小儿维生素咀嚼片质量标准

小儿维生素11fl.1I爵片' E英文名】 TABELLAE Vrr'A MINI COMPOSIT八E PRO INFANTlBlJS 【汉语拼音】 XIAOER WEISlIENGSU ZUJIAO PIAN 【才对fI.l: 号-] WS-48 (X-35) -93 【活性成分】 每片含维生素 A 不得少了 4500 单价，含维生素 D 不得少于 360 单价-，含维生京 E (C31 日5203) 不得少 f 27 单位:含维生:素 C (C6 H8 06) 不得少子- 54mg; 含 Il[命 酸 (C19 1119 N7 06) 不得少于 0.3 6mg; 含硝酸、硫胶 (C12 日56 CIN4 OS.1IN03) 不 得少 7二1.30mg，含维生紊 B2 (C17 日20 N4 06) 不得少于 1.53mg; 含烟航胶 (C6 H6 N20) 不得少于 17.8mg; 含维生素 86 (C8H门 N03.HCI)不得少 T 2.19mg; 含维 生素 B12(C63 H33CONI4 014 P)不得少 f 5.4Fg [处方]每 1000 Jt含维生素 A500 万 μ 维生系: 040 万 μ 维生素， E3 万 μ 维生素 C 60g 叶酸 O.4g 硝酸硫肢 1 .45g 维 生素 B21.7g 维生素 B62.43g 烟毗胶 19.8g 维生素 B126mg 【含量】 【性状】 淡桔红色咀嚼j七 【鉴别】 【检查1 【含量测定 1 !ki高效液相色 i普法(中国到典 1990 年版二;部 i咐求 34 页)测定 ，、 系统适 研忌 用 1-服服饰刷刷:以甲醉"石汕隧 (9 : 1) 为流动相;检测波 长为 325nm o 理论板数按维生素 A 峰计算内不低于 30000 供i式品溶液的制各地(本 1\1'1 10 片，精密称定，研细，精密称取适鼓(约相当于维牛，东 A5000 单位)，置 50ml 具螺旋酱 IYJ离心管牛力[1蛋白酶 50mg 矛11抗材、血酸缓冲溶液[ (取磷酸二氧辛!f! 6.8g 平11 抗坏血酸 40g，氮氧化饷 10g，直 1000m1 .以瓶巾，力口水约 900m[，溶解万1 月j氢氧化 TI斗液 (6mollL) 或磷酸i殉节 PH 为 8.0。然后JH水稀料坐刻度，摇匀，，) ] 1 0时，轻轻 ~I:B匀，精密加入无水乙醉 10m[，加盖充分泪匀，然后置 40"C水附中温热 10 分钟(每 隔 2 分钟振摇 5 秒钟〉取出 o fl:l. ì令王三空泪，精密力n入行油田连-无水乙隧 (2 : 1) 10m l. 报摇 30 秒钟，然万'T用 tA馅包好、剧烈振摇 10 分钟，宜离心机中离心 5 分钟，精密 量取上层有机消液 2m!' 置 50ml 棕色量瓶中，用流动相稀释至刻度， 摇匀。 对照 品溶液的制备精衔称取维生京 A 对照r'1l1 16mg，直到m1 具螺旋盖的离心管中， 1安 供试品溶液的制备方法，即古n蛋白酶 50mg"起，依法操作。 测定法精密量取对照 1111溶液和 i供试J11l溶液各 20μ[，分别注入液相色~~{川妇路 又峰面积，根据供试品、济液 和附照品溶液峰tüï积的平均值，计算，即衔。/维生素 D)照高效液相色谐法(中国 药典 1990 年版 部附录 34 页〉测定。 系统辽南性试验 用石中胶为填料:每[仿-正己 炕·四 tt映11囱 (45:55:1) 为流动相，流速 lm l/min，检测波长为 254nm" 理论板数 按维生素 D 峰计算，所不低于 3000 。 对!在、品溶液的制备精密称取维生索 D 对用 品约 20mg，景 100ml 棕色量瓶中， JlJ iE 己炕榕解并稀料王三刻度(新鲜配制)，摇匀内 精密监取 2.0m1o :ili'另…- 1001111 棕色监瓶巾，剧流动相稀释至刻皮(举fi例:网已伟1]) ，如 匀。 供试品洛液的制备取本品 20 片，精密柏:定 ， i肝细，精密称取适量(约相判了 维生素 D600 单位)，置于 50m1 离心试管中(用的错包亵)，加入二叩亚枫 15.0111 [， 充分分散，在 50"C水浴放室主 30 分钟井充分混手[1 ，放伞:空;鼠，离心 10 分钟，、精密最 取七清液 1 0.01111，置 2501ηi 分液漏斗，中.用 il己炕抽提二二次以仁，每次 3511110 合Jí 11:已炕层，用水洗涤三次，均:次 20时，然后将 l巨巳炕应通过无水硫酸饷滤过，波:液 宜 250m! 二角烧瓶中，笠 50"C水浴巾笠氯气流 F蒸发至 1币。放至室温，立即精密 力f]入流动相 3.0m1，充分旋转烧瓶四攒以溶解结晶，作为供试品溶液。 规定法精密 取卫、J JKo'( r\11溶液和l供试JAl1溶液各 1 O~Ll，分别注入高效液相色谱仪，记录已革闻之 摄 取峰1fIï积，根据对照品溶液和!供试品溶液峰回积的平均值计算，即衔。 做生素 "对 照 dl1溶液的制备精密称取 d1-a 维生素 E Wi~酸雨拟才W~ r\i'1 r.'1 25吨，直皂化J扩(需避 光)，力1I无;j(乙醇 20时 1;h性没食子酸 0.2g，于水浴上旭流 10 分钟，通过冷凝管力n 入 4.5%醉制氢氧化信[1溶液 20m1.继续迥流 30 分钟，快速冷却，然后移宜分液汹;.'-1- 中，电化瓶JlJ水冲洗，洗液井入分液漏斗，中，力n乙E连 201时，缓缓振摇 5 分钟:静贺， 分层，分取民迷层，加入冰目前酸 6 淌，地和，用水 40m1 洗涤，民应层面加入冰附酸 6 滴，混不n ， J汗水 40ml 洗涤.乙脏层)11铺有无水硫酸铀的滤器滤过，分液漏斗及滤器 周乙隧洗涤;次，每次 201111 ，合并乙麟液， ~:::.F:燎的烧瓶中。{-t:氯气流|丸水浴泪 热蒸发至三干 ， .\1. 即力11入苯 20ml i史残留物溶解，将苯液通过 FIORRSFl J云析性(层析 杜用苯 50m1 洗过)，用苯洗涤烧瓶和层析柱，每次 20时，共二次。合并苯液。直 1001111 棕色量瓶中，力11苯经出度，摇匀。令藏，一个月内使用〉。 供试品溶液的制各取本 品 20 片，精密称定，研当日，精密称取适量(约相当于维生素 E15111g) ，自~X1照品溶 液的制备项下，自"紫黑化瓶中"起，依法操竹，即衍。 测定法精密量对照A;11溶液 51111 和供试11Ili溶液 10m1，分别宜 100m1 棕色彭:瓶中，各加入乙附~乌七溶液cl : 4)20时， 摇匀，阵各力n入 0.25%a ， aO_联口Ltr比苯溶液 8时，混匀后各力n乙醇·苯溶液 (1:4)50ml 与 0.1%二二氧化铁的l苯溶液。(取二氧化铁 0.14g，直 1001111 棕色挝瓶中，力日无水乙醉 5ml，月J 苯稀抨击三该度。) 8m!，混匀，然后加乙醇"苯济液 (1 : 4) 王三刻度，摇，匀， 放置 25 分钟，照分光光度法(中|主|药典 1990 年版二d部附录 24 页)， ;而: 520nm 的波 长处分另iJ ~vl~定吸收度，计算，即衔。 维生素 C 1识 10 .片，精密称定，研细，精密称 ‘、-取滔挝: (约相当于维生京 C1 00mg ) ，直 250m1 腆瓶中，加入偏磷酸-四if酸~特液 [取偏磷酸 15g，力11 {'}J(醋酸 40ml 丰II;J(适量使溶解，再 H] 7](稀料至 500ml ，摇匀，即得(ý咐: 存于冷处，使用 2 日汁。 100ml，充分报摇，使维生京 C 溶解，力日淀粉指示液 1ml ， 即H用飞液 (0.1 mol/L) 滴定，王三溶液显蓝色并持续 30 秒钟不褪，即衍。得 lml 的 酬 CO川U 相当于 8.806mg ~ cF 67 7 H 川 '?or'4??@阳 效液相色谱注(中国药典， 1990 年j说二部附求 34 页)测定。 系统适用性试验 )1]十 八:院某硅炕键合时胶为填料:取水 1200时，加磷酸工氢伊fl 4.0饨， 25%囚 r慕氢氧 化饺甲醇溶液 25m!' 甲醇 543ml ，滔不II后加水稀释到 2000时，调节 p归为 7.0士0.1. 作为流动相，检测波长为 280nm。现!论板数按叶酸峰计算应不低于 1500，叶酸峰和 内标峰的分离度成大于 20 校庶民i子的测定取尼泊.1It甲醋约 45mg，精密称定，力Il tp醇 266m1 ， 25%阴]基氢氧化馁甲醉:容~i支 18.5时，磷般:氢伊fl 2.04g , 10%二乙烯 干:B安五醋酸的氮氧化钱溶液 CO.75moI/U 30r时，加水稀释主 1000ml，作为内标溶液、， 取叶酸对照 r'd ， (使用 H才用费休氏法测定其水分，按无水物计)约 32mg，精密称定， 加内标溶液制成句[ml 中约含 0.32mg 的溶液，作为对照品溶液，精密量取对照品溶 液 2m1，置 50m1 J唱:瓶中，用内在F溶液稀释至 501时，摇匀，取 10μI 注入液相色谱仪， 计算校 IF[大i子。 供试品溶液的制备 ij测定取本品 20 片，精密称定，听细，精密称 取远到:(约相当于叶酸 O.3mg) ，里 50m1 具塞离心节'巾，加 4乙烯三版 li醋酸 175mg ， 内标 25.0时，充氨密寡，置旋涡振荡器振荡 5 分钟，然后在 70 0C 水浴中力II;j!，~ 2 分钟， 振荡 1 分钟。再次:{-E 70"C7](浴巾 j]1l热 2 分钟，振荡 l 分钟，乘热滤过，弃;t初J滤液， 1以 10μi 注入液相色道仪，测定，计算，民p衔。 硝酸硫!应对照品珞液的制备精密 称取维生素 BIX、j 照 rW ， 25mg (使用自lî用费休民尚白家荒马 1000m1 剧中，力日 预先川稀盐酸调节 i引为 4.0 的稀醇溶液 cl→5) 使洛解，并稀料至刻度，摇匀 O 精 密烧;耳X. 20m1，直 250m1 最瓶中，加盐酸液 CO.2mollL) 至刻度，报匀。 供试品溶液 的制各取本品 20 片，精密称定，听细，精密称取适量(约相当于硝酸硫胶 10mg) ， 宜 100ml j;注瓶中，加盐酸浓 (0.2m01/U 约 60m]，充分振摇，使维生素 B1、‘ 17 ? 溶解、内fTfJ盐酸液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续j浩;液 5.0ml. 直 250m1 运瓶中，加盐酸液 CO.2mol!U 至刻度， JFZ匀。柏:中i 屈;取 10m!. 置 100m1 最瓶中，加盐酸液 (0.2moIlU 空刻度，摇匀。 测定法取 3 个有寒试管，各精密 加入对照溶液 5ml.在其中两管中各地j驻加入氧化试剂取 1%铁氟化仰溶液约 4m]， 加氮氧化铀液 C3.5mol/L) 至 100m1 (iI创日前 4 小时配制) 0 3.0r时，混匀，心:即力11入 异 J醉 20.0m1 (30 秒钊:内)，加塞强烈振3ft 90 秒钟。另-试管中加氢氧化饷液 0.5mol几) 3.0ml 代密氧化试剂，按向法操作，作为空白。另i识 3 个有寒试管，各 精密)JD入供试JIll溶液 5时，披上法同样操作。 :(Lt述 6 个试管中，分别加入无水乙 醇 2. 0r时，旋摇数秒钟，待两液相分启后，分别取上层异丁醇溶液， t军收收小池中， 用萤光i去(中国 ~}ij典 1990 年版;部附录 27 页)，分别:(-E激发波长约 365rID1 和 发射波长约 435nm 处测定萤光强度，根据供试品榕液 'J>í寸照品济液的平均萤光读数 的比值，计算:含眩，将其结果与 0.971 相乘。 维生索 B2 对照、 lifl济液的制备精密 \}一-一--柏:取在 105 0C干燥 2 小时的维生素 82 对照、品 25mg，置 250ml 棕色量瓶中，力n入盐 酸液C1mol!L) 50时，在水浴上加热使溶解，放冷，加入乙醉 50时，用水稀释至刻 度，精密量取 2时，竟 100ml 量瓶中，如IML酸液 CO.2moI/L) 稀释:宇:刻度，、 供试品 溶液的结IJ各取本品 20 片，精;辛称定，研纠H ，精密称取适鼓(约相当于维生东， B2 10mg) ，置 250ml 棕色量瓶中，力口水 75ml、盐酸 4r时与乙醇 501时，置水浴上力n热使 溶液，放冷，用水稀释至刻度， 1f~匀 ， i虑过，分:;t初J滤液，精密摇耳叉续滤液 5m1. 置 100ml 棕色最瓶中，力[J盐酸液 CO.2moI/U 稀粹主刻度，摇匀。 测定法精密最 耳又对照品溶液矛lJ供试IIl 溶液各 21时，分别宜于各 2 只 50m1 棕色鼓瓶中，各加入7J( 10ml、氮氧化纳液 (0.1 mol/U 2ml 与磷酸缓冲液 2时，用水稀罪?乎全年刻度，摇匀 o )日 萤光分析法(中|玉!药 ßQ. 1990 年版…部附录 27 页)，分别在激发波长约 44nm 和发射 波长 530nm 处测定jf光强度，并在以立各溶液中再加保险粉(次硫酸饷 )5mg 摇匀， 测定，作为空白。根据供试占lI溶液与对照ILII溶液的平均萤光ìil;数的比值，计算含摄 即 îfJù 维生素 B6 对照品溶液的制备精密称取在五氧化二磷干燥器中减!五干燥 4 -卢-一-小时的维生索 B6 对照 id， 25mg ， 置 250ml 监瓶中，用盐酸液 CO.1mol/U 稀释至刻度，摇匀，精密量 10m1，置 1000ml 景瓶中， rn水稀料至刻度，混匀。 供试品溶液 的制各取今;品 20 片，精待j称定，研细，精密称取;é: 1itI: C 约相当于维生素 B610m挝、 量Ï. 500ml 景瓶中，力Ilï\t酸 5ml Jj水 250时，在水浴上力11热，使维生素 B6 溶解，放冷， 加水，稀释至刻度， t在匀 ， Y)'8;过，精密监取 25时，直到ml 盘瓶中，加氢氧化纳液( 1mol/U 10时，泪和1，力11二氧化锚 200mg，瓷水浴上力11热 30 分钟 ， 时时振摇，放冷，用水稀 释至刻度。 测定法精密鼓取供试品和l对照、，\，1， ~容液各 5m1.分另IJ宜于烧瓶中，各力日 异 i斗醇 25.01时，混和，精密景对f!我品异 l可醇溶液 5m]，分别置于二个有嘉试管中， 在各管中均加氧化馁"氢氧化饺缓冲液， (取氧化饺 16g，加JJ( 70时，济解!后加氨水 16时， JTJ 水稀释伞'- 100m!' 摇匀，滤过) ù 1.0m1，混手n ，再各加醋酸饷溶液( 1• 5) 1.0ml，池和，然}8{+.吧?中加水1.0ml 另干?中加fi朋酸溶液c1→20) 1.0m1o另精 密量取供试品溶液各 5.Oml，分别置于二个有翠试管中，按上法处理。各管均混不n后， 各管分别先后加入氯亚服溶液取 2.6- 丰氨酸氯亚服 40mg 济于异丙醉 100ml 巾， 冷藏各JlJ ) 0 1.0ml 振摇 10 秒钟，照分光光度法(中因药典 1999 年版;一;二部附录 24 页)，在 650nm 波长处分别测定吸收度({佳确计11才，在加入某lIlJï.胶溶液 60 秒钟后测 定，件管时间应一致〉 。 根据供试品溶液 1:]对J!在品济液的力n水与加棚酸的吸收度的比 倍，计算含段， llP得。，朋歌肢对照，1311溶液的制备精华:称取 105"C二卡燥 1 小时的烟 酸对照品 50mg，置: 250ml 量瓶中， J1]水溶解并稀释烹刻度， )昆匀。精密景取 2m l 笠 100ml 量并丛中，加水稀释至刻度， (每 1mg 的烟酸相当于 0.9920mg 娴眈肢)。 供 试品溶液的制备取本品 20 片，精密称定，研细 ， 精密称取适量 (约相当于烟航胶 100mg)，宣 250ml 段并且巾，力日7K 100ml，置水浴上加热 30 分钟，便知|昂I:N安溶解， 放冷，加水稀释:在刻度，摇'匀，滤过，精密量取 1 .0ml ，主rt 100ml 最瓶中，力11氮氧化 饷液 C 5mol!U 10ml 和水 20m1.置水浴…仨水解 1 小时，放岭，用硫酸液 C5mol!L) 调节溶液刚成酸性，然后用水稀粹至刻度，混匀 o 测定法取问个试管、精密最取 对照151溶液各 2时，分别置于试管中，各力口氨缓冲i液(取磷酸氢三钊{ 8.7g 幸1.1氧化饺 107，饨，力[1水 50011 使溶解，力川笠L试液 2时，力11水至 100m!) " 3m]，一管中力11入 10% 漠化氧溶液 5.Om1.出匀，另…管力口水 5.Om1. i[i匀，作为生'向。另取三个试管，精 密量取供试品溶液各 2ml，分另iJ按上法处理， n~:t分光光度?去(中国药典 1990 年版二 部附录 24 页) ，在:. 410 波头处测定(准确计时，在加入 10%澳化氨浴液 5ml JF1约 3 分钟测定，各管的时间应一致)，根据供试品溶液与对照品溶液的吸收度的比值计算 ，即得。 ‘ 维生素 B12 元j 照 JIll溶液的制各取在硅胶 1知~ 4 小时的维生素 B12 对照品约 20mν陆密川言?如水稀释至 1000ml (5"C避光保布，可使用一个月)， iI备 用前用水稀释成每 ml 含维生素 B120.5吨，精密鼓取此液液 0.02ml 、 0.04ml 、 0.061ηl 、 0 ，08m l 平n O . lml，分别精密力[1入 10ml 检定用埔养基制成含维生素 B12 0.01 、 0 ，02 、 0.03 、 0 ，04 和 0.05ng 的对照 Illi1溶液(可根据线性范院，作适当的调樱)。 供试llh溶 液的制备取木品 20 片，砂|细，精密称取适量(约相对于维生素 B 12100~lg) ，置 250ml 瓶中，加偏重ïJE硫酸、41*J缓冲液(磷酸氢二讷 12.9g、无水栩栩、酸 1 1.0g 和偏重7夜晚酸、 饷 10.饨，加水使溶解。并稀释至 100011) 适量，振摇 30 分钟以充分提取，再加!缓 ìti'液至刻度， 1fD'匀，精密最取此液 12.5时，宣 250ml 监瓶中，力日缓冲液至刻度，扣B 匀， {j:Ù入烧瓶中， T 12rC灭菌 5 分钟，冷去1]，离心或过滤，精密量取上消液或提: 液 0.5ml，力口水 29.5时，混匀，再精密盗取 0.04日11 手110 .06时，分另u精密加入检;运用 培养基 10m!' 混匀。 菌液的制备才~定菌为某氏乳酸杆菌 CLactobacillus Leichmanji ATCC 7830)，由新鲜穿束Ij培养基接种到由液培养基中，于 37"C培养 20-24 小 H才，取 出，离心，弃去上消液，沉淀物加检定用培养基 10时，使成混悬液，离心(1'fi;复附 次) ，分-去 u市液，沉淀物加入检定用培养基 10ml 便成泪悬液， [!p为检定闸的液， 各HJ C此菌液于 2_3 0C保存，可用 10 天，为了'增强细菌的敏感度，菌种最好得天穿 束Ij传代培养沙。。检定法取 l::述制备的两手中浓度的供试IilIi洛$1!Z;f-UJi手中浓度的对照 品溶液于 121 0C ，米菌 5 分钟，立即冷却，滴加菌液，混匀，于 37 0C屿:养 20-24 小 时，取出，用浊度计或用分光光度计于 530nm 波 i支处，测定其吸收皮(取二份的平 均1Ï{) ， FH算术或半对数应标纸绘制由线，或者采用最小二乘法进行线性回归求 得线性方程，从标准曲线或者线性方和求得供试品溶液高低两剂远的含监， ap 得。 注:所有的玻璃器具和l稀释1日的水均应灭菌消毒。 I\(J:培养基的制备 (1)检定)T] 培养恭无水葡萄糖 20g 无水酣西安钢材 10g 船素酸水解溶液[1] 100ml 脱氨酸"色氨 酸溶液[2] 50ml 天门冬毗胶溶液[3] 10ml 腺n票岭，乌喋岭，尿峪P)主溶液[4] 10ml 黄i理 [l令溶液[5] 10ml 维生京溶液 1 [6] 20ml 维生京洛液 2[7] 20ml 盐溶液 1[8] 10ml 盐溶 液 2[9] 10ml 吐沽~. 80 溶液[10] lOml 维生素 C 2g 水力11 至 1000ml 用 8mol/L-氮氧化 饷浓调节 PH 使灭鼠后为 PH6.0 ，在: 121 "C灭前 15 分钟，冰箱保存。(1)国各亲自主 水解溶液六取自各素 100g，力1I 盐酸液 (6mo1/L) 5001址，网流 8-12 小时， 1:现 Jt:及去盐 酸，其糊状物)泪水至 1000时，并调节 PH 值至 3.5，丙加活性炭 20g，搅拌 1 小 H才， 滤过，得陈洁液， T冰箱保存，闲时如有沉淀，币'再过j虑。 (2) )恍氨酸唰色氨酸、帘 液六取 L-肢氨酸 4.饨， L-色氨酸1.饨，加水 800ml ，力口热至 80"C ，油加盐酸液 (6mol/L)，直伞:同体洛解，冷却，力11水王i. 1000mL (3)天门冬航胶珞液六取天 n 冬酿)j安 2g，加水至 2001划。 (4) 脱口祟 i哈"鸟。累岭-)Jj<.口密吭 j容液六取疏酸腺嗦岭、 盐酸鸟嗦口令及尿口密盹各 0.2g，力rL甜酸液 (4mol/L) 101叶，力Ll 1点溶解，冷却，力luK至 10001世。 (5) 黄嘿i哈溶液六取黄H祟岭，加水 40m1，加热至 70"C ，加氢氧化讷液 C6mo1几) 6m!' 搅拌至将解，玲去口，加水充 200ml" (6) 维生素溶液 1 犬'取核黄 素 10mg，维生素 81101吨，维生素丑100吨，娘1酸 20mg 加酣酸液 (0.02mollL) 使 碎，并稀料至 400mL， (7)维生素j容液 2 六取对氮基苯甲酸 20mg，泛酸钙 10mg ， 维生素 86'? '? 40mg , 11比多酵 40mg ， I1 rt多肢 8mg，叶酸 2mg，加 25%乙醉使j容， )1: 稀释至 400ml，避光冷藏。 (8) 盐溶液 l 六取(珠笔L二何 10g，磷酸氮二伺 10g，力n 水使i窑，并稀释至 200时，加盐酸 2 淌。 (9) 盐溶液 2 六取硫酸馍句，氧化饷 0.2g ， 硫酸亚铁 0.2g，硫酸锚 0.2g，加水使i释，瓶稀粹主 200m!' 力n 盐酸 2 滴。( 10) 吐 温呵80 溶液取nJ-.;ìÆ\.-80 20g，加乙醉至 200m]，冰箱保存。 注:有六者， :;OJ 复盖甲乌七 液后冷藏(2)菌液培养基蛋白陈 5g 醉付浸青 20g 无水锚j销糖 16g 磷酸J二靠t t1f1 2g [11温 80 O.lg 蕃茄 $'1- .六 100ml 7l<.加至 1000ml 阔节 PH 值使灭的后为 6.8士O. J，在 121 "C灭菌 15 分销。 蕃茄汁取罐装蕃阳汁离心去渣后，符 1000ml 蕃 茄汁中，加lj;1j滤剂 5g ， 1:'+铺有过波:剂的减压过滤器上过滤，得淡黄色溶液，如溶液 不洁，可反复~f，g之，滤液须复盖甲苯液后冷藏。(3)菌种穿剌培养基蛋白陈 7.5g 酵母浸音 7.5g 无水葡沓j糖 10g 磷酸二氢钊 2g r吐温 80 O.lg 蕃加il 100ml 琼脂 15g ;J(力11至 1000m1 调节 PH 值，使'又菌后为 6.8土O. ]，在 121 0C灭菌 15 分装了-试 管成应立状冷却。 E类另ül 小 JL营养补充药。