紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量

紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量 【摘要】本实验利用紫外分光光度法测定由维生素C和维生素E组成的混合物中各组分的浓度。在这两种组分组成的混合物中，彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，根据相互间光谱的重叠的程度采用相对的方法进行定量测定。 【关键词】紫外分光光度法;维生素C;维生素E;浓度 1、 引言 维生素C(抗坏血酸)和维生素E(α-生育酚)在食品中能起抗氧化剂作用，即它们在一定时间内防止油脂变性。两者结合在一起比单独使用的效果更佳，因为它们在抗氧化性能方面是“协同的”。因此，它们作为一种有用的组合试剂用于各 1 种食品中。维生素C是水溶性的，维生素E是酯溶性的，它们都能溶于无水乙醇，因此能在同一溶液中，能够利用紫外可见分光光度法测定双组分相同的原理，在紫外光区测定它们。 2、实验原理 根据朗伯—比尔定律，用紫外—可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分。由两种组分组成的混合物中，若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，可根据相互间光谱重叠的程度，采用相对的方法来进行定量测定。例如，当两组分吸收峰部分重叠时，选择适当的波长，仍可按测定单一组分的方法处理;但当两组分吸收峰大部分重叠时，则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定。 混合组分中在λ1处的吸收等于组分A和组分B分别在λ1处的吸光度之和，即: 同理，混合组分在λ2处吸光度之和应为: 2 若先用A、B组分的标样，分别测的A、B两组分在和处的摩尔吸收系数、 、、 组: ;当测的未知试样在λ1和λ1处的吸光度和后，解下列二元一次方程 即可求得A、B两组分各自的浓度和。 一般来说，为了提高检测的灵敏度，λ1和λ2宜分别选择在A、B两组分最大吸收峰处或其附近。 3 3、紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量 3.1、仪器试剂 仪器:紫外-可见分光光度计(天津港东UV-4501S)，石英吸收池一对 试剂:维生素C(抗坏血酸)，维生素E(α-生育酚)，无水乙醇 3.2、实验步骤 3.2.1、 检查仪器 开机预热20min，并调试至正常工作状态。 3.2.2、 配制系列标准溶液 (1)配制维生素C系列标准溶液:称取0.0132g维生素C，溶于无水乙醇中，定量转移入1000 mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至标线，摇匀。此溶液浓度为7.50×mol/L。分别吸取上述溶液4.00 mL，6.00 mL，8.00 mL，10.00 mL于4只洁 4 净干燥的50 mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至标线，摇匀。 (2)配制维生素E系列标准溶液:称取维生素E0.0488g，溶于无水乙醇中，定量转移入1000 mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至标线，摇匀。此溶液浓度为1.13×mol/L. 分别吸取上述溶液4.00 mL，6.00 mL，8.00 mL，10.00 mL于4只洁净干燥的50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至标线，摇匀。 3.2.3、 绘制吸收光谱曲线 以无水乙醇为参比，在220,320 nm范围测定维生素C和维生素E的吸收光谱曲线，确定维生素C和维生素E的最大吸收波长 λ 3.2.4、 绘制标准曲线 (1)维生素C标准曲线:以无水乙醇为参比，分别在波长和处测定5个维生素C标准溶液的吸光度值。 (2)维生素E标准曲线:以无水乙醇为参比，分别在波长 5 和处测定5个维生素E标准溶液的吸光度值。 3.2.5.、 未知液的测定 取未知液5.00 mL于50mL容量瓶中，用无水乙醇稀至标线，摇匀.在波长和处分别测定其吸光度。 3.2.6、 结束工作 和 λ，分别作为和。 (1)实验完毕，关闭电源。取出吸收池，清洗晾干后入盒保存。 (2)清理工作台，罩上仪器防尘罩，填写仪器使用记录。 4、实验数据处理 4.1、 6 、测定 红色曲线——维生素C光度吸收曲线 黑色曲线——维生素E光度吸收曲线 由仪器作图分析直接可得=273.1nm，=291.9nm。 4.2、Vc与Ve在 、处的光度吸收图 维生素C在λ=273.1nm的标准曲线 吸光度维生素C标准溶液浓度c(mol/L) Vc在处的线性回归方程为:y=1480x+0.04991， =1480. 7 吸光度维生素C标准溶液浓度c(mol/L) Vc在 处的线性回归方程为:y=370x+0.03824，. 百度搜索“就爱阅读”,专业资料、生活学习,尽在就爱阅读网92to.com,您的在线图书馆! 8