水处理试验的化学分析

试验目的：（1）了解氨氮的几种测定方法 （2）掌握分光光度计的使用、曲线的绘制及有关计算 方法 （3）熟悉纳氏试剂光度法测定氨氮的原理及过程 + 氨氮（NH—N）以游离氨（NH）或铵盐（NH）形式存在于水中，两者的组334成比取决于水的PH值。当PH值偏高时，游离氨的比例较高。反之，则铵盐的比 例较高。 水中氨氮的来源主要为生活污水中含氮有机物受微生物作用的分解产物， 某些工业废水，如焦化废水和合成氨化肥厂废水等，以及农田排水。此外，在无 氧环境中，水中存在的亚硝酸盐亦可受微生物作用，还原为氨。在有氧环境中， 水中氨亦可转变为亚硝酸盐，甚至继续转变为硝酸盐。 测定水中各种形态的氮化物，有助于评价水体被污染和“自净”状况。 氨氮含量较高时，对鱼类则可呈现毒害作用。 1 方法的选择 氨氮的测定方法，通常有纳氏试剂比色法、苯酚一次氯酸盐（或者水杨酸一 次氯酸盐）比色法和电极法等。纳氏试剂比色法具有操作简便、灵敏等特点，水 中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色，以及混浊等均干扰测定， 需作相应的预处理。 2 水样的保存 水样采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶内，并应尽快，必要时可加硫酸将水样酸 化至 PH?2，于2—5?下存放。酸化样品应注意防止吸收空气中的氨而遭致污 染。 水样带色或浑浊以及含其它一些干扰物质，影响氨氮的测定。为此，在分 析时需作适当的预处理。对较清洁的水，可采用絮凝成淀法，对污染严重的水或 工业废水，则以蒸馏法使之消除干扰。 絮凝沉淀法 概 述 加适量的硫酸锌于水样中，并加氢氧化钠使呈碱性，生成氢氧化锌沉淀， 再经过滤除去颜色和浑浊等。 仪 器 100ml具塞量筒或比色管。 试 剂 (1)10%（m/V）硫酸锌溶液 ：称取10g硫酸锌溶于水，稀释至100ml。 （2）25%（m/V）氢氧化钠溶液：称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100ml， 贮于聚乙烯瓶中。 （3）硫酸 步 骤 取100ml水样于具塞量筒或比色管中，加入1ml10%硫酸锌溶液和0.1— 0.2ml25%氢氧化钠溶液，调节PH至10.5左右，混匀。放臵使之沉淀，用经无氨 水充分洗涤过的中速滤纸过滤，弃去初滤液20ml。 蒸馏法 概 述 调节水样的PH使在6.0—7.4的范围，加入适量氧化镁使呈微碱性（也可加 入PH9.5的NaBO-NaOH缓冲溶液使呈弱碱性进行蒸馏；PH过高能促使有机氮的447 水解，导致结果偏高）。蒸馏释出的氨，被吸收于硫酸或硼酸溶液中。采用纳氏 试剂比色法或酸滴定法时，以硼酸溶液为吸收液：采用水杨酸一次氯酸比色法时， 则以硫酸溶液为吸收液。 仪 器 带氮球的定氮蒸馏装臵：500ml凯氏烧瓶、氮球、直形冷凝管和导管。 试 剂 水样稀释及试剂配制均用无氨水。 （1）无氨水制备：?蒸馏法：每升蒸馏水中加0.1ml硫酸，在全玻璃蒸馏 第 2 页 共 32 页 器中重蒸馏，弃去50ml初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞 保存。 ?离子交换法：使蒸馏水通过强酸性阳离子交换树脂柱。 （2）1mol/L盐酸溶液。 （3）1mol/L氢氧化钠溶液。 （4）轻质氧化镁（MgO）：将氧化镁在500?下加热，以除去碳酸盐。 （5）0.05%溴百里酚蓝指示液（PH6.0—7.6）。 （6）防沫剂：如石蜡碎片。 （7）吸收液：?硼酸溶液：称取20g硼酸溶液于水，稀释至1L。 ?硫酸（HSO）溶液：0.01mol/L。 24 步 骤 （1）蒸馏装臵的预处理：加250ml水于凯氏烧瓶中，加0.25g轻质氧化镁和数粒玻璃珠，加热蒸馏，至馏出液不含氨为止，弃去瓶内残液。 （2）分取250ml水样（如氨氮含量较高，可分取适量并加水至250ml，是氨氮含量不超过2.5mg），移入凯氏烧瓶中，加数滴溴百里酚蓝指示液，用氢氧 化钠溶液或盐酸溶液调节至PH7左右。加入0.25g轻质氧化镁和数粒玻璃珠，立 即连接氮球和冷凝管，导管下端插入吸收液液面下。加热蒸馏，至馏出液达200ml时，停止蒸馏。定容至250ml。 采用纳氏试剂比色法时，以50ml硼酸溶液为吸收液。 注意事项 （1）蒸馏时应避免发生暴沸，否则可造成馏出液温度升高，氨吸收不完全。 （2）防止在蒸馏时产生泡沫，必要时可加少许石腊碎片于凯氏烧瓶中。 （3）水样如含余氯，则应加入适量0.35%硫代硫酸钠溶液，每0.5ml可除去0.25mg余氯。 概 述 1 方法原理 碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较 第 3 页 共 32 页 宽的波长范围内具强烈吸收。通常测量用波长在410—425nm范围。 2 干扰及消除 脂肪胺、芳香胺、醛类、丙酮、醇类和有机氯胺类等有机化合物，以及铁、 锰、镁和硫等无机离子，因产生异色或浑浊而引起干扰，水中颜色和浑浊亦影响 比色。为此，须经絮凝沉淀过滤或蒸馏预处理，易挥发的还原性干扰物质，还可 在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰，可加入适量的掩蔽剂加以消除。 3 方法的适用范围 本法最低检出浓度为0.025mg/L（光度法），测定上限为2mg/L。采用目视比色法，最低检出浓度为0.02mg/L。水样作适当的预处理后，本法可适用于地面 水、地下水、工业废水和生活污水。 仪 器 （1）分光光度计。 （2）PH计。 试 剂4 配臵试剂用水均应为无氨水。 1 纳氏试剂 可选择下列一种方法制备： （1）称取20g碘化钾溶于约25ml水中，边搅边分次少量加入二氯化汞 （HgCl）结晶粉末(约10g)，至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯2 化汞溶液，并充分搅拌，当出现微量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加氯化汞溶 液。 另称取60g氢氧化钾溶于水，并稀释至250ml，冷却至室温后，将上述溶液在边搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至400ml,混匀。静臵过夜，将上清液移入聚乙烯瓶中，密封保存。 （2）称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温。 另称取7g碘化钾（KI）和10g碘化汞（HgI）溶于水，然后将此溶液在搅2 拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。 2 酒石酸钾钠溶液 称取50g酒石酸钾钠（KNaCHO〃4HO）溶于100ml水中，加热煮沸以去除4462 第 4 页 共 32 页 氨，放冷，定容至100ml。 3 铵标准贮备溶液 移取3.819g经100?干燥过的氯化铵（NHCl）溶于水中，移入1000ml容4 量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg氨氮。 4 铵标准使用溶液 移取5.00ml铵标准贮备液于500ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每 毫升含0.010mg氨氮。 步 骤 1 校准曲线的绘制 吸收0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0ml铵标准使用液于50ml比色管中，加水至标线，加1.0ml酒石酸钾钠溶液，混匀。加1.5ml纳氏试剂，混匀。放臵10min后，在波长420nm处，用光程10nm比色皿，以水为参比，测量吸光度。 由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，绘制 以氨氮含量（mg）对校正吸光度的校准曲线。 2 水样的测定 （1）分取适量经絮凝沉淀预处理后的水样（使氨氮含量不超过0.1mg），加入50ml比色管中，稀释至标线，加1.0ml酒石酸钾钠溶液。加1.5ml纳氏试剂，混匀。放臵10min后，同校准曲线步骤测量吸光度。 （2）分取适量经蒸馏预处理后的馏出液，加入50ml比色管中，加一定量1mol/L氢氧化钠溶液以中和硼酸，稀释至标线。加1.5ml纳氏试剂，混匀。放臵10min后，同校准曲线步骤测量吸光度。 3 空白试验 以无水氨替代水样，作全程序空白测定。 计 算 由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查得氨氮含 量（mg）。 氨氮（N，mg/L）=m/v〃1000 式中，m—由校准曲线查得的氨氮量（mg）；V—水样体积（ml）。 第 5 页 共 32 页 精密度和准确度 三个试验室分析含1.14—1.16mg/L氨氮的加标水样，单个试验室的相对标准偏差不超过9.5%；加标回收率范围为95—104%。 四个试验室分析含1.81—3.06mg/L氨氮的加标水样，单个试验室的相对标准偏差不超过4.4%；加标回收率范围为94—96%。 注意事项 （1）纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵明度有较大影响。 静臵后生产的沉淀应除去。 （2）滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。所用玻璃器皿应避 免试验室空气中氨的沾污。 第 6 页 共 32 页 试验目的：（1）了解化学需氧量的测定方法 （2）熟悉容量法（重铬酸钾法）测定化学需氧量的原理及过程 （3）掌握滴定管的作用 （4）熟练掌握滴定终点的控制 化学需氧量（COD），是指在一定条件下，用强氧化剂处理水样时所消耗氧化 剂的量，以氧的毫克/升来示。化学需氧量反映了水中受还原性物质污染的程 度。水中还原性物质包括有机物、亚硝酸盐、亚铁盐、硫化物等。水被有机物污 染是很普遍的，因此化学需氧量也作为有机物相对含量的指标之一。 水样的化学需氧量，可受加入氧化剂的种类及浓度、反应溶液的酸度、反 应温度和时间，以及催化剂的有无而获得不同的结果。因此，化学需氧量亦是一 个条件性指标，必须严格按操作步骤进行。 对于工业废水，我国规定用重铬酸钾法，其侧得的值称为化学需氧量。 概 述 1 原理 在强酸性溶液中，一定量的重铬酸钾氧化水样中还原性物质，过量的重铬 酸钾法以试亚铁灵作指示剂、用硫酸亚铁铵溶液回滴。根据用量算出水样中还原 性物质消耗氧的量。 2 干扰及其消除 酸性重铬酸钾氧化性很强，可氧化大部分有机物，加入硫酸银作催化剂时， 直链脂肪族化合物可完全被氧化，而芳香族有机物却不易被氧化，吡啶不被氧化， 挥发性直链脂肪族化合物、苯等有机物存在于蒸汽相，不能与氧化剂液体接触， 氧化不明显。氯离子能被重铬酸盐氧化，并且能与硫酸银作用产生沉淀，影响测 定结果，故在回流前向水样中加入硫酸汞，使成为络合物以消除干扰。氯离子含 量高于2000mg/L的样品应先作定量稀释，含量降低至2000mg/L以下，再行测定。 3 方法的使用范围 用0.25mol/L浓度的重铬酸钾溶液可测定大于50mg/L的COD值。用 第 7 页 共 32 页 0.025mol/L浓度的重铬酸钾溶液可测定5—50mg/L的COD值，但准确度较差。 仪 器 （1）回流装臵：带250ml锥形瓶的全玻璃回流装臵（如取样量在30ml以上，采用500ml锥形瓶的全玻璃回流装臵）。 （2）加热装臵：电炉。 （3）滴定器。 试 剂 （1）重铬酸钾标准溶液（1/6KCrO=0.2500mol/L）：称取预先在120?烘227 干2h的基准或优级纯重铬酸钾12.258g溶于水中，移入1000ml容量瓶，稀释至标线，摇匀。 （2）试亚铁灵指示液：称取1.485g邻菲罗啉（CHN〃HO，1，10—12822phenanthnoline）,0.695g硫酸亚铁（FeSO〃7HO）溶于水中，稀释至100ml，42 贮于棕色瓶内。 （3）硫酸亚铁铵标准溶液：称取39.5g硫酸亚铁铵溶于水中，边搅拌边缓 慢加入20ml浓硫酸，冷却后移入1000ml容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀。临 用前，用重铬酸钾标准溶液标定。 标定方法：准确吸取10.00ml重铬酸钾标准溶液于500ml锥形瓶中,加水稀释至110ml左右，缓慢加入30ml浓硫酸，混匀。冷却后，加入3滴试亚铁灵指示液（约0.15ml），用硫酸亚铁铵溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐 色即为终点。 （4）硫酸—硫酸银溶液：于2500ml浓硫酸中加25g硫酸银。放臵1—2d，不时摇动使其溶解（如无2500ml容器，可在500ml浓硫酸中加入5g硫酸银）。 （5）硫酸汞：结晶或粉末。 步 骤 （1）取20.00ml混合均匀的水样（或适量水样稀释至20.00ml）臵COD瓶（或250ml磨口的回流锥形瓶）中，准确加入10.00ml重铬酸钾标准溶液及数粒 小玻璃珠或沸石，慢慢地加入30ml硫酸—硫酸银溶液，轻轻摇动COD瓶使溶液混匀，加热回流2h(自开始沸腾时计时)。 注1.对于化学需氧量高的废水样，可先取上述操作所需体积1/10 的废水 第 8 页 共 32 页 样和试剂，于15×150mm硬质玻璃试管中，摇匀，加热后观察是否变成绿色。如 溶液显绿色，再适当减少废水取样量，直至 溶液不变绿色为止，从而确定废水 样分析时应取用的体积。稀释时，所取废水样量不得少于5ml，如果化学需氧量很高，则废水样应多次稀释。 2 废水中氯离子含量超过30mg/L时，应先把0.4g硫酸汞加入回流锥形瓶中，再加20.00ml废水（或适量废水稀释至20.00ml），摇匀。以下操作同上。 （2）冷却后，用90ml水冲洗冷凝管壁，取下锥形瓶。溶液总体积不得少 于140ml，否则因酸度太大，滴定终点不明显。 （3）溶液再度冷却后，加3滴试亚铁灵指示液，用硫酸亚铁铵标准溶液滴 定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液的 用量。 （4）测定水样的同时，以20.00ml重蒸馏水，按同样操作步骤作空白试验。 记录滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液的用量。 精密度和准确度 六个实验室分析COD为150mg/L的邻苯二甲酸氢钾统一分发标准溶液，实 验室内相对标准偏差为4.3%；实验室间相对标准偏差为5.3%。 注意事项 （1）使用0.4g硫酸汞络合氯离子的最高量可达40mg，如取用20.00ml水 样，即最高可络合2000mg/L氯离子浓度的水样。若氯离子浓度较低，亦可少加 硫酸汞，使保持硫酸汞：氯离子=10：1（W/W）。若出现少量氯化汞沉淀，并不影 响测定。 （2）水样取用体积可在10.00—50.00ml范围之间，但试剂用量及浓度需 按下表进行相应调整，也可得到满意的结果。 （3）对于化学需氧量小于50mg/L的水样，应改用0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液。回滴时用0.01mol/L硫酸亚铁铵标准溶液。 （4）水样加热回流后，溶液中重铬酸钾剩余量应为加入量的1/5—4/5为 宜。 （5）用邻苯二甲酸氢钾标准溶液检查试剂的质量和操作技术时，由于每克 邻苯二甲酸氢钾的理论COD为1.176g，所以溶解0.4251g邻苯二甲酸氢钾于重 cr 第 9 页 共 32 页 蒸馏水中，转入1000ml容量瓶，用重蒸馏水稀释至标线，使之成为500mg/L的 COD标准溶液。用时现配。 Cr （6）COD的测定结果应保留三位有效数字。 Cr （7）每次实验时，应对硫酸亚铁铵标准滴定溶液进行标定，室温较高时尤 其应注意其浓度的变化. 第 10 页 共 32 页 试验目的：（1）了解水样稀释接种过程 （2）熟悉五日生化需氧量测定的原理及过程 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。当其污染水域后，这些有机物 在水体中分解时要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水 体因缺氧造成鱼类及其它水生物的死亡。 水体中所含的有机物成分复杂，难以一一测定其成分。人们常常利用水中有 机物在一定条件下所消耗的氧，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即 属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。 测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在1—4?下进行保 存。一般应在6h内进行分析。若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时间不 应超过24h。 概 述 1 方法原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、 特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程进行 的时间很长，如在20?培养时，完成此过程需100多天。目前国内外普遍规定于20?1?培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD值，5 以氧的毫克/升（mg/L）表示。 对某些地面水以及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培 养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的 溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1mg/L以上。 为了保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常需要通入空气进行曝气 （或通入氧气），便稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水还应加入一定量的无机营 养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐等），以保证微生物成长的需要。 第 11 页 共 32 页 对于不含或含少量微生物的工业废水，其中包括酸性废水、碱性废水、高 温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD时应进行接种，以引入能分解废水中5 有机物的微生物。当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降 解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。 本方法适用于测定BOD大于或等于2mg/L，最大不超过6000mg/L的水样。5 当水样BOD大于6000mg/L，会因稀释带来一定的误差。 5 仪 器 （1）恒温培养箱（20??1?）。 （2）5—20L细口玻璃瓶。 （3）1000—2000ml量筒。 （4）玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。 在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。 （5）溶解氧瓶：250ml到300ml之间 ，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的 钟形口。 （6）虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。 试 剂 1 磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KHPO）、21.75g磷酸氢二钾24 （KHPO）、33.4g七水合磷酸氢二钠（NaHPO〃7HO）和1.7g氯化铵(NHCl)溶242424于蒸馏水中，稀释至1000ml。此溶液的PH应为7.2。 ２ 硫酸镁溶液：将22.5g七水合硫酸镁（MgSO〃7HO）溶于蒸馏水中，稀42 释至1000ml。 3 氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于蒸馏水，稀释至1000ml。 4 氯化铁溶液：将0.25g六水合氯化铁（FeCl〃6HO）溶于蒸馏水，稀释32 至1000ml。 5 盐酸溶液(0.5mol/L)：将40ml盐酸溶于蒸馏水，稀释至1000ml。 6 氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：将20g氢氧化钠溶于蒸馏水，稀释至1000ml。 7 亚硫酸钠溶液（1/2NaSO=0.025mol/L）：将1.575g亚硫酸钠溶于蒸馏23 水，稀释至1000ml。此溶液不稳定，需每天配制。 8 葡萄糖——谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（CHO)和谷氨酸（HOOC—CH61262 第 12 页 共 32 页 —CH—CHNH—COOH）在103?干燥1h后，各称取150mg溶于水中，移入1000ml22 容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。 9 稀释水：在5—20L玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在20?左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将吸入的空气先后经活性炭吸附管及水洗涤管 后，导入稀释水内曝气2-8h，使稀释水中的溶解氧接近于饱和。停止曝气亦可 导入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，臵于20?培养箱中放臵数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁 溶液、硫酸镁溶液、磷酸缓冲液各1ml，并混合均匀。 稀释水中的PH值应为7.2，其BOD应小于0.2mg/L。 5 10 接种液：可选择以下任一方法，以获得适用的接种液。 （1）城市污水，一般采用生活污水，在室温下放臵一昼夜，取上清液供 用。 （2）表层土壤浸出液，取100g花园或植物生长土壤，加入1L水，混合并静臵10min。取上清液供用。 （3）用含城市污水的河水或湖水。 （4）污水处理厂的出水。 （5）当分析含有难于降解物质的废水时，在其排污口下游3—8km处取水样作为废水的驯化接种液。如无此种水源，可取中和或经适量稀释后的废水进行 连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入适量表层土壤或生活污水，使能适 应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或检查其化学需氧量的 降低值出现突变时，表明适用的微生物已进行繁殖，可用作接种液。一般驯化过 程需要3—8d。 11 接种稀释水：分取适量接种液，加于稀释水中 ，混匀。每升稀释水中接种液加入量为：生活污水1—10ml；或表层土壤浸出液20—30ml；或河水，湖水10—100ml。 接种稀释水的PH值应为7.2，BOD值以在0.3-1.0mg/L之间为宜。接种稀5 释水配制后应立即使用。 步 骤 1 水样的预处理 第 13 页 共 32 页 （1）水样的PH值若超出6.5-7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调 节PH近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可 改用高浓度的碱液或酸液进行中和。 （2）水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰等有毒物质时，可使用经 驯化的微生物接种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数以减少毒物的浓度。 （3）含有少量游离率的水样，一般放臵1—2h，游离率即可消失。对于 游离率在短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液以去除。其加入量由下述 方法决定。 取已中和好的水样100ml，加入1+1乙酸10ml，10%（m/V）碘化钾溶液1ml，混匀。以淀粉溶液为指示剂，用亚硫酸钠溶液滴定游离碘。由亚硫酸钠溶液消耗 的体积，计算出水样中应加亚硫酸钠溶液的量。 （4）从水温较低的水域或富营养化的湖泊中采集的水样，可遇到含有过饱 和溶解氧，此时应将水样迅速升温至20?左右，在不使满瓶的情况下，充分振 摇，并时时开塞放气，以赶出过饱和的溶解氧。 从水温较高的水域或废水排放口取得的水样，则应迅速使其冷却至20?左右，并充分振摇，使与空气中氧的分压接近平衡。 2 不经稀释水样的测定 溶解氧含量较高、有机物含量较少的地面水，可不经稀释，而直接以虹吸法， 将约20?的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使产生气泡。 以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞。瓶内不应留有气泡。 其中一瓶随即测定溶解氧，另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱中，在20?1?培养5d。在培养过程中注意添加封口水。 从开始放入培养箱算起，经过五昼夜后，弃去封口水，测定剩余的溶解氧。 3 需经稀释水样的测定 （1）稀释倍数的确定：根据实践经验，提出下述计算方法，供稀释时参考。 ?地面水，有测定的高锰酸盐指数与一定的系数的乘积，即求得稀释倍数。 见下表。 有高锰酸盐指数与一定系数的乘积求得的稀释倍数表 高锰酸盐指数（mg/L） 系数 第 14 页 共 32 页 ＜5 —— 5—10 0.2、0.3 10—20 0.4、0.6 ＞20 0.5、0.7、1.0 ?工业废水，由重铬酸钾法测得的COD值来确定。通常需作三个稀释比。 使用稀释水时，由COD值分别乘以系数0.075、0.15、0.225，即获得三个稀释倍数。 使用接种水稀释时，则分别乘以0.075、0.15、0.225三个系数。 注：COD值可在测定COD过程中，加热回流至60min时，用由较核试验的 CR 苯二甲酸氢钾溶液按COD测定相同操作步骤臵备的标准色列进行估测。 （2）稀释操作： ?一般稀释法 按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水（或接种稀释水） 于1000ml量筒中，加入需要量的均匀水样，再引入稀释水（或接种稀释水）至 800ml，用带胶板的玻璃棒小心上下搅匀。搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防 止产生气泡。 按不经稀释水样的测定相同操作步骤，进行瓶装、测定当天溶解氧和培养 5d后的溶解氧。 另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水（或接种稀释水）作为空白试验。 测定5d后前后的溶解氧。 ?直接稀释法：直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。在已知两个容积相 同（其差?1ml）的溶解氧瓶内，用虹吸法加入部分稀释水（或接种稀释水），再 加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样量，然后用稀释水（或接种稀释水）使 刚好充满，加塞，勿留气泡于瓶内。其余操作与上述一般稀释法相同。 BOD测定中，一般采用碘量法测定溶解氧。如遇干扰物质，应根据具体情5 况采用其它测定。 计 算 1 不经稀释直接培养的水样 BOD（mg/L）=C-C 512 第 15 页 共 32 页 式中，C-水样在培养前的溶解氧浓度（mg/L）；C-水样经5d培养后，剩余12溶解氧浓度（mg/L）。 2 经稀释后培养的水样 BOD（mg/L）=———————— 5 式中，B—稀释水（或接种稀释水）在培养前的溶解氧（mg/L）；B—稀释12水(或接种稀释水)在培养后的溶解氧（mg/L）；f—稀释水（或接种稀释水）在1 培养液中所占比例；f—水样在培养液中所占比例。 2 注：f、f的计算：例如培养液的稀释比为3%，即3份水样，97份稀释水，12 则f=0.97,f=0.03。 12 精密度与准确度 三个实验室分析含5mg/L葡萄糖的统一分发标准液的BOD值，实验室内相5对标准偏差为5.6%；实验室间相对标准偏差为32%。 三个实验室分析含300mg/L葡萄糖（BOD为210mg/L）的统一分发标准液的5 BOD值，实验室内相对标准偏差为2.1%。 5 注意事项 （1）水中有机物的生物氧化过程，可分为二个阶段。第一阶段为有机物中 的碳和氢，氧化生成二氧化碳和水，此阶段称为碳化阶段。完成碳化阶段在20?大约需20天左右。第二阶段为含氮物质及部分氨，氧化为亚硝酸盐及硝酸盐， 称为硝化阶段。完成硝化阶段在20?时需要约100天。因此，一般测定水样BOD5时，硝化作用很不显著或根本不发生硝化作用。但对于生物处理池的出水，因其 中含有大量的硝化细菌，因此，在测定BOD时也包括了部分含氮化物的需氧量。5 对于这样的水样，如果我们只需要测定有机物降解的需氧量，可以加入硝化抑制 剂，抑制硝化过程。 （2）玻璃器皿应彻底洗净。先用洗涤剂浸泡清洗，然后用稀盐酸浸泡，最 后依次用自来水、蒸馏水洗净。 （3）在两个或三个稀释比例的样品中，凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余的溶解氧大于1mg/L时，计算结果时，应取其平均值。若剩余的溶解氧小于1mg/L，甚至为零时，应加大稀释比。溶解氧消耗量小于2mg/L，有两种可能，一是稀释倍数过大；另一种可能是微生物菌种不适应，活性差，或含毒物质浓度过大。这 第 16 页 共 32 页 时可能出现在几个稀释比中，稀释倍数大的消耗溶解氧反而较多的现象。 （4）为检查稀释水和接种液的质量，以及化验人员的操作水平，可将20ml葡萄糖——谷氨酸标准溶液用接种稀释水稀释至1000ml,按测定BOD的步骤操5作。测得BOD的值应在180—230mg/L之间。否则应检查接种液、稀释水的质量5 或操作技术是否存在问题。 （5）水样稀释倍数超过100倍时，应预先在容量瓶中用水初步稀释后，再 取适量进行最后稀释培养。 第 17 页 共 32 页 试验目的：（1）熟悉碘量法测定水中溶解氧的原理及过程 （2）掌握滴定管的使用 （3）熟练掌握滴定终点的控制 溶解在水中的分子态氧称为溶解氧。天然水的溶解氧含量取决于水体与大 气中氧的平衡。溶解氧的饱和含量和空气中氧的分压、大气压力、水温有密切关 系。清洁地面水溶解氧一般接近饱和。由于藻类的生长，溶解氧可能过饱和。水 体受有机、无机还原性物质污染，使溶解氧降低。当大气中的氧来不及补充时， 水中溶解氧逐渐降低，以至趋近于零，此时厌氧菌繁殖，水质恶化。废水中溶解 氧的含量取决于废水排出前的工艺过程，一般含量较低，差异很大。 1 方法的选择 测定水中溶解氧常用碘量法及其修正法和膜电极法。清洁水可直接采用碘 量法测定。水样有色或含有氧化性及还原性物质、藻类、悬浮物等干扰测定。氧 化性物质可使碘化物游离出碘，产生正干扰；某些还原性物质可把碘还原成碘化 物，产生负干扰；有机物（如腐殖酸、丹宁酸、木质素等）可能被部分氧化，产 生负干扰。所以大部分受污染的地面水和工业废水，必须采用修正的碘量法或膜 电极法测定。 水样中亚硝酸盐氮含量高于0.05mg/L,，二价铁低于1mg/L时，采用叠氮化钠修正法。此法适用于多数污水及生化处理出水；水样中二价铁高于1mg/L，采 用高锰酸钾修正法；水样有色或有悬浮物，采用明矾絮凝修正法；含有活性污泥 悬浊物的水样，采用硫酸铜—氨基磺酸絮凝修正法。 膜电极法是根据分子氧透过薄膜的扩散速率来测定水中溶解氧。方法简便、 快速，干扰少，可用于现场测定。 2 水样的采集与保存 用碘量法测定水中溶解氧，水样常采集到溶解氧瓶中。采集水样时，要注 意不使水样曝气或有气泡残存在采样瓶中。可用水样冲洗溶解氧瓶后，沿瓶壁直 接倾注水样或用红吸法将细管插入溶解氧底部，注入水样至溢出瓶容积的1/3— 第 18 页 共 32 页 1/2左右。 水样采集后，为防止溶解氧变化，应立即加固定剂于样品中，并存于冷暗 处，同时记录水温和大气压力。 概 述 水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾，水中溶解氧将低价锰氧化成高价锰，生成 四价锰的氢氧化物棕色沉淀。加酸后，氢氧化物沉淀溶解并与碘离子反应而释出 游离碘。以淀粉作指示剂，用硫代硫酸钠滴定释出碘，可计算溶解氧的含量。 仪 器 250—300ml溶解氧瓶 试 剂 （1）硫酸锰溶液：称取480g（MnSO〃4HO或364gMnSO〃HO）溶于水，用4242水稀释至1000ml。此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中，遇淀粉不得产生蓝色。 （2）碱性碘化钾溶液：称取500g氢氧化钠溶解于300—400ml水中，另称取150g碘化钾（或135g碘化钠）溶于200ml水中，待氢氧化钠溶液冷却后，将 两溶液合并，混匀，用水稀释至1000ml。如有沉淀，则放臵过夜后，倾出上清 液，贮于棕色瓶中。用橡皮塞塞紧，避光保存。此溶液酸化后，遇淀粉应不呈蓝 色。 （3）1+5硫酸溶液。 （4）1%（m/v）淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，再用 刚煮沸的水冲稀至100ml。冷却后，加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌防腐。 （5）0.02500mol（1/6KCrO）重铬酸钾标准溶液：称取于105—110? 烘227 干2h并冷却的重铬酸钾1.2258g，溶于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。 （6）硫代硫酸钠溶液：称取6.2g硫代硫酸钠（NaSO〃5HO）溶于煮沸放2232冷的水中，加入0.2g碳酸钠，用水稀释至1000ml。贮于棕色瓶中，使用前用0.02500mol/L重铬酸钾标准溶液标定，标定方法如下： 于250ml碘量瓶中，加入100ml水和1g碘化钾，加入10.00ml0.02500mol/L 第 19 页 共 32 页 重铬酸钾标准溶液、5ml1+5硫酸溶液密塞，摇匀。于暗处静臵5min后，用待标定的硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录用量。 （7）硫酸。 步 骤 1 溶解氧的固定 用吸管插入溶解氧的液面下，加入1ml硫酸锰溶液、2ml碱性碘化钾溶液，盖好瓶塞，颠倒混合数次，静臵。待棕色沉淀物降至瓶内一半时，再颠倒混合一 次，待沉淀物下降到瓶底。一般在取样现场固定。 1 析出碘 轻轻打开瓶塞，立即用吸管插入液面下加入2.0ml硫酸。小心盖好瓶塞，颠倒混合摇匀，至沉淀物全部溶解为止，放臵暗处5min。 3 滴定 吸取100.0ml上述溶液于250ml锥形瓶中，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液 呈淡黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录硫代硫酸钠 溶液的用量。 精密度和准确度 经不同海拔高度的4个实验室分析于20? 含饱和溶解氧6.85—9.09mg/L的蒸馏水，单个实验室的相对标准差不超过0.3%；分析含4.73—11.4mg/L溶解 氧的地面水，单个实验室的相对标准偏差不超过0.5%。 注意事项 （1）如果水样中含有氧化性物质（如游离氧大于0.1mg/L时，应预先于水样中加入硫代硫酸钠去除。即用两个溶解氧瓶各取一瓶水样，在其中一瓶加入 5ml1+5硫酸和1g碘化钾，摇匀，此时游离出碘。此淀粉作指示剂，用硫代硫酸 钠溶液滴定至蓝色刚褪，记下用量（相当于去除游离氯的量）。于另一瓶水样中， 加入同样量的硫代硫酸钠溶液，摇匀后，按操作步骤测定。 （2）如果水样呈强酸性或强碱性，可用氢氧化钠或硫酸溶液调至中性后测 定。 第 20 页 共 32 页 试验目的：（1）了解烘箱的使用方法 （2）掌握称量瓶和电子天平的使用方法及注意事项 （3）掌握重量法测定混合溶液悬浮固体（MLSS） 残渣分为总残渣、总可滤残渣和总不可滤残渣三种。总残渣是水或废水在 一定温度下蒸发，烘干后剩留在器皿中的物质，包括“总不可滤残渣”（即截留 在滤器上的全部残渣，也称为悬浮物）和“总可滤残渣”（即通过滤器的全部残 渣，也称为溶解性总固体）。 水中悬浮物的理化特性，所用的滤器与孔径大小，滤片面积和厚度，以及 截流在滤器上物质的数量和物理状态等均能影响不可滤残渣与可滤残渣得测定 结果。鉴于这些因素复杂，且难以控制，因而上述两种残渣的测定方法只是为了 实用而规定的近似方法，具有相对意义。 烘干温度和时间，对结果有重要影响，由于有机物挥发，吸着水、结晶水 的变化和气体逸失等造成减重，也由于氧化而增重。通常有两种烘干温度供选择。 103—105? 烘干的残渣，保留结晶水和部分吸着水，重碳酸盐将转化为碳酸盐, 而有机物挥发逸失甚少。由于在105?不易赶紧吸着水，故达到恒重较慢。而在 180?2?烘干时，残渣的吸着水都除去，可能存留某些结晶水；有机物挥发逸失， 但不能完全分解，重碳酸盐均转为碳酸盐，部分碳酸盐可能分解为氧化物及碱式 盐，某些氯化物和硝酸盐可能损失。 下述方法使用于天然水、饮用水、生活污水和工业废水中20000mg/L以下 残渣的测定。适合于供水、生活污水、工业废水处理过程中产生的沉淀物和悬浮 物的测定。 方法原理 将混合均匀的水样，在称至恒重的蒸发皿中于蒸气浴或水浴上蒸干，放在 103—105?烘箱内烘至恒重，增加的重量为总残渣。 仪 器 第 21 页 共 32 页 （1）瓷蒸发皿：直径90mm（也可用150ml硬质烧杯，或玻璃蒸发皿）。 （2）烘箱。 （3）蒸气浴或水浴。 步 骤 （1）将蒸发皿每次在103—105?烘箱中烘30min，冷却后称重，直至恒重 （两次称重相差不超过0.0005g）。 （2）分别取适量震荡均匀的水样（如50ml），使残渣量大于25mg臵上述蒸发皿内，在蒸汽浴或水浴上蒸干（水浴面不可接触皿底）。移入103—105?烘箱内每次烘1h，冷却后称重，直到恒重（两次称重相差不超过0.0005g）。 方法原理 将过滤后水样放在称至恒重的蒸发皿内蒸干，然后在103—105?烘至恒重，增加的重量为总可滤残渣。 仪 器 滤膜及配套滤器，或中速定量滤纸。 其余同（一） 步 骤 （1）同（一）1。 （2）用滤膜或中速定量滤纸过滤水样。 （3）分取适量过滤后水样，以下操作同（一）2。 注：采用不同滤料所测得的结果会存在差异。必要时，应在分析结果报告 上加以注明。 精密度和准确度 103—105?烘干的总可过滤残渣：人工合成水样含总可滤残渣（103—105?烘干）436.4mg/L，经7个实验室分析，测得室内相对标准偏差为6.9%；室间相对标准偏差为18.8%；相对误差为2.97%。 本方法还用于河水（黄河、淮河）、水库水、自来水、湖水、地下水、矿泉 第 22 页 共 32 页 水等15种样品的分析，其浓度范围为100.8—1575mg/L；加标回收率为95.6—103.6%。 方法原理 许多江河在雨季由于地面大量泥沙和各种污染物被雨水冲刷，使水中悬浮 物大量增加。地面水中存在悬浮物使水体浑浊，降低透明度，影响水生生物的呼 吸和代谢，甚至造成鱼类窒息死亡。悬浮物多时，还可能造成河道阻塞。造纸、 皮革、冲渣、选矿、湿法粉碎和喷淋除尘等工业操作中产生大量含无机、有机的 悬浮物废水。因此，在水和废水处理中，测定悬浮物具有特定意义。 总不可滤残渣（悬浮物）是指不能通过滤器的固体物。当用滤纸或石棉坩 埚法测定时，由于滤孔大小对测定结果有很大影响，两种方法所得结果与滤膜法 有出入，报告结果时，应注明测定方法。石棉坩埚法通常用于测定含酸或碱浓度 较高的水样的悬浮物。 从总残渣减去总可滤残渣也可得到总不可滤残渣的含量。 滤膜法 方法原理 用滤膜过滤水样，经103—105?烘干后得到总不可滤残渣（悬浮物）含量。 仪 器 （1）称量瓶：内径30—50mm。 （2）滤膜：滤膜为0.45um及相应的滤器。 步 骤 （1）将1张滤膜放在称量瓶中，打开瓶盖，每次在103—105?烘干2h，取出，放冷后盖好瓶盖称重，直至恒重为止（两次称量相差不超过0.0005g）。 （2）分取去处漂浮物后、振荡均匀的适量水样（使含总不可滤残渣大于 2.5mg），通过上面称至恒重的滤膜过滤；用蒸馏水冲洗残渣3—5次。如样品中含油脂，用10ml石油醚分两次淋洗残渣。 （3）小心取下滤膜，放入原称量瓶内，在103—105?烘箱中，打开瓶盖，每次烘2h取出，放冷后盖好瓶盖称重，直到恒重为止。 第 23 页 共 32 页 注意事项 （1） 树枝、水草、鱼等杂质应从水样中去除。 （2） 废水黏度高时，可加2—4倍蒸馏水稀释，震荡均匀，待沉淀物下降 后在过滤。 滤纸法 方法原理、步骤和计算均与滤膜法相同。 采用中速定量滤纸为滤料，用前先应用蒸馏水洗滤纸，以去除可溶性物质， 再烘干至恒重。 石棉坩埚法 方法原理 用石棉坩埚过滤水样，截留在坩埚上的总不可滤残渣（悬浮物），经103— 105?烘干称重。 仪 器 （1）多孔过滤坩埚（古氏坩埚）：30ml及配套垫圈或过滤漏斗。 （2）吸滤瓶：50ml。 试 剂 石棉悬浮液：取3g左右酸洗石棉，浸泡在1L蒸馏水中，充分搅拌制成悬浮液。或者取3g普通石棉，剪成5mm小段，用自来水漂洗，除去粉末，排出水 分后，放在200ml烧杯内，加60—70ml化学纯盐酸，浸泡48h，用自来水洗涤多次，再用蒸馏水洗至不含氯离子为止（用硝酸银溶液检验）。再把处理后的石 棉浸泡1L蒸馏水中，制成悬浮液备用。 步 骤 （1）石棉坩埚的制备：将振荡均匀的石棉悬浮液倒入多孔过滤瓷坩埚内， 慢慢抽滤，使底部铺上一层1.5mm厚的石棉层。此时，放入多孔瓷板，加入振荡 均匀的石棉悬浮液，抽滤，使瓷板上也铺一层约1.5mm厚的石棉层。用蒸馏水冲洗石棉层，直到抽滤液中无微小的石棉纤维为止。将铺好石棉的瓷坩埚放在103 —105?烘箱中每次烘干1h，取出，放入干燥器中冷却0.5h后称重，直至恒重为止。 （2）将去除漂浮物等杂质的振荡均匀的水样适量（使含总不可滤残渣大于 第 24 页 共 32 页 25mg），在抽滤下慢慢加入上述称至恒重的石棉坩埚内，抽滤完毕，用水洗涤残 渣数次。如水样含油脂，用10ml石油醚分两次淋洗坩埚内残渣。 （3）将坩埚放在103—105?烘箱中每次烘干1h，取出放入干燥器中冷却0.5h后称重，直至恒重为止。 第 25 页 共 32 页 试验目的：（1）了解磷（总磷、溶解性正磷酸盐和溶解性总磷）的几种测 定方法 （2）掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及有关计算方法 （3）熟悉水样预处理的几种方法 （4）熟悉钼锑抗分光光度法测定总氮的原理及过程 在天然水和废水中，磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在，它们分为正磷酸 盐，缩合磷酸盐（焦磷酸盐、偏磷酸盐和多磷酸盐）和有机结合的磷酸盐，它们 存在于溶液中，腐殖质粒子中或水生生物中。 天然水中磷酸盐含量较少。化肥、冶炼、合成洗涤等行业的工业废水及生 活污水中常含有大量的磷。磷是生物生长的必需元素之一，但水样中磷含量过高 （如超过0.2mg/L），可造成藻类的过度繁殖，直至数量上达到有害程度（称为 富营养化）,造成湖泊、河流透明度 降低，水质变坏。 1. 方法的选择 水中磷的测定，通常按其存在的形式，而分别测定总磷、溶解性正磷酸盐 和总溶解性磷。 磷酸盐的测定，可采用钼锑抗分光光度法；氯化亚锡还原钼蓝法；离子色 谱法。 2 样品的采集和保存 总磷的测定，于水样采集后，加硫酸酸化至PH?1保存。溶解性正磷酸盐的测定，不加任何试剂，与2—5?冷处保存，在24h内进行分析。 采集的水样立即经0.45um微孔滤膜过滤，其滤液供可溶性正磷酸盐的测定。 滤液经下述强氧化剂的氧化分解，测得可溶性总磷。取混合水样(包括悬浮物)， 也经下述强氧化剂分解，测得水中总磷的含量。 过硫酸钾消解法 仪 器 第 26 页 共 32 页 医用手提高压蒸汽消毒器 50ml磨口具塞比色管 试 剂 5%过硫酸钾溶液：溶解5g过硫酸钾于水中，并稀释至100ml 步 骤 （1）吸取25ml混匀水样（必要时，酌情少取水样，并加蒸馏水至25ml，使含磷量不超过30ug）于50ml具塞比色管中，加入过硫酸钾溶液4ml，加塞后管口包一小块双层纱布并用线扎紧，以免加压加热时玻璃塞冲出。将具塞比色管放 在大烧杯中，臵于高压蒸汽消毒器中加热，开始计时，30min后停止加热（锅内压力最高可达0.15Mpa，蒸汽相对温度为121—126?），待压力指示针降至零后， 取出放冷。 （2）空白试验和标准溶液系列也经同样的消解操作。 注意事项： （1）如采样时水样用酸固定，则用过硫酸钾消解前将水样调至中性。 （2）如消解时用民用压力锅，在加热至顶压阀出气孔冒气时，锅内温度约 为120?。 （3）阅读医用手提高压蒸汽消毒器的使用说明，熟悉其操作步骤及注意 事项。 概 述 1 方法原理 在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生成磷钼杂多酸， 被还原剂抗血酸还原，则变成蓝色络合物，通常即称磷钼蓝。 2 干扰及消除 砷含量大于2ml/L有干扰，可用硫代硫酸钠去除。硫化物含量大于2mg/L有干扰，在酸性条件下通氮气可以去除。六价铬大于50mg/L有干扰，用亚硫酸钠去除。亚硝酸盐大于1mg/L有干扰，用氧化消解或加氨磺酸均可以去除。铁浓 度为20mg/L，使结果偏低5%；铜浓度达10mg/L不干扰；氟化物小于70mg/L是 第 27 页 共 32 页 允许的。海水中大多数离子对显色的影响可以忽略。 3 方法的适用范围 本方法最低检出浓度为0.01mg/L（吸光度A=0.01时所对应的浓度）；测定 上限为0.6mg/L。 可适用于测定地面水、生活污水及日化、磷肥、机加工金属表面磷化处理、 农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的正磷酸盐分析。 仪 器 分光光度计 试 剂 （1）1+1硫酸。 （2）10%（m/V）抗坏血酸溶液：溶解10g抗坏血酸于水中，并稀释至100ml。该溶液贮存在棕色玻璃瓶中，在冷处可稳定几周。如颜色变黄，则弃去重配。 （3）钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵于100ml水中。溶解0.35g酒石酸锑氧钾于100ml水中。 在不断搅拌下，将钼酸铵溶液徐徐加到300ml1+1硫酸中，加酒石酸锑钾溶 液并且混合均匀。 试剂贮存在棕色的玻璃瓶中于冷处保存。至少稳定2个月。 （4）浊度—色度补偿液：混合两份体积的1+1硫酸和一份体积的10%（m/V）抗坏血酸溶液。此溶液当天配制。 （5）磷酸盐贮备溶液：将磷酸二氢钾于110?干燥2h，在干燥器中放冷。称取0.217g溶于水，移入1000ml容量瓶中。加1+1硫酸5ml，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0ug磷。 （6）磷酸盐标准溶液：吸取10.00ml磷酸盐贮备液250ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含2.00um磷。临用时现配。 步 骤 1 校准曲线的绘制 取数支50ml具塞比色管，分别加入磷酸盐标准适用液0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0ml，加水至50ml。 （1）显色：向比色管中加入1ml10%（m/V）抗坏血酸溶液，混匀，加30s 第 28 页 共 32 页 后加2ml钼酸盐溶液充分混匀，放臵15min。 （2）测量：用10mm比色皿，于700nm波长处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度。 2 样品测定 分取适量水样（使含磷量不超过30ug）用水稀释至标线。以下按绘制校准曲线的步骤进行显色和测量。减去空白试验的吸光度，并从校准曲线上查出含磷 量。 注意事项 （1）如试样中浊度或色度影响测量吸光度时，需做补偿校正。在50ml比 色管中，水样定容后加入3ml浊度补偿液，测量吸光度，然后从水样的吸光度中 减去校正吸光度。 （2）室温低于13?时，可在20—30?水浴中，显色15min。 （3）操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h，或用不含磷酸盐的洗涤剂刷洗。 （4）比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附的磷钼蓝显 色物 第 29 页 共 32 页 试验目的：（1）了解余氯的测定方法 （2）掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及有关计算方法 （3）熟悉N，N-二乙基对苯二胺光度法测定余氯的原理及过程 氯以单质或次氯酸盐形式加入水中后，经水解生成游离性有效氯，包括含 水分子氯、次氯酸和次氯酸盐离子等形式。其间的相对比例决定于水的PH和温度，在多数水体的PH下，主要是次氯酸和次氯酸盐离子。 游离性氯与铵和某些含氮化合物起反应，生成化和性有效氯。氯与铵反应 生成氯胺：一氯胺、二氯胺和三氯化氮。游离性氯与化合性氯二者能同时存在于 水中。氯化过的污水和某些工业废水的出水，通常只含有化合性氯。 水中余氯的来源主要是饮用水或污水中加氯以杀灭或抑制微生物；电镀废 水中加氯以分解有毒的氰化物。 氯化作用产生不利的影响是可使含酚的水产生氯酚臭；还可生成有机氯化 物，并可因存在化合性氯而对某些水生物产生有害作用。 1 方法的选择 碘量滴定法适用于测定总余氯含量＞1ng/L的水样。以DPD为指示剂，用硫酸亚铁铵溶液进行滴定，可分别测定游离性有效氯、一氯胺、二氯胺和三氯化氮。 当含量较低时，还可采用DPD比色法。 2 水样的采集和保存 余氯在水中很不稳定，尤其含有有机物或其他还原性无机物时，更易分解 而消失。因此，余氯应在采集现场进行测定。 概 述 1 方法原理 游离氯在PH6.2—6.5与N，N-二乙基对苯二胺（DPD）直接反应生成红色化 第 30 页 共 32 页 合物，用分光光度法进行测定。 2 干扰及其消除 ?氧化锰和化合性氯都有干扰，可单独测定，并在结果计算中予以校正。 ?其他氧化剂也有干扰，如溴、碘、溴化氨、碘化氨、臭氧、过氧化氢、 铬酸盐、亚硝酸盐、三价铁离子和铜离子。常会遇到的二价铜离子（＞8mg/L）和三价铁离子（＞20mg/L）的干扰，可被配入缓冲液和DPD试液中的Na-EDTA2所掩蔽，铬酸盐的干扰可以加入氯化钡消除。 3 方法的适用范围 本方法可应用的含氯浓度范围为0.05—1.5mg/L游离氯。超过上限浓度的 样品可稀释后测定。 本方法适用于经加氯（或漂白粉等）处理的饮用水、医院污水、造纸废水、 印染废水等的监测。 仪 器 （1）容量瓶：100ml。 （2）分光光度计：适用于510nm和配备有光程长10nm或更长的比色皿。 试 剂 （1）缓冲溶液：在水中依次溶解0.8g二水合Na-EDTA、24g无水磷酸氢二2 钠、46g磷酸二氢钾、0.020g氢化汞。稀释至1000ml并混匀。 （2）DPD溶液：在约250ml水中加入2ml硫酸、0.2g二水合Na-EDTA、1.1g2无水DPD硫酸盐（或五水合DPD硫酸盐1.5g）。稀释至1000ml，移入棕色瓶内保存。一个月后或褪色即重配。 （3）碘化钾晶体。 （4）硫酸溶液：取800ml水，并于不断搅拌下小心的加入54ml硫酸，冷却至室温并稀释至1000ml。 （5）氢氧化钠溶液：称取80g氢氧化钠颗粒加入盛有800ml水的锥形烧瓶内。不断搅拌至所有的颗粒完全溶解，待溶液冷至室温后稀释1000ml。 （6）次氯酸钠溶液：由稀释商品次氯酸钠溶液制备。 （7）二苯胺磺酸钠指示液：溶解0.3g二苯胺磺酸钠于100ml水中。 （8）碘酸钾贮备液：称取于120—140?烘干2h的碘酸钾1.006g，溶解于 第 31 页 共 32 页 水中，移入1000ml容量瓶内，加水稀释至标线，并混匀。 （9）碘酸钾标准溶液：吸取10.00ml贮备液臵1000ml容量瓶中，加入约1g碘化钾并加水至标线。使用当天配臵此溶液，臵棕色瓶中备用。1ml此标准溶液含10.06ug碘酸钾，相当于10.0ug氯。 步 骤 1 试样制备 检查水样是否接近中性，如偏酸或偏碱，用稀碱液或稀酸液中和之，或在 下一步操作中增大缓冲液的用量。 2 校准曲线的绘制 向一系列100ml比色管中，分别加入碘酸钾标准溶液0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.00、15.00ml,加水至50ml。加入1.0ml硫酸溶液，并于1min后加入1.0ml氢氧化钠溶液，用水稀释至标线。各管分别转移至在不超过1min前加入5ml缓冲液和5mlDPD试剂的第二个100m比色管中，混匀。然后将各配臵好的标 准溶液相继装入10mm比色皿，并在2min内，以水为参比于510nm波长下测量吸光度。最后绘制校准曲线。 注：分别制备各个标准溶液并立即测量，以免缓冲液和DPD的混合液在操作过程中放臵过久而出现虚假的红色。 3 测 量 取试样100ml，移至盛有5ml缓冲液和5mlDPD试剂的100ml比色管中。将此溶液注入比色皿，并立即按校准曲线所用相同条件进行测量吸光度。记录从校 准曲线上读取的浓度。 4 干扰校正 为校正氧化锰的干扰，臵100ml试样于250ml 锥形瓶中，加入1ml亚砷酸钠溶液或硫代乙酰胺溶液，混匀，再加入5.0ml缓冲液和 5.0mlDPD试剂，混匀。将此溶液注入比色皿，并立即按校准曲线所用相同条件进行测量。记录从校准曲 线读取的氧化锰相当于氯的浓度。 第 32 页 共 32 页