RP-HPLC法测定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑的含量

RP-HPLC法测定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑的含量 RP-HPLC法测定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑 的含量 2010年4月第7卷第12期?药品鉴定? RP—HPLC法测定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑的含量 王晓燕.高丹 (解放军第二三.医院,辽宁丹东118000) f摘要】目的:建立反相高效液相法测定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑含量的方法.方 法:采用Diamonsil-Cts(4.6mmx250mm, 5m)色谱柱;流动相:甲醇一水(74:36);检测波长:239nm;流速:1.0ml/min.结果:酮康 唑在0.06-2.10Ixg范围内与 峰面积呈良好的线性关系(r=O.9995),平均回收率为98.89%,RSD=1.40%;甲硝唑 在0.06-2.10Ixg范围内与峰面积 呈良好的线性关系(r=-O.9991),平均回收率为98.75%,RSD=1.10%.结论:本方法简 便,准确,重现性好,可用于酮甲 霜中酮康唑和甲硝唑的质量控制. 【关键词】反相高效液相法;酮甲霜;酮康唑;甲硝唑;含量测定 冲图分类号】R927.2【文献标识码】B[文章编号】1673—7210(2010)04(c)-079-02 ContentdeterminationofketoconazoleandmetronidazoleinCompoundKe- toconazoleCreambyRP—H]f.LC WANGXiooyan~,GA0Dan. (ThePLA230thHospital,Dandong118000,China) [Abstract]Objective:Toestablishamethodforthecontentdeterminationofketoconazolean dmetronidazoleinCompound KetoconazoleCreambyRP— HPLC.Methods:TheDiamonsilC18(4.6mmx250mm,5m)columnwasused.Themobile phasesconsistedofacetonitrileandwater(74:36),theflowratewas1.0ml/minandthedetecti onwavelengthwasat239nln. Results:Thelinearrangesofketoconazolewasat0.06-2.10Ixg(r=0.9995),theaveragerecov eryWas98.89%withaRSD of1I40%;thelinearrangesofmetronidazoleWasat0.06—2.10Ixg(r=0.9991),theaveragerecoverywas98.75%withaRSDof 1.10%.Conclusion:Themethodisfast.reliable.accurateandcanbeusedinthequalitycontrol ofketoconazoleand metronidazoleinCompoundKetoconazoleCream. [Keywords]RP—HPLC;CompoundKetoconazoleCream;Ketoconazole;Metronidazole;Contentdetermin ation 酮甲霜是我院研制的含酮康唑和甲硝唑的皮肤外用制 剂,酮康唑和甲硝唑具有抗真菌作用『l1,临床上用于治疗体 癣,牛皮癣,湿疹以及神经性皮炎等I2].酮康唑和甲硝唑的含 量测定有电位滴定法,紫外一可见分光光度法[31.本文建立了 以HPLC法同时测定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑两组分含量 的方法.现介绍如下: 1仪器与试药 高效液相色谱仪(HITACHI,7110),酮康唑原料(南京白 敬宇制药有限公司生产,KE一071115);甲硝唑原料(武汉武 药制药有限公司生产,C04一L0706226);酮康唑对照品(中国 药品生物制品检定所.批号:100294—200602);甲硝唑对照品 (中国药品生物制品检定所,批号:100191—200305),酮甲霜 (解放军第二三.医院的医院制剂,含酮康唑和甲硝唑分别是 1%).其他试剂为色谱纯. 2方法与结果 2.1酮甲霜的制备 按照处方组成(酮康唑1g,甲硝唑1g,氮酮2rnl,乙二 胺四乙酸二钠0.05g,乳膏基质加至100g)分别称取酮康唑, 甲硝唑研磨过6号筛(80,100目),置乳钵中,加氮酮,乙二 胺四乙酸二钠研磨均匀.按等量递加法加入基质中.充分研 【作者简介】王晓燕,女,主管药师,大学本科;现就职于中国人民解放军 第二三.医院 匀,分装.即得[6-7]. 2.2对照品溶液的制备 精密称取酮康唑对照品和甲硝唑对照品适量,加甲醇溶 解.并制成含酮康唑1.0mgCm]和甲硝唑1.0m~Jm]的对照品 溶液. 2.3供试品溶液的制备 取酮康唑适量,加无水乙醇于80?水浴加热溶解,冷却 放置量瓶中,用乙醇加至刻度,冰浴2h,滤过,配制成含酮康 唑50g/ml和甲硝唑50Ixg/ml的供试品溶液. 2.4阴性对照品的制备 按处方比例,取除酮康唑和甲硝唑的其他试药,按"2.1" 项下方法制成缺酮康唑和甲硝唑的阴性样品,再按"2-3"项 下方法制成阴性对照品溶液. 2.5色谱条件 色谱柱:DiamonsilCl8(4.6mmx250mm,5m),流动相: 甲醇一水(74:36),流速:1.0ml/min,检测波长:239nm,柱温: 30?,进样量:20l. 2.6系统适用性试验 分别取酮康唑和甲硝唑对照品溶液,供试品溶液及阴性 对照品溶液,按上述色谱条件进行试验,考察系统适用性. HPLC色谱图见图1.由图1可知,酮康唑和甲硝唑能够有效 的分离.空白基质没有干扰. CHINAMEDICALHERALD巾自基药售报79 药品鉴定? B 图1HPLC色谱图 (A.对照品;B.供试品;C罔性对照;1.甲硝唑;2,酮康唑) ng.1HPLCchromatography fA.Referencesubstance;B.Sample;C.Negativecontrol;1.metronidazole; 2.ketoconazole) 2-7线性关系考察 分别精密量取对照品贮备液1.5,2.0,2.5,3.0,3.5ml,置 于50Il1l量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,分别精密量取 20l,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定色谱峰面 积,以进样浓度(g)为横坐标,峰面积为纵坐标,计算回归方 程,结果明酮康唑进样量在0.06,2.1Og范围内,呈良好 的线性关系,回归方程为Y=24616X一135469(r=0.9995); 甲硝唑进样量在0.06—2.10g范围内,呈良好的线性关系, 回归方程为y=16915X一113242(r=0.9991). 2.8精密度试验 精密吸取"2.2"项下对照品溶液20l,重复进样5次, 按上述色谱条件测定色谱峰面积,酮康唑的RSD为1.34%, 甲硝唑的尉为1.50%.结果表明本法精密度良好. 2.9稳定性试验 取"2.3"项下供试品溶液,分别于放置0…246,8,12h 后,注入液相色谱仪,测定色谱峰面积,酮康唑的RSD为 1.27%,甲硝唑的RSD为1.65%,结果表明供试品溶液在12h 内基本稳定. 2.10重复性试验 精密称取同一批样品5份,按"2.3"项下方法制备供试 品溶液,分别测定色谱峰面积,酮康唑的平均含量为1.82%, RSD为0.4%;甲硝唑的平均含量为2.05%,RSD为0.3%.结 果表明本法重复性良好. 2.11回收率试验 分别精密称取酮康唑和甲硝唑对照品适量,按处方比列 8O由曹医商弓报CHINAMEDICALHERALD 201O年4月第7卷第l2期 加入基质中制成含酮康唑,甲硝唑含量分别约为标示量的 80%,100%,120%的样品.按回归方程,测定并计算回收率. 结果见表1. 表1回收率试验(n--3} Tab.1Resultofrecovery(3) ]IIA~'(mg)测得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%) 酮康唑甲硝唑酮康唑甲硝唑酮康唑甲硝唑酮康唑甲硝唑酮康唑甲硝唑 2.12样品含量测定 取本品约lg(约相当于酮康唑10Ing,甲硝唑10mg), 精密称定,加无水乙醇适量.置80?水浴中溶解,放冷至室 温,移至100rid量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,冰浴 冷却2h后,滤过,弃去初滤液,取续滤液25rnl用乙醇稀释 至50ml,进样201,计算含量,结果见表2. 表2样品含量测定f,阖) Tab.2Contentdeterminationofsamples 3讨论 本方法简便,准确,空白基质没有干扰,可用于酮甲霜中 酮康唑和甲硝唑的含量测定. 【参考文献】 [1]林傧,陈俊杰,林建武,等.复方酮康唑乳膏治疗外耳道真菌病疗效观察?l 中国医药导报.2006.3(24):49. 【2】夏玉满.萘替芬酮康唑乳膏治疗手足癣疗效观察叨.中国医药导报, 2006,305):85. 【3】国家药典委员会中华人民共和国药典【s】.二部.北京:化学工业出版 社.2005:614. 【4】王海红.高效液相色谱法测定复方甲硝唑栓中甲硝唑及诺氟沙星的含 量【J】.中国医院药学杂志,2008,28(1):79—80 [5】汪选斌.高效液相色谱法同时测定甲倍霜中甲硝唑和丙酸倍氯米松 的含量[J】.中国医院药学杂志,2007,27(12):1778-1780. 【6]卢乙众,张永恒,丁毅,等.氯霉素甲硝唑搽剂的制备及I临床应用叨.中 国医药导报,2007A(27):100-101. 【71赵占武.甲硝唑缓释片的制备及其体外释药的影响因素考察阴.中国 医药导报,2007,4(34):66--67. 【8】壬娟.HPLC法测定匹卡米隆分散片的有关物质中国现代医生'20o7, 45(8):68,77. (收稿13期:2009—12—22)