【word】 O-没食子酰基金丝桃苷和金丝桃苷的含量

【word】 O-没食子酰基金丝桃苷和金丝桃苷的含量 O-没食子酰基金丝桃苷和金丝桃苷的含量 342西北药学杂志2010年1O月第25卷第5期 20min后晒干)>样品5(自芍鲜药材置沸水中煮2O min后,除去外皮,晒干)>样品8(鲜自芍刮去外皮 后,置沸水中煮至透心,捞出晒干).由此可见:煮后 去皮或者去皮后煮都使芍药苷含量下降,这与文献 E33报道的芍药苷在外皮中的分布稍高于去皮芍药根 相符;而先去皮煮后晒干的加工方法使芍药苷的流失 最为严重,此法不可行. 经蒸制后,芍药苷含量:样品3(鲜白芍置沸水中 煮20min后晒干)>样品5(白芍鲜药材置沸水中煮 20min后,除去外皮,晒干)>样品10(鲜白芍连皮蒸 制20min后,切薄片,干燥)>样品11(鲜白芍蒸制 20min后,去皮切薄片,干燥)>样品12(白芍刮去外 皮后蒸制20min,切薄片,干燥).由此可见,蒸制后 白芍中芍药苷含量低于煮制.经硫磺熏制的白芍其 芍药苷含量明显低于其他方式加工的白芍.比较样 品13与其他样品的色谱图(见图1)发现,经硫磺熏 制后产生了新成分芍药苷亚硫酸酯(即峰s).这是 芍药苷在有水的条件下与s0反应生成的L3],所以 芍药苷含量大大降低.本研究中所出的不合格 市售药材均含有芍药苷亚硫酸酯的峰. 图1硫磺熏制自芍与未熏制自芍I-IPLC图 A一芍药苷亚硫酸酯(s号峰)与芍药苷(1号峰)混合品; 未用硫磺熏制白芍加工品;C-用硫磺熏制白芍加工品 3.2关于硫磺熏制白芍在安徽毫州白芍产地调研 时了解到,该产地晒芍采用硫磺薰烤和晾晒结合.芍 药根晒2日后,堆起成空心垛,中间点燃硫磺薰烤. 硫磺薰制过程一般持续2,3d,期间随时添加硫磺. 薰后再经2,3d晾晒即成药用白芍.此种方法周期 短.经硫磺熏制的白芍形粗质硬,表面光滑,色泽白 皙,容易出售.在白芍贮藏的过程中遇到梅雨季节药 农也会用硫磺熏蒸,此法能起到良好的防霉防虫作用. 4结论 本研究经过对13种不同加工方法的比较,得出 样品3(鲜白芍置沸水中煮20min后晒干)中芍药苷 含量最高,样品5(鲜白芍置沸水中煮20min后,除 去外皮,晒干)中芍药苷含量其次.但是考虑到白芍 为”鲜自芍去皮者”这一规定,因此白芍鲜药材置沸水 中煮20min后,除去外皮,晒干,为最佳加工方法. 商品白芍中芍药苷含量普遍偏低,这与经硫磺熏制后 芍药苷转化为芍药苷亚硫酸酯而含量降低有关.芍 药苷亚硫酸酯在贮藏过程中是否能再次转化为芍药 苷,经体内代谢后是否能产生与芍药苷同样的代谢产 物,值得深人探讨. 参考文献: E13高海,王卫峰,戴涌,等.白芍药材中芍药甙的含量测定 方法考察[J].西北药学杂志,1998,13(1):42—43. E23张丽萍,杨春清,赵永华,等.安徽白芍化种植加工 技术研究及SOD的制定[J].世界科学技术一中医药现代 化中药材种植研究,2004,6(3):63-72. [3]王巧,刘荣霞,郭洪祝,等.加工炮制对白芍化学成分的 影响[J].中国中药杂志,2006,31(16):1418—1421. E43赵建.白芍采收加工方法的改进EJJ.传统医药,2005,14 (i0):63. E53张云.白芍药材产地加工工艺初探EJ3.中国中药杂志, 2007,32(10):993-995. [6]俞年军,金传山,吴德林,等.毫自芍产地加工质量的研 究[J].现代中药研究与实践,2005,19(2):47—48. [7]田亚男,杨杰,刘艳娜,等.HPLC,LC-MS检测3种毫 白芍栽培品种的质量[J].中国药科大学,2009,40 (3):228. (收稿日期:2010—04—12) HPLC法测定鹿衔草总黄酮中2,- o一没食子酰基金丝桃苷和金丝桃 苷的含量 赵敏,王中秋.,宋莉,杨军仁,王军宪H (1_西安交通大学医学院,陕西西安710061;2.西安交通大 学理学院,陕西西安710061) 摘要:目的建立同时检测鹿衔草总黄酮中2没食子酰基 金丝桃苷和金丝桃苷含量的HPLC法.方法采用KI’oma- silODS柱(150him×4.6mln,5”m);流动相:乙腈一0.05磷 酸二氢钾一0.05磷酸(20:30:85);检测波长:26313.m;柱 温:25?;流速:1mL?rain,.结果2”-O-没食子酰基金丝 桃苷及金丝桃苷进样量分别在0.66,1.98和0.6,1.8g 内线性关系良好(r=0.9997,r=0.9997),加样回收率分 别为100.53%和98.89,重现性分别为1.35和I.00. 结论该方法简便,准确,重现性好,可用于鹿衔草药材的质 量控制. 关键词:鹿衔草总黄酮;2”-O一没食子酰基金丝桃苷;金丝桃 苷;含量测定;高效液相色谱法 doi:10.3969/j.issn.1004—2407.2010.05.013 中图分类号:R927.2文献标志码:A 文章编号:1004—2407(2010)05—0342—03 基金项目:陕西省自然科学基金项目资助(项目编号: 2005C238) 通信作者:王军宪,男,教授 山 西北药学杂志2010年10月第25卷第5期343 鹿衔草为鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola callianthaH.Andres和普通鹿蹄草lP.decorataH. Andres的干燥全草,历版《中华人民共和国药典》均 有收载,均为中国特有药用植物[1],具有祛风湿,强 筋骨和止血等功能,临床用于治疗高血压,冠心病及 脉管炎等疾病.鹿衔草总黄酮(Totalflavonoidsof HerbaPyrolae,TFHP)对大鼠急性心肌缺血具有保 护作用;TFHP能降低垂体后叶素诱发的缺血性心 律失常的发生率;减少冠脉结扎后心肌梗死面积,降 低血清磷酸激酶(cK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,提 高血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,减少丙二醛 (MDA)含量_3].鹿衔草总黄酮主要有效成分是2,,- O一没食子酰基金丝桃苷和金丝桃苷_4],笔者建立了 HPLC法同时测定2”-O一没食子酰基金丝桃苷和金丝 桃苷的含量,此方法简便,准确,重复性好. 1仪器与试药 1.1仪器高效液相色谱仪LC-2010(日本岛津); AE240型电子分析天平(梅特勒一托利多仪器有限责 任公司);HS6150D超声振荡仪(天津市恒奥科技发 展有限责任公司);RE一52型旋转蒸发仪(t-海亚荣生 化仪器厂);SHZ-D循环水真空泵(河南巩义市英峪 予华仪器厂).所用试剂均为色谱纯. 1.2试药2”-O一没食子酰基金丝桃苷和金丝桃苷 对照品由本实验室制备,通过波谱法鉴定结构, HPLC归一法确定其纯度达98以上.鹿衔草(购 于陕西省宝鸡市太白县药材公司,经王军宪教授鉴定 为鹿蹄草ProlacallianthaH.Andres和普通鹿蹄 草P.decorataH.Andres的全草. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱KromasilODS柱(150mm ×4.6mm,5m);流动相:乙腈一0.05磷酸二氢钾一 0.059/6磷酸(20:30:85);检测波长:263nm;柱温: 25?;流速:1mL?min,;理论板数按2”-O一没食子 酰基金丝桃苷峰及金丝桃苷峰计算均不低于4000. 2.2对照品溶液的制备精密称取2”-0一没食子酰 基金丝桃苷5.5mg,金丝桃苷5.2mg,置于25mL 量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,即得(每1 mL中含2”-0一没食子酰基金丝桃苷0.220mg,金丝 桃苷0.208mg) 2.3总黄酮的提取分离与纯化 2.3.1鹿衔草总黄酮的提取取1Okg鹿衔草,加 入约8倍量的体积分数7O乙醇,在提取罐中提取2 次,每次2h,再加入6倍量的水提取1h.合并提取 液,浓缩,蒸干,得提取物. 2.3.2鹿衔草总黄酮的分离鹿衔草样品液对 LSA一5B大孔树脂进行动态吸附实验.确定最佳上 样质量浓度为30g/L,最佳洗脱剂为体积分数5O 乙醇.按照优化的条件,取鹿衔草粗提物,用LSA_ 5B大孔树脂对总黄酮进行分离.收集50的乙醇 解吸附洗脱液,浓缩,烘干,得到总黄酮. 2.3.3鹿衔草总黄酮的纯化称取鹿衔草总黄酮, 加入蒸馏水超声使其混悬,用醋酸乙酯萃取,合并醋 酸乙酯液,蒸干,干燥称重. 2.4供试液的制备精密称取醋酸乙酯纯化后的样 品55mg,置于25mL量瓶中,加甲醇溶解并定容至 刻度,摇匀,即得.精密量取5mL,用甲醇定容到10 mL量瓶中备用. 2.5线性关系的考察精密量取对照品溶液5mL, 定容至10mL量瓶中,用微孔滤膜(0.45m)滤过,取 续滤液,进样6,8,10,14和18L,以峰面积积分值为纵 坐标,对照品含量为横坐标进行回归处理.结果表明 ()I没食子酰基金丝桃苷在0.66,1.98g范围内线性关 系良好,回归方程为:Y一2E+06X一463442 (r一0.9997);金丝桃苷进样量在0.6,1.8p.g范围内 线性关系良好,回归方程:Y一2E+06X--441493 (r一0.9997). 2.6精密度实验取同一对照品溶液,在同样的色 谱条件下反复进样5次,每次1OL,测定峰面积积 分值,金丝桃苷和2”-O一没食子酰基金丝桃苷的RSD 分别为0.18和0.16 2.7稳定性实验取上述对照品溶液,每隔6h进 样1次,每次1OL,反复进样5次,测定峰面积积分 值,结果表明金丝桃苷和2”-O一没食子酰基金丝桃苷 的RSD分别为0.70和1.O9,表明样品在24h 内稳定性良好. 2.8重现性实验平行制备5份供试品溶液,在263 nm下测定峰面积积分值,按照标准曲线计算含量,结 果表明金丝桃苷及2一()_没食子酰基金丝桃苷平均含量 分别为6.18和7.45%,RSD分别为1.0O和1.35. 2.9加样回收率实验取已知含量的同一批样品共 5份,分别精密加入对照品溶液,按2.3项下的方法 制备供试品溶液,测定峰面积,计算回收率.结果见 表1—2. 表1金丝桃苷回收率实验结果 表22()-没食子酰基金丝桃苷回收率实验结果 344西北药学杂志2010年1O月第25卷第5期 2.10样品含量测定按2.4项下的方法制备供试 品溶液,分别精密吸取1OL进样,按标准曲线计算 鹿衔草总黄酮中金丝桃苷及2”-O一没食子酰基金丝桃 苷的含量,其中金丝桃苷为6.18,2”-O一没食子酰基 金丝桃苷含量为7.45%. 止 图1HPLC图 A一标准品;总黄酮;1—2,_()_没食子酰基金丝桃苷; 2一金丝桃苷 3讨论 采用混合标准来测定提取物中的金丝桃苷含量, 2”-0一没食子酰基金丝桃苷的含量,方法简便,快速, 结果可靠. 在选择流动相时考虑到采用混合标准来测定样 品中两种物质的含量,选择乙腈一0.05磷酸二氢钾一 0.05磷酸(20:30:85)为流动相,比甲醇一水以及 乙腈一水为流动相的分离效果大大提高. 通过醋酸乙酯纯化后的总黄酮含量为42.8O%, 其中金丝桃苷含量为6.18oZ,2”-O一没食子酰基金丝 桃苷含量为7.45. 本实验以2”-O,没食子酰基金丝桃苷的最大吸收 峰(263nm)为检测波长,结果表明,在263nm波长 处,2”-0一没食子酰基金丝桃苷及金丝桃苷分离效果 好,且杂质干扰少,适时检测两种物质. 参考文献: [1]中国药典2005版[s].一部.2005:226. [23《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编[M].上册. 北京:人民卫生出版社,1986:719. [3]丁存晶,刘俊田,王军宪.鹿衔草总黄酮对大鼠急性心 肌缺血的保护作用[J].中药材,2007,30(9):1105—1109. [43封卫毅,袁秉祥,王军宪.2”-O-没食子酰基金丝桃苷对 豚鼠右心室缺氧再给氧心肌电活动的影响[J].中国药 理学通报,2002,18(3):358-359. [5]边晓丽,刘次伯,王军宪.没食子酰基金丝桃甙对实验性 心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J].西安医科大学学 报,1998,19(3):339. [6]石娟,刘瑞,王军宪.HPIC测定不同种鹿衔草中金丝 桃苷的含量[J].中国中药杂志,2002,27(8):618—619. (收稿日期:2O1O—O4一O3) 黄芪蜜炙生产工艺研究及设备参数 优选 陈衍斌,刘峰,马存德,韩翠,杨娟英,南景一 (成阳步长制药有限公司,陕西成阳712000) 摘要:目的研究蜜炙黄芪工业化大生产的工艺,优选主要设 备工艺技术参数,缩小不同生产批次炮制品的质量差异,确保 产品质量的均一性和稳定性.方法采用L(3)正交实验 设计,以炮制品外观性状和黄芪甲苷的含量为考察指标,进行 机械化炮制与传统手工炮制对比研究,确定最佳工艺技术参 数.结果用XCY75O型炒药机进行黄芪蜜炙,最佳炮制 工艺技术参数为炒炙温度设定1O0?,炒炙时间设定25min, 授料量16kg.结论最佳炮制工艺所得的产品符合传统蜜 炙黄芪炮制品的要求,且黄芪甲苷含量较生饮片有所提高; XCYD~750型炒药机适用于黄芪的蜜炙工艺,且操作简单,节 省人力. 关键词:蜜炙黄芪;正交实验;工艺;设备参数 doi:10.3969/j,issn.1004—2407.2010.05,014 中图分类号:R282文献标志码:A 文章编号:1004—2407(2O10)05—0344—03 黄芪是常用的传统中药,为豆科植物蒙古黄芪 Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mong— holicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,具有补气固 表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌之功能|_】],主要含黄 芪甲苷,多糖,氨基酸等成分.历代中医药文献记载, 黄芪有2O多种炮制方法,传统炮制方法以蜜炙,盐 炙,酒炙或炒为主,目前国内临床上普遍采用的是生 品和蜜炙饮片两种,蜜炙黄芪在中国药典2005年版 一 部中,是以”炙黄芪”之名单列收载,蜜炙黄芪可以 增强其补虚作用,在f腐床上应用尤为广泛.传统炮制 方法是先将炼蜜用适量开水稀释后,加入净黄芪片中 拌匀,闷润,置热锅内,用文火炒至表面呈深黄色,不 粘手为度,取出,摊晾,凉透后及时收藏.有文献报 道,CY一型电动炒药机蜜炙黄芪可降低劳动强度_2]. 也有文献认为,电烘烤蜜炙黄芪尤佳,对3种不同炙 法(炒炙法,烘炙法,先闷润后炒炙法)所得的成品进 行比较,结果表明,烘炙法制的黄芪质量好,色泽鲜 艳,贮藏不易吸潮_3].关于炒炙时间及温度,有人研 究认为7O?或8O?烘制2h,与传统蜜炙黄芪的药 理作用无显着差异j.另有人认为用蜜量为30%, 温度100?,烘制时间30min,是黄芪蜜炙的最佳工 艺?5],但用蜜量为3O与中国药典2005年版一部 “附录?D炮制通则”【6_不符,目前不能应用于工业化 基金项目:”十一五”国家科技支撑计划项目(编号 2006BA106A07—01) 作者简介:陈衍斌,男,硕士研究生,执业中药师 通信作者:刘峰,男,副主任药师,硕士生导师 ? 5 3 O 5 2n 加叭B/5f O 5 O 如 5 2 加 n 5 mA ? 0 5 0