),精密称定 5份,照供试品溶液制备方法提取并进样,记录色谱图,测得己烯雌 酚和氯霉素的平均含量分别为标示量的98.15%和99.26%.RSD 分别为0.95%和0.77%,表明本方法重现性良好. 回收率试验:在线性范围内,精密称取己烯雌酚,氯霉素处方 量的80%,100%,120%和空白基质,于烧杯中混合均匀.照供试品 溶液制备方法提取并进样,测定结果见表1. 稳定性试验:取复方己烯雌酚乳膏(批号为060517),照供试品 溶液制备方法制备供试液;将供试液分别在0,4,8,12,24h时注入 液相色谱仪,记录峰面积,测得己烯雌酚和氯霉素的平均含量分别 裹1回收率试验结果(n=6) 药物鉴定 99.9599.871.350.58 为标示量的96.5l%和98.75%,RSD分别为1.28%和0.96%,表 明供试品溶液在24h内稳定. 2.4样品含量测定 取3批复方己烯雌酚乳膏,照 供试品溶液制备方法制备3份供试 液;取对照品溶液和3份供试液分 别进样,按外标法计算含量,结果见 表2. 3讨论 表23批样品含量测定结果 (标示量的%.n=3) 批号 060512 060525 060603 含量(%) 己烯雌酚氯霉素 99.02 98.67 9959 99.35 99,18 9822 3,1采用水浴热熔法提取样品,降解产物产量较多,而选用超声 1h提取法,结果满意;对提取溶剂(甲醇,无水乙醇,乙醇)进行过 比较,发现乙醇提取较完全,且杂质干扰少. 3.2参考文献方法-3],选择最佳检测波长,配制己烯雌酚对照 品溶液,氯霉素对照品溶液,作紫外光谱扫描.结果己烯雌酚的最 大吸收波长为241nm,氯霉索在241tim处也有较强吸收;在254nm 处测定样品时氯霉素峰会出现较大的肩峰,最后确定241nm为检 测波长.流动相甲醇一水(70:30)的分离度较好. 参考文献: [1】匡佩琳,李平,罗晓红,等.HPLC法测定己烯雌酚软膏含量[J】.药物 分析杂志,2000.20(5):351. [21徐英宏,肇丽梅.段旭,等,HPLC法测定复方己烯雌酚栓中己烯雌酚 和醋酸可的松的含量[J】.中国药学杂志,2002,37(11):872. 【3]国家药典委员套.中华人民共和国药典(二部)lMJ.北京:化学工业出 版社.2005:32—33. (收稿日期:2006—07一is) 高效液相色谱法测定垂盆草胶囊中槲皮素含量 杨帆,邓开英 (重庆市药品检验所,重庆401121) 摘耍:目的建立垂盆草胶囊中槲皮素的含量测定方法.方法采用高效液相色谱法,色谱柱为C.柱(250mm×4.6mm,5m),流动相为甲 醇一0.4%磷酸溶液(50:50),检测波长为370am.结粜槲皮素进样量在0.04152— 0.4152g范围内与峰面积具有起好的线性关系(r= 0.9999),平均回收率为101.9%,RSD为2.5%(n=6).结论该法简单,快速.可为垂盆草 胶囊的质量控制提供依据 关键词:垂盆草胶囊;槲皮素;高效液相色谱法;含量测定 中图分类号:R284.1;R286.0文献标识码:A文章编号:1006—4931(2007)03—0017— 02 DeterminationofQuercetininChuipencaoCapsulebyHPLC Y帆gFan,DeKaiying fChongqingInstituteforDrugControl,Chongqing,China401121) Abstract:ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofquereetininChuipencaoca psule.MethodsHPLCmethodwasadopted andaCI8column(250mm×4.6mm,5m)wasused.Themobilphaseconsistedofmethanol一0.4%phosphoricacid(50:50).Thedetection wavelengthwasat370nm.ResultsThecalibrationcurveofquercctinwaslinearintherangeof 0.04152—0.4152g(r=0.9999),the averagerecoveryratewa8101.9%,RSD=2.5%(rg=6).ConclusionThemethodissimple,qui ck,andcanbeusedforqualitycontrolof Chuipencaocapsule. Keywords:Chuipencaocapsule;quercetin;HPLC:contentdetermination 中国药业ChinaPharmaceuticals?17? 536963 67inu ?呻鲫?帅 观佗卯0 m吼 39165?斗 m?凹蚰 556677 559386 99??372 9923??6 nui39 口:L&i 鲫如?" 8162nul 9nu2356