小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒技术资料小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒技术资料
小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒技术资料
中文名称:小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ELISA试剂盒:欢迎来电询价
保存条件及有效期:
1(试剂盒保存:2-8?。
2(有效期:6个月
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
Free-T3试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Free-T3浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Free-T3和生...
小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒技术资料
小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒技术资料
中文名称:小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ELISA试剂盒:欢迎来电询价
保存条件及有效期:
1(试剂盒保存:2-8?。
2(有效期:6个月
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
Free-T3试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Free-T3浓度的
品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Free-T3和生物素标记的抗体同时温育。小鼠游离三碘甲状腺原氨酸ELISA试剂盒 洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Free-T3的浓度呈比例关系。
ELISA试剂盒组成:
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。 操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4?。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加 4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37?水浴锅或恒温箱温育60min。
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水5.
纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37?避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作
中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。 2. 灵敏度:最低检测浓度小于1.0 pg/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8?,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。 试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AmAC-1标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AmAC-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-80ng/ml
4、敏感度: 0.1 ng/ml
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ?保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒不要在37?或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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