水溶性脂质体药物的冷冻干燥

水溶性脂质体药物的冷冻干燥 实验三 水溶性脂质体药物的冷冻干燥 一(实验目的 1(掌握旋转蒸发法制备水溶性脂质体药物的方法; 2(学习脂质体药物冷冻干燥的工艺; 3(通过对冻干前后水溶性脂质体药物喃氟啶包封率的测定，了解不同保护剂、不同冻结速率对脂质体冻干前后药物的包封率的影响。 二(实验设备 旋转蒸发仪、冷冻干燥机、高效液相色谱仪 三(实验方法与步骤 1(旋转蒸发法制备喃氟啶脂质体 以配制葡萄糖浓度为5,的喃氟啶脂质体悬浮液为例:称取2.0g葡萄糖和0.8g喃氟啶，过筛(100目)两次，使二者充分混合;称取1.2g大豆卵磷脂、0.6g胆固醇、0.4g泊洛沙姆放入喷雾器内，量取10mL氯仿使喷雾器内的上述材料充分溶解;把葡萄糖和喃氟啶的混合物放入包衣锅内，使之旋转，用盛有膜材的喷雾器向包衣锅内喷膜材，每10min喷两次，并用一暖风机吹向包衣锅，使膜材中的有机溶剂挥发;喷雾器中的全部膜材喷完，包衣锅继续运转20min后停止;把包衣锅内地的脂质体取出，放入小瓶密封，并放在干燥器内保存;当需要使用时加蒸馏水时悬浮液体积为40mL，这样便配制成葡萄糖浓度为5,的喃氟啶脂质体悬浮液。 2(冷冻干燥过程 (1)冻结过程。将实验物料放在冻干机的搁板上，插入热电偶，开始采集温度;接着开启冻干机，开始搁板制冷; (2)一次干燥过程。当物料完全冻结后，关闭搁板制冷，打开冷阱制冷;当冷阱温度降至-40?时，打开真空泵开始抽真空，并设定一次干燥温度。 (3)二次干燥过程。当一次干燥过程结束时，设定二次干燥温度; (4)后处理。当二次干燥过程结束时，打开放气阀，关闭真空泵，取出物料用天平称量，然后进行封装处理; 3(脂质体药物包封率的测定 (1)曲线绘制 (2)游离喃氟啶含量Cf测定 将含有喃氟啶的脂质体悬浮液500μl放入离心柱中，把离心柱放入电动离心机中离心，转速为3000r/min。取6.5μl离心液放入25ml的容量瓶中，加甲醇至刻度线。用进样器取10μl已配好的溶液经进样阀进入色谱仪，每个样品测两次。由喃氟啶浓度的标准曲线，可以算出游离的喃氟啶含量。 (3)喃氟啶总含量Ct测定 取含有喃氟啶的脂质体悬浮液6.5μl放入25ml的容量瓶中，加甲醇至刻度线使脂质体破坏，用进样器取10μl已配好的溶液经进样阀进入色谱仪，每个样品测两次。 (4)包封率的计算 C,Ctf E,nCt 四(数据与处理 冻干后包封率 保护剂 冻干前包封率 慢速降温 快速降温 5,葡萄糖 10,葡萄糖 15,葡萄糖 5,蔗糖 10,蔗糖 15,蔗糖 5,甘露醇 10,甘露醇 15,甘露醇 5,海藻糖 5,海藻糖 5,海藻糖 五(思考 1(药品冷冻干燥与其他干燥方式相比有哪些优点, 2(药品冷冻干燥工艺中要控制哪几个参数,