超临界CO2萃取-分子蒸馏对当归的提取分离

并重车药季季报 第 l9卷 第 5期 超临界 co2萃取 一分子蒸馏对当归的提取分离 张守尧 ·375 · 铝作用下红豆杉浸膏中 7．表紫杉醇可被催化为紫杉 醇 j，故加样回收率大于 100％，用碱性氧化铝分离 层析不能反应样品中紫杉醇的真实含量。中性氧化 铝加样回收率为 102．6％，较接近真实值 ，说明在 中 性氧化铝中，紫杉醇转化率较低 ，测定结果 比较接近 本身含量。影响测定结果的因素还有氧化铝活度、 洗脱液中溶剂含水量以及氯仿和甲醇比、洗脱速率 等。采用此方法时应严格掌握。 采用中性氧化铝柱层析，能有效地从红豆杉浸 膏中分离提纯紫杉醇 ，配合液相色谱法可以对浸膏 、 胶囊 中紫杉醇进行快速、准确定量分析。 参考文献 ： [1] JaeinthaGrutFan，lrl Hook．Taxol Content ofIrishYews[J]．P／anta Med，1996，(62)：70 l2] N∞ C．Vmee，Itick G．Kel8ey， 8 E．Sabin，Se．f~ml and lJflltUe variation in T．xmae oliM3elnl~ Ofl8 of Tams I~,vifolia [J]． Phy1．oche~ t,y，1994，36(5)：1241 [3] 张志强，苏志国．氧化铝催化 7一表紫杉醇转化为紫杉醇的机理 探索[J]．生物工程学报 ，2OOO，16(3)：378 [4] KingC．ClIall，A．Belinda．Alvarade，Maz,jT，eI a／．High p日mmmmlce liqwa alr．n togniphy and mieellar eleetrokinede a ∞∞tq呐 of taxol andtel-ted taxanesfrom hark and needle e=~a'aets ofTams species [J]．Journa／ofchro,~ graphr．B，1994，(657)：301 [5] M．J．I．Mattina。G．J．M∞kd1∞ ，Extl'tldlon，purification by solid— pllase e~actioll and lIi咖 dlⅢm lce llquia dmmm幻 c．,~Jysis oftlixlmes from to tal Tams lleedle8[J]．J．Chromatogr．A， 1994．(679)：269 (收稿 El期：2001—07一Ol；修回El期 ：2OO3—05—27) (本文编辑 魏 萍) 文章编号 ：1008—99z6(2oo3)o5—0375—03 中图分类号 ：11914 文献标识码：A 超II缶界 CO2萃取 一分子蒸馏对当归的提取分离 张守尧①，王 鹏，张忠义，吴惠勤② (①中国人民解放军第一军医大学，珠江医院 广东 广州 510282；⑦中国广州分析测试 中心 广东 广州 51OO7O) 摘 要：目的 对当归的亲脂性化学成分进行研究。方法 采用超临界 co2萃取当归中亲脂性成分 ，用分子蒸馏对提取物进 行分离，用 GC-MS联用技术分离鉴定各自的化学组成，计算其相对含量。结果 超临界 co2萃取物得率 2．15％，从中鉴定出 31~1-丁基邻羟甲基苯甲酸内酯等 31种成分；萃取物经分子蒸馏的得率为 15．8％，从中鉴定出35种成分。结论 超临界 co2萃 取和分子蒸馏可用于当归亲脂性成分的提取，提取物与传统方法提取的当归挥发油成分有显著不同。 关键词：当归；超临界 co2萃取；分子蒸馏；GC-MS；化学成分 The Extraction and Separation of Radix Angeneae Sinensis by Supercritical Fluid C02 and M olecular Distillation ZHANG Shou—Ya0 ，WANG Peng，ZHANG Zhong-Yi，Ⅵ Hui．Qin~ (CDZhujia．g Hospital，the First Military Medical University，Guangzhou 510282，Guangdong China) (②GHan~ ou Center of Analysis and Detemaination，Gua~ ou 510070，Guangdong China) ABSTRACT： m To study the lipophilic components in Radix angelicae sinensis．Methods supercritical fluid ex． traction(SFE)method and molecular distillation(MD)method were used for the extraction and separation．111e GC—MS method was used for the analysis of extracts．Results 2．15％ extract which containinl~31 components weI1e obtained after SFE—c02 and 15．8％ product which eontaining 35 components were obtained after MD．Conclusion 111e SFE．c02 and MD caIl be used for the extraction of lipophilie components in Radix angelicae sinensis．The chemical components in ex． tracts obtained by SFE—C02 and MD were different with the volatile oil obtained by traditional method． 1 W D如 S：Rad／x angelicae sinensis ；SFE—C02；MD；GC．MS；Chemical components 当归 Angelica sinensis(Oliv．)Diels为伞形科植 物当归的干燥根。主产于甘肃、云南、四川等地 ，具 ① 作者简介：张守尧(1965一)，男，山东平度人，学士 ，副主任药师。研究方向：药物分析。Tel：(O2O)85143555 维普资讯 http://www.cqvip.com · 376 · !兰芏签至至 2OO3年 lO月 第 l9卷 第 5期 Pharm J Oi／n P／A Vol 19 No 5 Oa 2003 有补血活血、调经止痛、润肠通便的作用 ，用于血虚 萎黄、眩晕心悸、月 经不 调、肠燥 便秘 、风湿 痹痛 等LlJ。文献有关于当归化学成分[2]和当归饮片挥发 油成分L3J的研究报道。本文采用超临界萃取(SFE． c02)和分子蒸馏(MD)技术 ，对当归的亲脂性化学成 分进行萃取分离，并进行 GC．MS联用分析，现报道 如下。 1 材料与仪器 当归 (广州 市药 材公 司提 供 ，经鉴 定 为 当归 Angelica sinensis(Oliv．)Diels的干燥根)。 HA121．32．24型超临界萃取装置(南通华安超临 界实业公司)。MD-SS0分子蒸馏装置 (广州汉维机 电有限公司)。HP 6890／5973 GC／MS气相色谱 一质 谱联用仪(美国安捷伦公司)。 2 方法与结果 2．1 超临界 c02萃取 超临界 c02(SFE—co2)流 程 lco2钢瓶 一冷冻系统一贮罐一高压泵一萃取釜 一 解析釜 I一解析釜 Ⅱ一冷冻系统(循环)。 将粉碎至 20目的当归 l0k 投入超临界萃取釜 中，对贮罐进行冷却 ，分别对萃取釜、解析釜 I、解析 釜 Ⅱ进行加热 ；当温度分别达到 40、45、45~C时，打开 c02气瓶送气，并打开高压泵对萃取釜、解析釜 I、 解析釜 Ⅱ加压；当压力分别达到 28、7～8、6～7MPa 时，开始循环萃取 ，调节流量为 185～195kg·h～，恒 温恒压萃取 3h出料。解析釜 I得到褐色液体 200ml (215g)，得率 2．15％。 2．2 分子蒸馏 将分子蒸馏装置进行加热，当温度 达到 130~C时，打开真空泵抽真空。当真空度达 到 8OO～1 000Pa时，将超临界萃取物 215g加热至 6o℃ 后从进 料 口加入 ，调 节转子 刮膜 的转 速为 250～ 300r／rain，流速 1．8～2．0ml／min，从两个出料 口分别 得蒸出物和留出物，蒸 出物为微红色液体 ，约 40ml (34g)，得率 15．8％。 2．3 气 一质联用 (1)GC条件 ：色谱柱为 SE．30弹 性石英毛细管柱(30m×0．25mm×0．25tan)，柱前压 30kPa，分流 比90：1，进样量 l ，柱温 90～250~C，程 序升温 8~E／min，进 样 口温度 260~E，载 气：氦 气。 (2)MS条件：EI电离源，离子能量 70eV，倍增 电压 1900v，扫描范围 30～400anlu。 用 GC—MS对超临界提取物进行分析鉴定，峰面 积归一化法定量，鉴定 出了 31个成分 ，依含量高低 主要有：3N一丁基邻羟甲基苯甲酸内酯、亚油酸、十六 酸、亚丁基二氢邻羟 甲基苯 甲酸 内酯、亚油酸乙酯 等。提取物的离子流谱图见图 1，化学成分见表 1。 t／rain 圈 l 当归超临界萃取物的总膏子漉圈 l TIC of娜pe 血l蚰 extmd ofRadix锄群 珏雠 曲岫 衰 l 当归超临界萃取物的化学成分 Tab l Chea~md伽皿p呻劬 of瓢驴曩a 删 extmd ofRadix柚譬啦雠 曲瞳 用 GC．MS对分子蒸馏的蒸出物进行分析鉴定， 维普资讯 http://www.cqvip.com 生 ! 筮 9卷 第 5期 ／'harm．，Oi／n P／．A 19 No5 Oa 2003 鉴定出 35成分，主要有 3N一丁基邻羟甲基苯 甲酸 内 酯、(一)-lepidozene、亚丁基二氢邻羟 甲基苯 甲酸 内 酯等。化学成分见表 2，离子流谱图见图2。 襄 2 蒸出物的化学成分 ．I b2 岫 I∞ 呻呻 嘲 血 pr棚 MD 圈 2 蒸出物的总■子漉圈 2 TIC pr棚 啪 3．2 超临界 c02萃取用于中药成分的提取已有很 多报道 ，此法对于脂溶性成分、对热不稳定及易氧化 成分有良好的提取效果。在本实验中，SFE提取物 的得率达到 2．15％，而传统方法提取的挥发油得率 仅为 0．2％；在化学成分上，本法主要成分为 3N一丁 基邻羟甲基苯甲酸内酯，大量不稳定的内酯成分被 保留下来，而常规蒸馏取得的挥发油的成分主要为 3，7．二甲基一l，3 E，(i_辛三烯等，检不出内酯成分，显 示出 SFE—co2在当归提取上的优越性。 3．3 由实验结果可见，超临界 co2萃取物在分子蒸 馏前后的成分大部分相同，但相对含量有较大的改 变，分子量小的相对含量提高，分子量大的相对含量 减少。提示分子蒸馏对于某些化学成分有提纯分离 的作用 ，通过优化条件 ，可使分离效果达到理想要 求。 3．4 本实验通过超临界 c02萃取 一分子蒸馏联用 对当归成分的提取分离，旨在探索出一条 中药有效 成分提取分离的新途径。与传统方法相比，该法具 有低温、高效、无污染等优点，如果能应用于中药产 业化 ，将具有非常广阔的前景。 参考文献 ： [1] 国家药典委员会 ．中华人民共和国药典(二部)[M]．北京：化学 3 讨论 [2]陈耀祖 ，陈 煜，马 1 学 01 毅 ，等．当归化学成分分析研究 [J]．高等 工业出版社 。200o． 3．1 采用 GC—Ms对提取物的成分进行分析，旨在 学校化学学报，l984，5(1)：125 方法，以及分子蒸馏前后 b 辜 。 。 归饮片挥发油成分的研 盯冲国 提取物成分 的差异与变化。 。一( 日 ： 一∞一25 回日期：2002一o4—23) (本文编辑 魏 萍) 维普资讯 http://www.cqvip.com