细胞凝集反应

细胞凝集反应 细胞生物学#实验# 题目:细胞凝集反应 姓名: 学号: 班级:时间: 一、实验目的: 了解细胞膜的表面结构，掌握细胞凝集的原理。 二、实验原理: 细胞膜双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为:细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 三、实验用品: 1( 土豆块茎。 2( 显微镜、粗天平、双凹载玻片、滴管2支、离心管2支、离心机。 3( PHS缓冲液 称取NaCl7.2g、NaHPO1.48g、KHPO 0.43g、加蒸馏水，定容至1000mL调24 24 pH值到7.2。 4( 1%的红细胞 以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂)1mL，加生理盐水3mL，在1000r/min的条件下离心5min，重复离心3次，最后按照压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞悬液。 四、实验步骤: ( 称取土豆去皮块茎2g，加10mL PBS 缓冲液，浸泡2h，浸出的粗提液中1 含有可溶性土豆凝集素。 2( 用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞各一滴，置载玻片上，充分混匀，静 置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。 3( 以PBS液加1%血细胞液作对照实验。 1 五、实验结果: 1( 加入土豆凝集素的红细胞发生凝集，未加入土豆凝集素的红细胞未发生凝集。 2(实验图片: 图1 加入土豆凝集素的红细胞(10×4) 图2 未加土豆凝集素的红细胞(10×4) 加入土豆凝集素 未加土豆凝集素 图3 加土豆凝集素与未加土豆凝集素的红细胞凝集情况对照(肉眼观察) 六、实验分析: 1.实验过程中出现了凝集现象不明显，肉眼不可辨别的问题。经分析，原因 是所用红细胞的离心效果不理想，红细胞浓度较低，导致实验效果不理想。 经过对离心过程的优化，成功得到了较明显的实验结果。 2.要讲土豆凝集素和红细胞充分混匀，以加快反应，使现象明显。 2