393株念珠菌属的鉴定及药物敏感性分析

393株念珠菌属的鉴定及药物敏感性分析 393株念珠菌属的鉴定及药物敏感性分析 中华医院感染学杂志2006年第16卷第6期 ? 论着? 393株念珠菌属的鉴定及药物敏感性分析 刘行超,贺英,邓志峰,韦祖兴,黄艳眷 (解放军第181中心医院,广西桂林541002) 摘要:目的了解本院患者念珠菌属感染的特点及药敏状况.方法采用法国科玛嘉念珠菌属显色培养基分离 鉴定菌株,用K—B纸片扩散法进行药敏试验.结果3年间共分离393株念珠菌属,白色念珠菌检出率最高 (63.10),其次是热带念珠菌(12.47),光滑念珠菌(9.41),克柔念珠菌(8.4O),新型隐球菌(1.53)和其 他念珠菌(5.o9),所有标本中,检出率排前5位的是痰液156株(39.69),大便66株(16.79),中段尿45株 (11.45),白带38株(9.67),咽拭子34株(8.65)'在9种抗真菌药药敏试验中,5一氟胞嘧啶,氟康唑,克霉 唑,两性霉索B,制霉菌京有较高的敏感性.结论念珠菌属在临床标本中分离率较高,不同菌种对不同药物敏 感性存在较大差异,临床上应重视念珠菌属的培养,鉴定和药敏试验,合理选用抗真菌药物. 关t词:念珠菌属,鉴定I药敏试验 中圈分类号:R379.4文献标识码:A文章编号:1005—4529(2006)06—0705—03 DrugSensitivityandIdentificationof393StrainsofCandida LIUXing—chao,HEYing,DENGZhi—feng,WEIZu-xing,HUANGYan-chun (No.181CentralHospitalofPLA,Guilin,Guangxi541002,China) AbstnIct:OBJECTIVETogetthemessageofdrugsensitivityandcharacteristicofC,andidai nfectingpatientsin ourhospita1.METHODSTheCHROMagarcandidacolormediumwasappliedtoisolateandidentifyCandida strains.DrugsensitivitywasanalyzedbytheK— Bslipdiffusionmethod.RF~UL'PSTotally393strainsofCandida inourhospitalwereisolatedinthethreeyears,includingCandidaalbicansIc.tropicalisIC.glabrata'c.krusei; Crypt0COCCIZsneoformansandtheotherslandtheirinfectionratewas63.10,12.47,9.41,8.40, 1.53,and5.09,respectively.Amongallstrains,156(39.69)strainswereisolatedfromsputum, 66(16.79)fromstool,45(11.45)fromurine,38(9.67)fromleucorrhea,and34(8.650A)fromthroatswabs. Sensitivityresultstonineantifungalsshowedthat5-flucytosine,fluconazole,clotrimazole,amphotericinB,and nystatinhadhigherdrugsensitivitytothesefungi.CONCLUSIONSIsolatedrateofCandidaishigherfromclinical samples.DrugsensitivityofdifferentCandidatovariousantibioticsisdifferent.Culturinganddrugsensitivityof Candidashouldbeputonimportantplaceandantibioticsshouldbeusedreasonablybasedondrugsensitivetestto reducedrugresistance. Keywords:Candida'Identification!Drugsensitivitytest 近年来,随着临床广谱抗生素,激素,免疫抑制剂 和抗肿瘤药物的广泛应用,以及器官移植,介入性检查 治疗越来越普及,临床标本中念珠菌属的分离率明显 上升,不同的菌种呈现不同的耐药特点,成为临床上继 细菌耐药之后的另一棘手难题.笔者对我院2002年 1月~2004年12月间送检标本中分离的393株念珠菌 属作了菌种鉴定及药敏分析,报道如下. 1材料与方法 1.1标本来源393株念珠菌属分离于痰液,粪 收稿日期:2005一II一05'修回日期:2006—01—06 便,中段尿,白带,咽拭子,创面分泌物及其他标本. 1.2念珠茵属鉴定培养基法国科玛嘉显色培养 基,购自郑州博赛生物工程有限责任公司. 1.3药敏纸片9种药敏纸片分别为5一氟胞嘧啶, 氟康唑,克霉唑,两性霉紊B,制霉菌素,咪康唑,酮 康唑,伊曲康唑和益康唑,均为丹麦Rosco产品质 控菌株为白色念珠菌ATCC64548. 1.4菌种鍪定将标本接种科玛嘉念珠菌属显色 培养基,37?培养48h,根据菌落色彩判断菌种,绿 色或翠绿色为白色念珠菌,蓝灰色或铁蓝色为热带 念珠菌,粉红色为克柔念珠菌,紫色为光滑念珠菌, 白色为其他念珠菌;新型隐球菌的鉴定按墨汁染色 ?706?ChinJNosocomiolVo1.16No.62006 及糖同化试验鉴定. 1.S药敏试验对于大多数菌种,接种液浓度先配 0.5麦氏浊度,再用生理盐水1tl稀释}对于克柔 念珠菌,先配0.5麦氏浊度,再用生理盐水1.10稀 释}对于新型隐球菌,配1.0麦氏浊度.在接种前, 平皿先置37?温箱干燥20min,各吸取配好浓度的 菌液0.5ml接种于两块9cm平皿,涂布均匀,用移 液管吸走多余的菌液,然后,将平皿放37?温箱干 燥lOmin,一个平皿贴4种药敏纸片,另一平皿贴 5种药敏纸片.37~C培养18~24h后测量抑菌环大 小,对于新型隐球菌,若生长不良可继续培养24h. 2结果 2.1检出率各临床标本中念珠菌属的检出率,在 痰液中,白色念珠菌的检出率最高为44.35, 见表1. 哀1临床标本中念珠茵属的检出率() 2.2构成比2002年1月~2004年12月各年度 分离的念珠菌属构成比,见表2. 2.3耐药率393株念珠菌属对9种抗真菌药物 的耐药率,见表3. 3讨论 3.1念珠茼属的鉴定念珠菌属的鉴定方法很多, 如传统的同化试验,自动化鉴定仪等,前者准确性和 裹22002~2004年间各年度分离的念珠菌属构成比(%) 表3念珠菌属对9种抗真菌药物的敏感率() 重复性较差,耗时长,后者成本较高.而法国科玛嘉 显色培养基作为以菌落颜色来鉴定菌种的方法,十 分简便易行.其缺点在于准确鉴定的菌种较少,一 般只能鉴定出白色念珠菌,热带念珠菌,克柔念珠 菌,光滑念珠菌.不过,从我们3年期间分离的 393株念珠菌分析,发现有367株菌为这4种菌,占 93.38,基本能满足一般实验室对鉴定菌种的 需求. 3.2念珠茵属在标本中的分布表1显示,念珠菌 属在临床送检标本中排前5位的分别是痰液,大便, 中段尿,白带,咽拭子,共339株(86.26).其中 以呼吸道标本(痰液,咽拭予)比例最高,占 48.35,这与国内多位学者的研究一致[1'2].我院 痰液,咽拭子标本主要来源于老年病科,新生儿科, 肾移植科,脑外科,肿瘤科及部分科室的重症监护 室,这类患者一般病情重,体质差,免疫功能低下,住 院时间久,使用抗生索时间长,因此极易引起念珠菌 属感染,临床上应加强这类患者呼吸道标本念珠菌 中华医院感染学杂志2006年第16卷第6期?707- - 属的检测.此外,由于大便,中段尿,白带中念珠菌 属分离率也较高,也应引起重视. 3.3念珠茼属各年度的变迁表2显示,2002, 2004年间,各年度分离的几种主要念珠茵属构成比 差别不大,但念珠菌属的分离率有逐年增加的趋势. 3年内,各年度分离的念珠茵属均以白色念珠菌为 主>613,6,其次为热带念珠茵,光滑念珠茵,克柔念 珠菌.3年共分离到6株新型隐球菌,均为脑脊液 标本,临床微生物室应提高脑脊液新型隐球菌的检 测水平,防止漏检. 3.4药敏分析念珠茵属的药敏试验方法有肉汤 稀释法,微量稀释法,Etest法和K—B纸片扩散法 等.其中稀释法操作繁琐,Etest法价格昂贵,而 K—B纸片法克服了上述缺点,最适合临床常规实验 室应用.我们使用的纸片均为丹麦Rosco公司生 产,结果十分稳定.国内文献大多只检测3,6种抗 真菌纸片的敏感性[1],为了给临床提供更多的用药 选择,我们采用了临床常用的9种纸片进行药敏试 验.表3结果显示,白色念珠菌对5一氟胞嘧啶,氟 康唑,克霉唑,两性霉素B,制霉菌素,酮康唑敏感性 较高,敏感率在87.9O,97.989,6之间,而对咪康 唑,伊曲康唑,益康唑稍低,敏感率在68.959,6, 78.63之间.热带念珠菌除对伊曲康唑,益康唑敏 感率较低外,对其余7种抗真菌药均有较高敏感性, 敏感率在81.63,93.88之间.光滑念珠菌对 5一氟胞嘧啶,两性霉素B,制霉菌素敏感性较高,对 其他6种抗真菌药敏感性较差.克柔念珠茵对两性 霉素B,制霉菌素表现较高的敏感性.总体上看,对 念珠菌属敏感性较高的有两性霉京B,制霉菌素, 5一氟胞嘧啶,克霉唑,氟康唑. 念珠菌属感染者大多为免疫力低下,长期使用抗 生素或病情较重患者,由于供选择的抗真菌药种类有 限,且大多抗真菌药物有较强的毒副作用,增加了临 床抗真菌治疗的难度,因此,临床上一方面要尽可能 避免念珠茵属等深部真菌引起的二重感染,另一方面 要熏视对患者进行真菌的检测,合理选用抗真菌药 物,以免出现类似滥用抗生素导致目前出现大量耐药 性细菌一样的局面.临床微生物室应及时准确地分 离,鉴定念珠菌属等深部真菌,应常规开展真菌药物 敏感性试验,供临床医师合理选择抗真菌药物,以期 达到正确治疗和有效控制真菌感染的目的. (本调查在撰写过程中承蒙第三军医大学检验系临床微 生物及免疫学教研室毛旭虎博士指导.特此致谢!) 参考文献: [i]黄云昆.夏星.李婷,等.临床标本中群母样真苗的分离及耐 药性现状分析[J].临床检验杂志,2003.21(Supp1):60—61. [2]沈翠芬,张晓样.临床标本的真菌培养和药敏分析[J].中华 医院感染学杂志,2003,13(4).382—383. [3]刘方,李春阳+4种抗真菌药对106株医院感染念球菌的药 敏试验[J].中华皮肤科杂志,2001.34(6):450—451. 加强医用废物的管理防止院内交叉感染 . 刘学宁,,l~,Itm,郑晓红,谢丽芹 (武警黑龙江省总队医院,黑龙江哈尔滨150076) 关键词:医用;废物,感染?管理 中豳分类号:R124.03文献标识码:B文章编号:1005—4529(2006)06—0707—01 为防止医疗废物传播樗染环境.保障医务人员及就诊患 者的身体健康,创建绿色医院,我们加强了对医用废物的正 规化管理.其方法;(1)成立组织.完善#管理#.我院成立 了由1名业务副院长,院防感染办负责,三处一部各派专人 参加的医用废物管理组织.各级明确.制定出台了医院 医用废物管理,一律由环保局指定的废物管理中心统一 回收.专人负责.认真做好统计,上锁管理.(2)工作秩 序,加强监督管理.各科的医用废物每天装入专用的医用垃 圾袋.由专人定时送到指定地点,并做好登记.各科室不 收稿日期:2005—09-25 许私自出卖使用后的一次性医疗用品.如发现加倍处罚.每 月由防感染办,医务外,护理部及院务处各派专人共同检查 各部门的废物处理情况,并负责督促工作定期汇报,对执 行不好的科室及部门根据情况给予处罚.(3)加强防护及消 毒.医用废物回收指定专人负责,上岗前进行消毒隔离制度 及防护知识的培tJIl.确实保护好自己,避免发生交叉感染. 严格遵守消毒原则,有严格的终末消毒制度,定期进行终末 消毒,保证无交叉感染的发生.(4)管理到位,成效显着.由 于领导重视.组织管理健全.专人负责,并加大了检查监督 力度.我阮的医用废物管理收到了明显成效,多次受到上级 主管部门的肯定与好评.