清火排毒化肿胶囊急性毒性及长期毒性研究

清火排毒化肿胶囊急性毒性及长期毒性研究 清火排毒化肿胶囊急性毒性及长期毒性研 究 ?482?西南国防医药2004年第14卷第5期 氧治疗,取得理想的实验结果.研究明,沙土鼠脑 缺血30min再灌注期,二者结合应用,不仅能明显减 轻缺血急性期脑组织损伤,同时也能减轻神经细胞凋 亡,这可能与牛磺酸既能抑制神经元凋亡,又能对抗 自由基对脑组织的损伤有关.其确切的机制尚有 待进一步研究. 参考文献 (13KahnKThenaturalcourseofexperimentalcerebralinfarction inthegerbil.Neurology,1972;22:510 (23刘磊,刘景昌,辛佩珠,等.高压氧减轻沙土鼠脑缺血时 脑组织间隙水肿机制的研究.第三军医大学,2001; 23(1):42 (33刘景昌.高压氧对缺血,缺氧性疾病的治疗效用及机理 EMM3.刘景昌主编:高压氧医学的理论与新技术.北京: 军事医学科学出版社,1998:142 ]周建光,刘景昌,方以群.高压氧对脑缺血再灌注海马 CA1区神经元凋亡作用的研究.中国应用生理学杂志, 2001;17(1):82 (53YinD.ZhouC,Kusakar,eta1.Inhibitionofapoptosisby hyperbaricoxygeninaratfocalcerebralischemicmode1.J CerebBloodFlowMetab,2003Jul;23(7):855 C63RosenthalRE.SilbergleitR,HofPR,etaLHyperbar/coxygen reducesneuronaldeathandimprovesneurologicaloutcomeafter canine阻rdiacarrest.Stroke,2003;34(5):1311 (73赵士福,蔡文琴.牛磺酸对大鼠脑缺血再灌注损伤中细 胞凋亡的影响.中国病理生理杂志,1999;15(5):441 (83GuoJ,IjR,ZhaoP,eta1.Eff~toftaurineincombinationwith electroacupunctureonneuronaldaiT~efollowingtransientfocal cerebralischemiainrats.AcupunctEl~trotherRes,2002;27 (2):129 清火排毒化肿胶囊急性毒性及长期毒性研究 何洪静,徐贵丽,练生利. (1.成都军区昆明总医院药剂科,昆明650032;2.重庆市九龙坡区第二人民医院,重庆400052) 收稿日期:2004—04—20 摘要目的:探讨清火排毒化肿胶囊单次或多次给药后,动物出现的毒性反应及其性质和程度,寻找药物的安全范围,为 临床用药提供科学依据.方法:急性毒性试验为测定小鼠最大给药量方法.长期毒性试验为大鼠连续以清火排毒化肿 胶囊2.7g/kg,1.35g/kg或0.45g/kg?体重,灌胃给药12周,观察大鼠各项生理,病理指标变化,停药后继续观察2周. 结果:清火排毒化肿胶囊对小鼠一日内灌胃的最大药量为10.8g/kg?体重.长期毒性试验结果显示,1.35g/kg组和 2.7g/kg组与对照组比较,WBC分类和CR有统计学意义(P<O.05或P<O.01);给药组与对照组比较,心,肺脏器权重 系数差别有统计学意义(P<O.05或P<O.01);病理组织学检查,高剂量组和对照组比较无统计学意义.恢复期末,给 药组与对照组比较,各项观察指标均无统计学意义(P>O.05).结论:清火排毒化肿胶囊按拟定临床剂量及疗程服用是 安全的. 关键词清火排毒化肿胶囊;急性毒性;长期毒性 中图分类号R286文献标识码A文章编号1004—0188(2004)05—0482—04 Studyofacuteandlong-termtoxicityofQinghuoPaiduHuazhongcapsule HEHong—jing.,XUGui—li,I.IANSheng— li.DepartmentofPharmacy,KunmingGeneralHospitalofChengduMilitaryCommand, Kunming,650032,China.*:Address:DepartmentofPharmacy,KunmingGeneralHospitalofChengduMilitaryCommand,I~uan Road.Kunming,Yunan,650032,China. AbstractObjective:Tostudytheacuteandlong— terratoxicityofQinghuoPaiduHuazhongcapsuleandtodetermineitssaferangein theexperimentsthroughobservingtestedanimalsreactionstothisdrugaftertheyweregivenasingledoseormultipledoses.Methods: TheITlaximumdoseformicewasdeterminedbytheacutetoxicitytest.Wthlong— terratoxicitytest,ratswerecontinuouslyfedwith QinghuoPaiduHuazhongcapsuleat2.7g/l 【g,1.35g/kgand0.45g/kgadayfor12weeks,respectively,andtheirphysiologicaland pathologicalindexeswereobservedfor14weeks.Results:Themaximumdoseadaywas10.8g/kgformice.Theresultsoflong—term toxicitytestindicatedthatthewhitebloodcellclassificationandcreatininelevelof1.35g/kggroupand2.7Og/kggroupwere significantlydifferentfromthoseofthecontrols(P<0.01or0.05).Thecardiacandpulmonaryweightcoefficientoftheexperimental groupsweresmallerthanthoseofthecontrolgroup(P<0.01or0.05),butnosignificantpathologicaldifferencewasfoundbetween2.7 g/kggroupandthecontro1.AfterwithdrawalofQinghuoPaiduHuazhongcapsule,abovechangesoftheexperimentalgroupsdisappeared gradually.Conclusion:Itissafepatients'totakeorallyQinghuoPaiduHuazhongcapsuleforalongtime. Keywords:QinghuoPaiduHuazhongcapsule,acutetoxicity.long—termtoxicity 西南国防医药2004年第14卷第5期?483? 清火排毒化肿胶囊是一种纯中药制剂,主要由半 枝莲,黄芪,灵芝,川黄连,黄芩等多味中药组成.该 组方具有扶正,驱邪,消炎,抗肿瘤及提高免疫力的功 效.本试验通过观察清火排毒化肿胶囊单次或多次 给药后动物出现的毒性反应情况,寻找药物的安全剂 量范围,为临床安全用药提供科学依据. 1材料与方法 1.1药物与试剂清火排毒化肿胶囊,0.3g/粒,3粒/ 次,3次/d,批号:20030312.由中国人民解放军云南省 蒙自军分区医院李宝鸿医生提供,临用时以0.1西黄 蓍胶溶液配成所需浓度.试剂:西黄蓍胶(BP8O),批号: 880603,上海市川沙县金联药品分装厂生产. 1.2试验动物健康ICR小鼠,雌雄各半,体重为 (18.95?0.82)g.SD大鼠,雌雄各半,体重(87.2? 6.6)g,以上动物均由云南省白药集团股份有限公司 动物中心提供,动物合格证:滇实动证第2002106号. 1.3动物饲养管理条件饲料由成都军区昆明总医 院实验动物中心提供.动物房的湿度(54?6),温 度(23士2)?,光照及通风条件良好. 2方法 2.1急性毒性试验取健康ICR小鼠2O只,雌鼠体 重为(18.51士0.82)g,雄鼠体重为(19.38?0.58)g. 根据预试验结果,取清火排毒化肿胶囊的药粉5.4g 溶于0.1西黄蓍胶溶液中,配成20ml溶液,禁食不 禁水24h后,按0.8ml/20g体重(小鼠一次灌胃量不 能超过lml,为排除过饱引起死亡,故予0.8ml/20g体 重灌胃)等容量灌胃,给药后连续观察7d,记录小鼠中 毒和死亡情况. 2.2长期毒性试验大鼠于试验前适应性喂养1 周,观察动物活动,进食及排泄等情况,挑选无异常 者,随机分成4组,每组20~30只(高剂量组3O只)雌 雄各半,分笼饲养,每笼5只.分别设生理盐水(O)对 照组和清火排毒化肿胶囊2.7,1.35,0.45g/kg三个 组(按6Okg体重,成人每天服用2.7g计,相当于人用 剂量的6O,3O,1O倍).灌胃给药1次/d,连续12周. 灌胃容积为10ml/kg,每周称体重1次,并根据体重变 化情况调整给药量.每日观察大鼠活动,毛发,排泄 物等一般情况,同时记录饲料消耗量.于最后一次给 药24h后,每组各取1O只动物(雌雄各半,其余动物 继续观察2周,以观察可能出现的延迟性毒性反应) 股静脉取血检查血常规,肝肾功能,而后放血处死,对 脏器进行全面肉眼尸检,并对心,肝,脾,肺,肾,脑,肾 上腺,胸腺,睾丸,子宫,卵巢等脏器进行称重,计算脏 器系数.再对生理盐水对照组和高剂量组动物的心, 肝,脾,肺,肾,脑,气管,垂体,甲状腺,胸腺,胰腺,肾 上腺,胃,十二指肠,睾丸,前列腺,附睾,子宫,卵巢, 肠系膜淋巴结等进行病理组织学检查. 2.3统计处理结果均用j?5表示,采用方差, 工检验. 3结果 3.1急性毒性试验观察期结束时全部小鼠均存活,一 般情况良好,活动自如,进食,饮水正常.试验结束时,动 物体重均有增长,雌鼠体重为(23.07?1.OO)g,雄鼠体重 为(26.00?0.91)g.结果测得清火排毒化肿胶囊经胃灌 注最大耐受萤(Mn))为10.8g/kg?体重. 3.2长期毒性试验 3.2.1一般情况给药期结束后,全部动物活动,饮 水,毛皮未见明显异常,给药组动物体重和每日饲料 消耗量与对照组比较,无显着差异性,P>0.05. 3.2.2血液学检测结果给药12周后,1.35g/kg组 和2.7g/kg组与对照组比较,WBC分类有统计学意 义(P<O.01).RBC计数,Hb含量,PLT及网织红细 胞计数等均无统计学意义(P>O.05,见表1). 表1清火排毒化肿胶囊12周血液学检测结果(i士s,n=10) 注t与生理盐水组比较,?P<0.05,?P<0.01 3.2.3血液生化指标检测结果给药12周后, 1-35g/kg组和2.7g/kg组血清肌酐(CR)值较对照 组低,且有统计学意义(P<0.05).GLU,CHO, AI,AST,ALP,TP,ALB,TB,UREA及A/G等各 基础指标无统计学意义(P>0.05,见表2,3). ?484?西南国防医药2004年第14卷第5期 表2清火排毒化肿胶囊12周血液生化指标检测结果(~-t-s,n一1O) 表3清火排毒化肿胶囊12周血液生化指标检测结果(~-t-s,n一1O) 注:与对照组组比较,?P<0.05 3.2.4尸检结果给药12周时,大体解剖可见高剂 量组2例和对照组1例子宫肥大,表面光滑,色泽正 常,未见充血,炎症等异常改变.用检验,与对照 组比较,无统计学意义(P>O.05).给药组与对照组 比较,心,肺权重系统有统计学意义(P<O.05或P< 0.01).其余脏器权重系数无统计学意义(P>O.05, 见表4). 表4清火排毒化肿胶整12周主要脏器权重系数结果(~-t-s,n一1O,g/kg) (悬)心肝脾肺肾脑胸腺肾上腺睾丸前列腺子宫卵巢 03.47~0.3927.10-}-2.032.91~0.595.73-}-0.916.58-}-0.276.89-}-0.871.23-}-0.340.323 -0.099.68-t-1.381.57~0.591.95~0.850.46+0.17 Q45&11~0.27?26.31-}-1.35互552=0.594.60-}-0.92?&31-}-0.63&64-}-1.02l_29-}-0.22Q26士Q0610.36士互761.1士Q161.30 士Q30Q38士Q02 l_3606+0.24026.27-}-2.20互 68+0.515.22-}-1.35&61-}-0.66&58-}-0.761.18-}-0.25Q27+0.079.64+1.68 L35+0.351.38+0.58Q55+0.16 互70Z92-I-Q25027.12-I-l_5o互65-I-Q614-62-I-Q72?&43-I-Q46&14? O.641.22?Q28Q24士Q069.23士1.33Lo4士Q18互67士1.06Q54士Qo8 注:与对照组比较,?P<0.05,?P<0.01 2.2.5病理学检查结果给药l2周时,高剂量组和 对照组均可见心,肝,肺,肾,甲状腺,垂体轻度瘀血 (可能与动物宰杀有关),其它尚有肝内肉芽肿,肝门 管区炎性细胞浸润,肝细胞点状一灶状坏死,肺出血, 肺问质炎细胞浸润等.z检验无统计学意义(P> 0.05).实验组与对照组的脾,气管,胸腺,胰腺,肾上 腺,脑,胃,十二指肠,睾丸,前列腺,附睾,子宫,卵巢, 肠系膜淋巴结等比较,均无明显的病理组织学改变 (见表5). 2.2.6恢复期观察恢复期后,给药组与对照组除 部分大鼠有某些病理组织学改变以外,无统计学意义 (P>O.05);其余如血液学指标,血液生化指标,脏器 权重系数均无异常变化. 表5清火排毒化肿胶整12周的病理检查结果f只) 3讨论 3.1急性毒性实验本实验显示,清火排毒化肿胶 西南国防医药2004年第14卷第5期?485? 囊经胃灌注最大耐受量(MTD)为10.8g/kg体重,为 人常用剂量的240倍.依毒性判断,可以认为清 火排毒化肿胶囊在临床应用有较大的安全范围. 3.2长期毒性实验本实验表明,长期口服清火排 毒化肿胶囊对大鼠一般活动,进食饮水,毛皮和体重 变化无明显影响.1.35g/kg组和2.7g/kg组与对照 组比较,WBC分类和CR有统计学意义(P<0.05或 P<O.01),提示清火排毒化肿胶囊可能有改善实验 动物肾功能的作用;给药组心,肺权重系数较对照组 低,且有统计学意义(P<0.05或P<0.01),说明清 火排毒化肿胶囊可能有抑制肺部炎症,从而改善心肌 肥厚的作用;高剂量组和对照组均可见心,肝,肺,肾, 甲状腺,垂体轻度淤血(可能与动物处死有关),其它 尚有肝内肉芽肿,肝门管区炎性细胞浸润,肝细胞点 状一灶状坏死,肺出血,肺问质炎性细胞浸润等.恢 肝癌患者血清GLS含量 王天然,许爱国,周纬,李丽萍,蒋 (1.成都军区总医院临床实验中心,四川成都 复期结束后处死的给药组与对照组大鼠在血液学,血 液生化,脏器权重系数,病理组织学检查等各项观察 指标中均无统计学意义(P>0.05).上述结果说明 长期大剂量给予动物清火排毒化肿胶囊引起动物的 某些损害是可恢复,可逆转的. 本研究结果显示,清火排毒化肿胶囊是一种无明 显毒性和副作用的中药制剂,按拟定临床剂量及疗程 服用是安全的. 参考文献 (13中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指 南.北京:1994:89 E23徐叔云,卞如濂,陈修主编.药理实验方法学.第3版,北 京:人民卫生出版社,2002:67 收稿日期:2004—06—06 燕,张丽华,白小红,马布仁 610083;2.解放军第519医院,四川西昌615000) 摘要目的:研究肝癌患者血清GLS含量及其临床意义.方法:测定肝癌,非癌肝病患 者和健康人GLS,然后分组统计. 结果:肝癌组GLS(799士226mg/L)显着高于健康组(466士65mg/L)和各良性肝病 组;各良性肝病组与健康组无明显差 异.测定GLS对肝癌诊断敏感度,特异度,准确度和诊断效率分别为 82.4N,94.70A,89.70A和78.0,具有显着临床应 用价值,并且高于血清AFP测定.测定GLS与AFP联合应用诊断价值更为显着. 结论:肝癌患者血清GLS显着增加} 其测定对肝癌诊断,病情及疗效监测,预后分析具有显着临床价值;与AFP联合检 测临床价值更显着. 关键词神经节苷脂;肝癌;诊断;肝硬化;甲胎蛋白 中图分类号R730.43文献标识码A文章编号1004—0188(2004)05—0485—03 Detectionofserumgangliosidesofpatientswjulhepatocarcinoma WANGTian—ran?,XUAi—guo2,ZHOUWei,IJILi—ping,JIANGYanI,ZHANGLi— hua2,BAIXiao—hongx,,MABu—rent. 1:ClinicalExperimentalCenter,GeneralHospitalofChengduMilitaryCommand,Chengdu,610083,China.*:ClinicalExperimental Center,GeneralHospitalofChengduMilitaryCommand,TianhuiTown,Chengdu,Sichuan,610083,Chinal2:Hospital519ofPLA, Xich~g,Sichuan,615000,China. AbstractObjective:Tostudythelevelofserumgangliosides(GLS)ofpatientswithhepatoeareinomaanditsclinicalsignificane~ Methods:ThelevelsofserumGLSofhealthypeopleandpatientswithhepatoeareinomaandotherliverdiseasesweredeterminedandthe resultswerecomparedwitheachother.Resul~:Thelevelofserul~GLSofhepatoearcinomagroup(799士226mg/L)washigher significantlythanthatofthehealthygroup(466+65rag/L)andotherliverdiseasesgroup,butthereWaSnotdifferenceofserumGLS betweenthehealthygroupandotherliverdiseasesgroup.Indiagnosisofhepatoearclnoma,th esensitivity,specificity,accuracyand diagnosticefficiencyofGLSwere82.4,94.7,89.7and78.O,respectively,andtheserateswerehigherthanthoseofserum AFP.ThecombinationofdeterminingGLSwithAFPwasmoresignificantthaneitherGLSorAFPindiagnosisofhepatoeareinrr~ Conclusion:SerumGLSofthepatientswithhepatocarcinmaincreaseremarkably.DeterminingGLFwillbehelpfultOdiagnosisof hepatocarcinma,evaluationofthetherapeuticeffectandprognosisofthisdisease. Keywords:gangliosides,hepatoearcinrna,liverdisease,diagnosis 神经节苷脂(gand,GLS)是一组神经鞘糖脂类化 合物,兀I乎存在于所有细胞膜E,与细胞间识别,粘着,信号传 导有着十分密切的关系.许多肿瘤细胞,尤其是恶性肿瘤细 胞表面GLS种类改变,含量增加,比正常组织释放更多GLS 至周围,因而造威血清GLS水平手F高;并可影响肿瘤,造 血纽胞和血管生长Q硼.作者已建立GLs快速测定法旧,现