蛋白质含量的测定蛋白质含量的测定
实验四 蛋白质含量的测定
——考马斯亮蓝法(Brodford法)
原理
染料考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后引起染料最大吸收波长的改变,从465nm变为595nm,光吸收增加,蛋白质-染料复合物具有高的消光系数,因此大大提高了测定蛋白质的灵敏度(1ug)
实验步骤
1. 求标准曲线方程:按下表配置,操作。
管号 BSA HO 考马斯亮蓝 Pr.含量 操 作 2
(100μg,mL) (mL) G-250(mL)
1 0 1.0 5.0 0 室
2 0.1 0.9 5.0 10 温
3 0...
蛋白质含量的测定
实验四 蛋白质含量的测定
——考马斯亮蓝法(Brodford法)
原理
染料考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后引起染料最大吸收波长的改变,从465nm变为595nm,光吸收增加,蛋白质-染料复合物具有高的消光系数,因此大大提高了测定蛋白质的灵敏度(1ug)
实验步骤
1. 求标准曲线方程:按下
配置,操作。
管号 BSA HO 考马斯亮蓝 Pr.含量 操 作 2
(100μg,mL) (mL) G-250(mL)
1 0 1.0 5.0 0 室
2 0.1 0.9 5.0 10 温
3 0.2 0.8 5.0 20 放
4 0.4 0.6 5.0 40 置
5 0.8 0.2 5.0 80 五
6 1.0 0 5.0 100 min
2. 样品pr.含量的测定
吸取小白菜提取液0.5mL,加入蒸馏水0.5mL(三次重复);吸取血清(稀释800倍)1.0mL
(三次重复),向以上各管加入考马斯亮蓝G-250 5.0mL,室温放置5分钟,测A的值595
(一小时内完成)。
管 号 小 白 菜 管 号 血 清
T 或 A T 或 A
1 1
2 2
3 3
? 小白菜用mg,g,血清用mg,mL。
r?0.99
1
本文档为【蛋白质含量的测定】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑,
图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。