复方替硝唑栓剂体内外抗阴道毛滴虫研究

复方替硝唑栓剂体内外抗阴道毛滴虫研究 药物研究2007年第l6卷第3期 复方替硝唑栓剂体内外抗阴道毛滴虫研究 王震,景荣芳,朱兴年,王雪晴,宋美芳: (1.南通大学附属海安医院,江苏海安226600;2.复旦大学附属妇产科医院,上海 200011) 搞耍:目的观察复方替硝唑栓剂的体内外抗阴道毛滴虫作用.方法将临床确诊的滴 虫性阴道炎患者100例随机分为两纽,试验组用复方 替硝唑栓治疗,对照组用双唑泰栓治疗,每晚睡前放入阴道1粒.6d为1个疗程,共 治疗2个疗程;选用临床分离的阴道毛滴虫9棒.观察 复方替硝唑栓的体外抗阴道毛滴虫作用.结果临床治愈率复方替硝唑栓为100%, 双唑泰栓为78.7%,两者有显着性差异(P<0.05);复 方替硝唑栓体外抗阴道毛滴虫的抑虫50%浓度(MIG.),押虫90%浓度(MICgo)及最 低杀虫浓度(MBC)范围均低于双唑泰栓.结论复方 替硝唑栓体内外抗阴道毛滴虫作用显着,比双唑泰栓疗效更佳. 关?词:复方替硝唑栓;双唑泰栓;阴道毛滴虫 中图分类号:1015;R978.61文献标识码:A文章鞠罨:1006_-4931(2007)o3—00O4一 O2 StudyonAntitrichomonalEffectsofCompoundTinidazoleSuppository/nVivoandinVitro [gangZhen,Jingao~a,C,ZhuXingnian,WangXueqingI,SongMei/a,~ f1.AffiliatedtiaisnHospitalofNantongUniversity,Haisn,Jiangsu,China226600; 2.AffdlatedObstetricsandGynecologyHospitalofFudanUniversity,Shanghai,China2o0o1]) Al~dract:ObjectiveToobservetheantitrichomonaleffectsofcompoundtinidazolesuppositoryinvivoandinvitro.MethodsThe100patients withvaginaltrichomonasiswerereceived.Theywererandomlydividedinto2groups.Thetestinggroupwithcompoundtinida~lesuppository andthecontrollinggroupwithmetronidazole,clotrimazoleandchlorhexidineacetatesuppository.Eachpatientinsertedasuppositoryintovagina everynightbeforegoingtobed.Onetherapeuticalcoursewas6d.altogethertWOtherapeuticalcourses.The9strainsoftrichomonalfrompatients wereisolatedandselected.Theantitrichomonaleffectsofcompoundtinidazolesuppositoryinvitrowa8Dbse~ed.ResultsTheclinicalrecovering rateofcompoundtinidazohsuppositorywas100%andmetronidazole.clotrimazoleandchlorhexidineacetatesuppositoryw略78.7%.nIe resultsshowedsignificantdifferenebetweenthetWO~oups(P<0.05).The』 lfMICgoandMBCforcompoundtinidazdesuppositorywe他 lowerthanmetronidazole,clotrimazoleandchlorhexidineacetatesuppository,respectively.ConclusionTheantitrichomouldeffectsofcompound tinidazolesuppositoryinvivoandvitroaresignificantandarebetterthanmetronidazde.clotrimazoleandchlorhexidineacetatesuppository. Keywords:compound6nidazolesuppository;metronidazole,clotrimazoleandchlorhexidine.acetatesuppository;trichomonasvagimdis 阴道炎是妇科常见病,多发病,其中滴虫性阴道炎占48%,发 病率较高,且常伴有细菌性或霉菌性感染,目前国内治疗药物主要 有双唑泰栓,康妇消炎栓及替硝唑栓等.虽然各有特色.但均程度 不同地存在某些缺陷.南通大学附属海安医院创新研制了广谱,高 效,速效,低毒的复方替硝唑栓剂,主药为替硝唑,氧氟沙星,酮康 唑….药效学研究显示,3种药物配伍有较强的协同作用,对引起妇 科炎症的各种致病因子有强大的杀灭作用;临床应用显示,该制剂 对各型阴道炎均具有显着疗效【2Io笔者就该制剂的体内外抗阴道 毛滴虫的研究报道如下. l体内试验 1.1病例选择 临床确诊为滴虫性阴道炎患者100例.年龄23—68岁,平均 37.3岁.就诊前2周无阴道用药史,对替硝唑,氧氟沙星,酮康唑无 过敏史.非妊娠和哺乳期. 1.2方法 采用随机单盲法将患者分为2组.试验组(53例)给予复方替 硝唑栓剂治疗(南通大学附属海安医院自制,批号为010923),对照 组(47例)给予双唑泰栓剂治疗(安徽天洋药业有限公司,批号为 010612).均每晚1枚,阴道给药,6d为1个疗程,连续给药2个疗 程.停药1周后来院复查(内容包括询问用药后症状,妇科检查,实 验室检查). 1.3疗效 痊愈:l临床症状及体征消失,白带常规(一);有效:临床症状及 体征明显好转或有所好转,白带常规(?);无效:临床症状及体征 无改变,白带常规(+). 1.4结果 100例患者无一例出现毒副反应,两组疗效比较觅1. ? 4? 2体外试验 2.1材料 药品:试验组用药为复方替 硝唑栓剂(南通大学附属海安医 院自制,批号为050601);对照 组用药为双唑泰栓剂(安徽天洋 表l雨妞临床疗娥比较【倒(%)】 蛆捌喜蠢有羲盂鼓 斌扭(;53)53(100}'o(o)o(o) 对JllI担(n-'47J37(78.7J10(21.,J0(0J 洼:经卡方格验,与时照担比较. .P(0.05. 药业有限公司,批号为050517).阴道毛滴虫:由临床滴虫性阴道 炎患者送检标本分离获得,且患者均未经治疗,并依照文献【4】鉴 定确认,共9株.培养基:以不含任何抗生素的Johson氏CPLM培养 基为基础培养基,调节pH值至5.8—6.O,灭菌后每管分装8.0mL, 冷却后每管加人马血清1.0mL,备用. 2.2方法'.' 2.2.1接种管准备:精确称取样品(复方替硝唑栓和双唑泰栓)各 1份,以无菌蒸馏水稀释至1mg/mL(分别以替硝唑和甲硝睦含量 计算),再依次倍比稀释,按1:9加入培养基,最终药物质量浓度为 100.50,25,l2.5,6.25,3.13,1.6,0.8.0.4,0.2~s/mL同时设 CPLM基础培养基作空白对照. 2.2.2抑虫试验:将已经纯化后的新鲜活泼虫体,加培养液低速 离心(1000r/rain,10rain),清洗3次后浓集.经计数后制成含虫体 1.5x1o6个/mL的阴道毛滴虫悬液,每管揍种0.5m接种后于 37?恒温培养72h,用滴管从管底吸取培养液0.05mL,滴于载玻 片上,覆上盖玻片镜检(放大100倍).整个片中无滴虫者为"一", 表示有抑制作用;整个片上有2—4个虫体为"+",每个视野有2— 4个虫体为"++",每个视野有5—10个虫体为"+++",每个视 野虫体>10个为"++++".表示无抑虫作用.对阴道毛滴虫有抑 制作用的药物管的最低质量浓度为该药对阴道毛滴虫的最低抑制 浓度(MIC),并分别求出抑虫浓度范围(MIC,~),抑虫50%浓度 2007年第16卷第3期药物研究 秀山金银花,?叶,茎中绿原酸的检测及其抑菌作用研究 梅林. (重庆大学化学化工学院,重庆400044) 摘?:目的测定金银花厦其叶片,茎中绿原酸的含量,考察其抑茼效果.方法采用离效液相色谱法(HPLC法)和最低抑茵浓度(肘,C)测定 法.色谱柱为PhenomenexCIB拄(250mmx4.6mm,5p.m),流动相为乙腈一pH=2.04 的0.4%磷酸(13:87,V/V),流速为0.5mL/min,检 测波长为327nm.结果金银花及其叶片,茎中绿原酸的含量分别为6.1%,1.8%,0o金 银花提取液和金银花叶片提取液对大肠杆茵的 MIC分别为18.75mg/mL和150mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC分别为 4.6875mg/mL和37.5mg/mL.结论金银花及其叶片中绿 原酸含量高,抑茵作用强.仝银花叶片具有较高的开发价值,药效可代替金银花. 关t词:金银花;绿原酸;抑茵;高效液相色谱法 中圈分类号:R284;R91S;It282.71文献标识码:A文章编号:1006—4931(20o7)O3— 000S一03 DeterminationofChlorogenicAcidfromFiosLoniceYaeorLeaf~andItsAntibacterialActivities MeiLin (CollegeChemistryandChemicalEngineering,ChongqingUniversity,Chongqing,China400044) Ab|ct:ObjectiveTodetecttheamountofchloragenicacidinbud,leafandstemofloniceraerespectivelyandtoexaminetheeffects 0fitsantibacterialactivities.MethodsHiglIperformanceliquidchromatography(HPLC)wasusedtodeterminetheamountofchlomgenic acidandtheantibacterialeffectWaSexpressedbyitsminimalinhibitoryconcentration(MIC).ThecolumnwasPhenomenexClschromatog— mphycolumn(250mmx4.6mm.5m);themobilephasewasacetonitrile一 0.4%,phosphonicacid(13:87,V/V),pH=2.04;theflow ratewas0.5mL/min;A=327nm.ResultsThecontentsofchlomgenicacidinloniceraebudanditsleaf,stemwere6.1%,1.8% and0respectively.The肘,Cofextractsfrom? lon~eraeanditsleafagainsteschcrichiacoilwere18.75mg/mLand150mg/mL respectively;theMICagainststaphylococcusaureuswere4.6875mg/mLand37.5mg/mLrespectively.ConclusionLeafofoslonwerae hasstrongexploitingvalue,andthedrugeffectofloniceraecanbereplacedbychlomgenicacidextractedfromitsleaf. Ke7woras,ftoslonicerae;chlomgenicacid;antibactefiM;HPLC 金银花为忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花 蕾或带初开的花"1,其化学成分为绿原酸(chlorogenicacid,CHA), 异绿原酸,挥发油,咖啡酸,黄酮类化合物等,其中CHA是金银花 的主要药效活性成分,其含量高低是评价金银花质量的重要依据. 秀山金银花为道地药材,其副产物叶片的产量较高,却一直未能加 以利用.据报道,金银花叶片粗提物的抑菌效果基本等同子金银花 ,提取金银花叶片的试 粗提物一1,具有较高的开发利用价值.目前 验已有部分文献报道,多采用紫外分光光度法(UV法)[31和薄层色 谱法"I测定其中CHA的含量,但uv法难以测定单一成分.而薄层 扫描法的测量精度不高.笔者采用准确可靠,专属性强的高效液相 色谱法(RPLC法)对金银花及其叶片,茎中CHA的舍量进行测定, 并对其提取液的抑菌效果进行了评价,报道如下. 1仪器和试药 (MIC,o),抑虫9O%浓度(c帅). 2.2.3杀虫试验:将抑虫试验中有抑制作用的培养管,经1000r/rain 离心15rain后,吸取管底沉淀物0.2mL,转种于新鲜的不舍任何 抗生素的CPLM培养基中,再培养72h,离心后,从管底吸取培养 液0.05mL,滴于载玻片上镜检观察.有完整且活动的虫体,表示无 杀虫作用;虫体破碎或无虫体,表示有杀虫作用.对阴道毛滴虫有 杀灭作用的药物管的最低质量浓度为该药对阴道毛滴虫的最低杀 虫浓度(MBC). 2.3结果 结果见表2. 3讨论 体内试验结果 表2两组体外抗阴道毛滴虫效果比较(~g/mL) 显示,复方替硝唑栓治疗滴虫性阴道炎不仅治愈率高,优于双唑泰 栓.而且无毒副反应.体外试验结果显示,复方替硝唑栓抗阴道毛滴 LC一10AT(岛津)液相色谱系统(7255i智能进样器,岛津SPD一 10A型紫外检测器,HW一2000色谱工作站);AS系列超声波发生 器(天津奥特塞思特仪器有限公司);pHS一3C精密pH计(上海雷 磁精密仪器厂).CHA对照品(中国药品生物制品检定所,批号为 120631—200412);金银花(重庆市秀山县名叶中药材有限公司); 大肠杆菌(Eacherichiacoli),金黄色黼萄球菌(Staphylococcusatll~), 绿脓杆菌(Pseudomonasaemnosa),枯草杆菌(Bacillussubtilis),白 色念珠菌(Candidaalbicans)等购自重庆市疾病控制中心;金银花叶 片及茎(重庆市秀山县农业局提供);乙腈,甲醇,磷酸为分析纯.试 验用水为自制蒸馏水. 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:PhenomenexCl8柱(250mmx4.6mm,5tLm);流动相: 虫的MICs.,MICgo及MBC范围均低子双唑泰栓,说明其体外作用 优于双唑泰栓.综上所述,复方替硝唑栓体内外抗阴道毛滴虫作用 显着优于双唑泰栓,且临床治愈率高达100%.本研究为临床治疗 滴虫性阴道炎用药选择提供了依据. 参考文1lI: 【I】王震,朱兴年,冒填,等.复方替硝唑栓剂制备厦质量控制【J】.中 国药房,2000,II(4):158. 【2】刘春红.程风川,昊新华,等.复方替硝唑栓治疗阴道炎宫颈糜烂100 例疗效观察【J】.中因药业.2001,10(11):59—60. 【3】周旭光.复方替硝唑橙与腹唑泰栓治疗滴虫性阴道炎102侧效果比较 【J】.南通医学院,2003,23(3):333, 【4】粱浩昆.医用微生物擘【M】.广州:广东科技出版社.1991:245. 【5】郭青龙,倪孟祥,王龙.替硝唑冻剂对阴遭毛滴虫的疗效【J】.中国 药科大学,1996,27(7):432—434, (收稿日期:2006—11—23) ? 5?