!铁皮石斛野生转家栽规范化种植

世界科学技术—中医药现代化★资源研究 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 收稿日期：2009-11-04 修回日期：2010-01-25 ＊ 国家科学技术部等 14部委和广东省人民政府共同主办的“2009’传统医药国际科技大会暨博览会”第六分会———“传统药物资源保护、开发与 合理利用”论文，该论文为大会学术委员会评选的优秀论文；广东省科技厅中药现代化专项（K5080016）：砂仁等 10种岭南药材规范化种植 （养殖）关键技术研究，负责人：徐鸿华。 ＊＊ 联系人：黄松，副研究员，主要研究方向：中药新药研究与开发及植化，Tel：020-39358103，E-mail：hsl318@gzhtcm.edu.cn；赖小平，本刊编委，教授， 博士生导师，广州中医药大学中药学院院长，主要研究方向：中药新药研究与开发，Tel：020-39358045，E-mail：lxp88@gzhtcm.edu.cn。 铁皮石斛野生转家栽规范化种植 （GAP）研究与产业化基地建设＊ □黄 松＊＊ （广州中医药大学 广州 510405） 刘星华 刘宏源 （广东永生源生物科技有限公司 饶平 515736） 闫 花 张桂芳 刘军民 赖小平＊＊ （广州中医药大学 广州 510405） 摘 要：目的：建立铁皮石斛规范化、产业化生产基地。方法：（1）观察与描述原植物形态特征； （2）以优良植株的茎段为外植体，运用组织培养技术研究建立铁皮石斛无性快繁体系，并研究探讨纳 米材料 TiO2、SiO2及 TiO2-SiO2组合对铁皮石斛离体再生培养的影响；（3）研究探讨移栽基质与移栽方 法对铁皮石斛试管苗移栽的影响。结果：（1）初步将铁皮石斛归为软脚与硬脚，矮杆种与高杆种；（2） 建立了铁皮石斛离体再生系统；纳米 TiO2及 SiO2对铁皮石斛侧芽及丛芽的诱导有较明显促进作用， 但不同浓度对离体培养的作用不同。低浓度的纳米 TiO2（5g·L-1）和纳米 SiO2（5g·L-1）组合可显著提高 侧芽及丛芽的发芽数，促进芽的生长，较适宜侧芽及丛芽诱导阶段，不同浓度组合均对试管苗壮苗生 根有抑制作用，不适于壮苗生根阶段使用；（3）组培苗出瓶第 2d直接移栽定植，成活率达 95%以上； 移栽 45d分蘖长新芽率达到 90%以上，18个月长度达到采收规格。结论：为铁皮石斛优质、高产栽培 及产业化基地建设提供技术支撑。 关键词：铁皮石斛 规范化种植 产业化 铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall. ex Lindl） 为兰科石斛属多年附生草本植物，具有益胃生津、 滋阴清热的功效 [1]。现代药理研究表明，铁皮石斛具 有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、扩张血管及抗 血小板凝集等作用，在临床及中药复方中被广泛应 用 [2~3]。铁皮石斛野生分布于我国云南、贵州、广东、 广西、浙江、四川等地，由于其对生境要求特殊，多 生长于高温多湿的热带、亚热带高山峻岭、悬崖峭 壁及岩石缝隙之间，生长缓慢、自身繁殖能力极低。 由于人们长期掠夺性采挖，致使其野生资源严重枯 竭，药材价格不断攀升。1987 年，国家将铁皮石斛列 为重点保护野生珍稀药材品种 [4]。鉴于铁皮石斛的 129 2010 第十二卷 第一期 ★Vol.12 No.1 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 图 1 铁皮石斛 GAP基地引种的不同种质 重要价值，为从根本上解决其资源问，将铁皮石 斛野生变家种显得尤为重要。目前，铁皮石斛生产 上多采用组织培养繁殖小苗或分株繁殖 [5]的方法， 但传统的分株、扦插等繁殖率极低，而采用铁皮石 斛茎和种子等诱导试管苗的技术上已经比较成熟， 但试管苗移栽问题始终未得到很好的解决。此外， 铁皮石斛栽植环境（温度、光照、水分等）的选择、基 质的配方组成等均是铁皮石斛移栽成功的关键因 素，目前，有关铁皮石斛试管苗人工栽培基质选用 方面有研究报导 [6~12]，但实现铁皮石斛大面积生产 尚存在一些关键技术问题有待研究解决。因此，针 对铁皮石斛生产上存在的关键技术问题，从种质鉴 定、良种繁育体系建立、栽植技术等方面开展铁皮 石斛规范化种植研究，建立其规范化、产业化种植 基地，对确保铁皮石斛资源的可持续利用具有十分 重要的意义。 广州中医药大学与广东永生源生物科技有限 公司共建“中医药产学研示范基地”，组建了铁皮石 斛课题研究小组，并在广东省饶平县新丰镇建立了 铁皮石斛规范化种植研究基地，针对目前铁皮石斛 生产上存在的问题开展了如下几方面的 研究工作。 一、种质资源的收集、鉴定 1. 方 法 通过调查，收集了广东、云南、浙江 等省道地产区的铁皮石斛种质，分区 种植于 GAP 基地的种质圃中，观察描 述各居群的植物形态特征，进行形态分 类鉴定。 2. 结 果 我们已分别收集了主要产区铁皮石斛种质 20 批，初步将其归为软脚与硬脚；矮杆种与高杆种（见 图 1）。 二、良种繁育体系的建立 1. 建立铁皮石斛离体再生系统 （1）材料。 药材采自广东永生源生物科技有限公司铁皮石 斛规范化种植基地，经广州中医药大学张丹雁教授 鉴定为兰科石斛属植物铁皮石斛 Dendrobium Can－ didum Wall.ex Lindl.。选取栽培一年生、生长健壮、无 病虫害的铁皮石斛植株作为实验材料。 （2）方法。 本研究探讨了植物激素种类及浓度、添加物种 类及浓度对铁皮石斛侧芽、丛芽诱导及增殖的影响； 外植体类型、植物激素组合对拟圆球茎诱导、增殖及 分化的影响；培养基成分、植物激素、添加物种类及 浓度对试管苗壮苗生根的影响；移栽基质及移栽方 表 1 基本培养基对侧芽诱导的影响 培养基 诱导率 （%） Ducan检验 出芽数 （个） Ducan检验 生长情况 0.05 0.01 0.05 0.01 N6 92.52±2.36 a A 1.65±0.10 a A 最好 B5 88.33±3.28 a A 1.46±0.12 ab AB 较好 MS 84.78±3.69 b A 1.18±0.15 b B 好 1/2MS 50.00±4.25 c B 0.75±0.23 c B 较差 注：Duncan's新复极差法，不同字母表示两均数间差异显著, 小写字母表示 α=0.05显著水平，大写字母表示 α=0.01显著水平。 130 世界科学技术—中医药现代化★资源研究 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 式对试管苗移栽成活率的影响。 （3）结果。 ①采用茎段成功建立了铁皮石斛离体 快繁体系。通过实验发现，基本培养基对 铁皮石斛离体培养具有非常显著的影响 （表 1，图 2），不同培养基的影响不仅表现 在铁皮石斛各培养阶段芽的诱导率、增殖 倍数、生根率及株高的不同，而且还表现 在植株的叶色和生长状态的不同。 ②在铁皮石斛离体培养中，植物激素 也起着非常重要的调控作用。铁皮石斛各 培养阶段均需添加一定的激素，但不同阶 段所需的激素种类及浓度不同（表 2）；不 同添加物在铁皮石斛离体培养中的作用不 同。5%马铃薯汁对侧芽诱导率和出芽数的 促进作用最为显著，不仅可以促进侧芽萌 发，对侧芽生长也有非常显著的促进作用， 随着马铃薯汁添加浓度的增加，侧芽生长 情况明显好转，诱导出的侧芽粗壮，嫩绿， 生长旺盛；花多多 1 号在 1g·L-1时对侧芽 诱导及生长有显著促进作用，随着添加浓 度的增加，两者均对侧芽诱导表现出显著 抑制作用。综合侧芽诱导率、出芽数及芽的 生长情况，在铁皮石斛茎段侧芽诱导培养 基中，可选择添加 7%马铃薯汁或 1g·L-1 花多多 1 号来提高侧芽诱导率及出芽数， 并促进侧芽生长（表 3）。 ③植物激素种类对铁皮石斛丛芽诱导 及增殖有较大影响。在不加激素的 MS培养 基里，培养 60d时，仅有 23.96%的侧芽从基 部长出新芽，且诱导出的小芽瘦弱，较少增 殖。BA、IBA和 NAA均能显著提高丛芽的诱 导率及增殖倍数，其中 NAA对丛芽诱导率 的促进效果明显好于 BA 和 IBA，培养 60d 时，诱导率达到 75.00%。添加物对丛芽的诱 导也有明显的促进作用。添加各浓度马铃薯 汁后丛芽诱导率均为 100%，丛芽的增殖倍 数随着添加浓度的增加不断提高，苗的生长 情况明显好转，马铃薯汁浓度在 20%时，丛 芽增殖倍数极显著高于对照组，诱导出的丛 芽粗壮、浓绿、长势好；添加 2g·L-1胰蛋白胨 后，丛芽增殖倍数显著提高，且诱导出的丛 Ⅰ-1 Ⅰ-2 Ⅰ-3 Ⅰ-4 Ⅰ-5 Ⅰ-6 Ⅰ-7 Ⅰ-8 Ⅰ-9 Ⅰ-10 图 2 铁皮石斛离体再生系统的建立 Ⅰ-1～10为铁皮石斛从离体培养到移栽成活的各个发育阶段；Ⅰ-6拟 原球茎形状；Ⅰ-7试管苗壮苗生根；Ⅰ-8用于移栽的试管苗；Ⅰ-9移 栽后成活的试管苗；Ⅰ-10生长健壮的铁皮石斛植株（一年生）。 131 2010 第十二卷 第一期 ★Vol.12 No.1 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 注：小写字母表示 α=0.05显著水平，大写字母表示 α=0.01显著水平。 芽生长良好；花宝 1号和花多多 1号对 丛芽诱导及增殖的效果同侧芽诱导阶段 相似，仅花多多 1号在 1g·L-1时对丛芽 诱导及增殖有促进作用。因此，在铁皮石 斛丛芽诱导及增殖阶段可选择添加 20%的马铃薯汁、2g·L-1 的胰蛋白胨或 1g·L-1 花多多 1 号来提高丛芽诱导率 及增殖倍数，并改善丛芽的生长情况。 通过基本培养基、植物激素及添加物的 筛选，优选出铁皮石斛丛芽诱导及增殖 阶段的最佳培养基为 N6+BA1mg·L-1+ NAA0.5mg·L-1+20%马铃薯汁。①④花 宝和花多多 1 号在 1g·L-1时对试管苗 壮苗生根有明显促进作用，试管苗的生 根率和根长均有显著提高，苗生长相对 较粗壮，当花宝或花多多 1号添加浓度 增至 2～3g·L-1时，对苗的生长产生抑 制作用，苗相对较矮小，生根少，花多多 的抑制强度大于花宝。胰蛋白胨对试管 苗壮苗生根作用不显著，苗的生长情况 与对照组比较无明显差别。 2. 纳米材料对铁皮石斛离体培养 的影响研究 （1）方法。 本研究分别考察纳米 TiO2和纳米 SiO2两种无机纳米材料的不同浓度、不 同添加方法对铁皮石斛侧芽与丛芽诱 导及增殖的影响，并考察了其对试管苗 壮苗生根的影响。 （2）结果（见表 6~8）。 ①纳米 TiO2对铁皮石斛侧 芽、丛芽的诱导及增殖有较明显 的促进作用，但促进发芽所需浓 度随着培养基的不断优化而逐 渐降低。在壮苗生根阶段添加各 浓度纳米 TiO2 后植株矮小、黄 弱、分蘖过多且生长力差，并诱 导出较多难以分化的淡黄色愈 伤组织。 ②纳米 SiO2 对铁皮石斛再 生芽的发育及小苗的生长均有 明显促进作用，苗的生长情况较 表 2 不同植物激素对侧芽诱导的影响 激素浓度 （mg·L-1） 诱导率 （%） LSD检验 出芽数 （个） LSD检验 生长情况 0.05 0.01 0.05 0.01 BA0.5 69.87±2.87 a A 0.89±0.25 a A 最好 NAA0.5 62.64±3.62 b A 0.66±0.19 ab A 较好 IBA0.5 49.56±3.75 c B 0.55±0.21 b A 稍好 2,4-D0.5 40.77±4.56 d BC 0.41±0.17 b A 最差 CK（0） 34.78±2.65 d C 0.47±0.18 b A 一般 表 3 不同添加物及其浓度对侧芽诱导的影响 添加物及浓度 （g·L-1） 诱导率 （%） LSD检验 出芽数 （个） LSD检验 生长 情况0.05 0.01 0.05 0.01 CK 0 92.55±2.87 b A 1.65±0.27 b B ++++ 花宝 1号 1 80.77±5.05 c B 1.25±0.34 c C +++ 2 65.58±4.80 d C 1.04±0.22 c CD - 3 48.38±7.00 e D 0.69±0.26 d D -- 花多多 1号 1 96.66±3.43 a A 1.84±0.20 a AB ++++ 2 62.04±6.84 d C 1.03±0.24 c CD - 3 43.57±6.43 e D 0.71±0.19 d D -- 马铃薯汁(%) 5 100.00±0.00 a A 2.04±0.24 a A +++++ 7 100.00±0.00 a A 2.00±0.23 a A ++++++ 10 100.00±0.00 a A 1.81±0.22 a A ++++ 20 96.14±3.16 a A 1.64±0.19 b B ++++ 注：--有明显抑制作用；-有抑制作用；+生长差；++生长一般；+++生长好；++++ 生长较好；+++++生长最好。 表 4 不同植物激素对丛芽诱导及增殖的影响 激素浓度 （mg·L-1） 诱导率 （%） LSD检验 增殖倍数 LSD检验 生长情况 0.05 0.01 0.01 0.05 CK（0） 23.96±3.58 c B 1.03±0.18 c B 芽较瘦弱，生长速度慢 BA0.5 67.22±3.81 b A 2.61±0.25 a A 较好，芽嫩绿，增殖较多 2,4-D0.5 20.54±4.27 c B 1.06±0.27 c B 最差，芽黄弱，部分死亡 IBA0.5 65.82±3.93 b A 2.31±0.19 b A 较好，芽嫩绿，生长旺盛 NAA0.5 75.00±3.84 a A 2.50±0.23 a A 较好，芽嫩绿，生长旺盛 表 5 不同添加物及其浓度对丛芽诱导及增殖的影响 添加物及其浓度 （g·L-1） 诱导率 （%） 增殖倍数 生长情况 CK 0 100.00±0.00 4.21±0.22 芽健壮，嫩绿，生长正常 花宝 1号 1 69.93±4.79 3.16±0.34 芽生长正常，但比对照稍矮小 2 60.66±7.04 2.57±0.57 有明显抑制作用，芽矮小，增殖较少 3 53.57±7.99 2.32±0.48 有非常明显的抑制作用，较少增殖 花多多 1号 1 100.00±0.00 4.69±0.28 芽健壮，嫩绿，生长正常，比对照稍好 2 58.07±6.63 2.28±0.46 有明显抑制作用，芽矮小，增殖较少 3 40.15±7.00 1.97±0.53 非常明显抑制作用，少部分芽产生变异 胰蛋白胨 2 100.00±0.00 4.74±0.50 丛芽健壮，嫩绿，较多增殖 马铃薯汁（%） 5 100.00±0.00 4.52±0.34 芽健壮，嫩绿，比对照稍好 7 100.00±0.00 4.87±0.42 芽健壮，嫩绿，比对照稍好 10 100.00±0.00 5.05±0.31 芽健壮，浓绿，比对照明显好 20 100.00±0.00 5.34±0.29 芽生长情况最好，芽粗壮，较多增殖 注：小写字母表示 α=0.05显著水平，大写字母表示 α=0.01显著水平。 132 世界科学技术—中医药现代化★资源研究 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 对照明显好转，但纳米 SiO2不同浓度对铁皮石斛离 体培养所起的作用不同。 ③纳米 TiO2-SiO2组合可显著提高侧芽和丛芽的 诱导率及出芽数（增殖倍数），并改善因单 独添加纳米 TiO2而对芽生长产生的不利 影响。对组合中纳米 TiO2、纳米 SiO2浓度 及两者的交互作用对侧芽诱导的影响分 别进行方差，并对差异显著者进行多 重比较分析。结果表明，纳米 TiO2浓度对 培养 10d、20d 及 30d 侧芽诱导率均有极 显著的影响，培养 30d 时，纳米 SiO2浓度 对诱导率有极显著影响。两者的交互作用 在 20d 时对诱导率有显著影响，30d 时出 现极显著影响。 3. 铁皮石斛试管苗的移栽 （1）移栽基质对试管苗移栽成活率 的影响。 不同移栽基质中铁皮石斛试管苗 的移栽成活率及苗的生长情况见表 9， 由结果可知，移栽基质对铁皮石斛试管 苗移栽成活率和苗的生长情况有非常 重要的影响，采用水苔作为移栽基质移 栽成活率最高，达 96.67%，且苗高、茎 粗壮，叶色浓绿。树皮和碎木块组合（1 ∶ 1），因透水和透气性过大而导致成活率 较低，上覆水苔可大大提高移栽成活率 （95.00%），苗的生长情况也相对较好， 苗粗壮，叶色浓绿。锯末和沙子的比例 对试管苗移栽成活率有很大影响，以锯 末 ∶沙子（3 ∶1）为佳，但上覆水苔后由于 基质透水性太差，导致根烂死，移栽成 活率大大降低，苗也较矮小。单独采用 水苔作为移栽基质移栽成活率虽然最 高，但成本较贵且栽培一年左右要重新 更换基质，不利于苗的后期生长。综合 成本和苗的生长情况，可选择树皮 ∶碎 木块（1 ∶1）组合，上覆 1cm 厚的水苔作 为移栽基质。 （2）移栽方式对试管苗移栽成活率 的影响。 以树皮 ∶碎木块（1 ∶1） 组合，上覆 1cm 厚的水苔作为移栽基质，进行不同 移栽方式对铁皮石斛试管苗移栽成活率的影响实 验，单株移栽和丛栽试管苗移栽成活率及苗的生长 情况见表 10，从实验结果可知，铁皮石斛试管苗移 表 6 侧芽诱导最佳培养基中纳米 TiO2对侧芽诱导的影响 添加浓度 （g·L-1） 侧芽诱导率（%） 出芽数 （个） 侧芽高度 （cm）10d 20d 30d CK(0) 27.58±2.27 93.38±3.26 100.00±0.00 2.03±0.15 1.97±0.18 T5 29.70±1.82 100.00±0.00 100.00±0.00 2.52±0.19 1.75±0.22 T10 28.05±2.81 93.75±3.88 100.00±0.00 2.10±0.30 1.59±0.24 T15 25.17±3.20 90.03±3.72 94.78±3.34 1.90±0.10 1.36±0.17 T20 23.28±2.06 86.12±5.45 92.33±4.62 1.73±0.13 1.34±0.13 表 7 侧芽诱导最佳培养基中纳米 SiO2对侧芽诱导的影响 添加浓度 （g·L-1） 侧芽诱导率（%） 出芽数 （个） 侧芽高度 （cm）10d 20d 30d 0 27.58±2.27 93.38±3.26 100.00±0.00 2.03±0.15 1.97±0.18 S5 29.23±1.98 100.00±0.00 100.00±0.00 2.50±0.20 2.42±0.24 S10 28.12±2.21 100.00±0.00 100.00±0.00 2.45±0.15 2.50±0.21 S15 28.03±2.17 96.26±3.26 100.00±0.00 2.20±0.18 2.56±0.15 S20 27.45±2.89 94.60±3.41 100.00±0.00 2.07±0.21 2.67±0.12 表 9 移栽基质对试管苗移栽成活率的影响 移栽基质 成活率（%） 高度 （cm） 生长情况15d 30d 90d 水苔 100.0 96.67 96.67 6.89 最好，苗高，茎粗壮，叶绿 锯末∶沙子（1∶1） 88.33 75.00 58.33 4.91 最差，苗矮小，瘦弱，生 长慢 锯末∶沙子（2∶1） 91.67 84.50 70.00 5.23 较差，苗矮小，瘦弱，生 长慢 锯末∶沙子（3∶1） 97.33 91.67 88.54 6.50 较好，苗高，但稍瘦弱 树皮∶碎木块（1∶1） 81.67 78.33 78.33 5.87 稍差，苗正常，但瘦弱 锯末∶沙子（3∶1），上 覆水苔 83.33 71.67 60.00 5.54 较差，苗矮小，生长缓慢 树皮∶碎木块（1∶1）， 上覆水苔 100.0 95.00 95.00 6.80 较好，苗高，茎粗壮，叶绿 表 8 MS附加最佳激素组合培养基中纳米 TiO2-SiO2组合对侧芽诱导的影响 添加浓度 （g·L-1） 30d诱导率 （%） LSD检验 30d出芽数 （个） LSD检验 生长情况 0.05 0.01 0.05 0.01 CK(0) 85.29±2.88 b A 1.17±0.16 a A 较好 T5-S5 94.72±2.45 a A 1.48±0.11 a A 较好 T5-S10 92.75±3.31 a A 1.42±0.20 a A 较好 T10-S5 96.15±2.78 a A 1.54±0.19 a A 差 T10-S10 92.16±3.23 a A 1.39±0.16 a A 最差 注：小写字母表示 α=0.05显著水平，大写字母表示 α=0.01显著水平。 133 2010 第十二卷 第一期 ★Vol.12 No.1 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 图 7 种植基地新扩种铁皮石斛生长情况 图 6 种植基地 3年生的铁皮石斛 图 5 不同种植方式试验 图 4 不同栽培基质种植试验 图 3 铁皮石斛架花床高密度无土基质栽培 表 10 移栽方式对试管苗移栽成活率的影响 移栽方式 成活率（%） 高度 （cm） 生长情况15d 30d 90d 单株 80.00 70.00 68.33 5.15 较差，苗矮小，生长缓慢 丛栽（3株 1丛） 100.0 96.67 96.67 6.89 苗高，茎粗壮，生长速度快 栽采用丛栽的方式较好，移栽 90d 后丛 栽苗的移栽成活率比单株移栽增加了 28.34 个百分点，苗高增加了 1.74cm，植 株长势较强、苗粗壮、叶色浓绿、新发蘖 数多；单株栽种的苗长势较差，苗矮小， 多数苗与移栽时差别不大。由此可知， 铁皮石斛具有较明显的群体效应，丛栽 效果比单株栽好。 三、栽植技术与基地建设 生产上已实现组培苗出瓶第 2d 直 接移栽定植，移栽之后 45d 分蘖长新芽 率达到 90%以上，成活率从原来的 30% 提高到 95%以上。生长 18 个月后植株长 度可达到采收规格。 我们先后开展了不同栽培基质（图 3~4）、不同栽植方式（图 5）的试验研究， 研究出模仿原生种的生态环境条件，采取 “内外遮阳塑膜大棚，架花床高密度无土 基质栽培”方式和配套技术措施，获得了 铁皮石斛大规模连片人工种植的成功（图 6~7）。目前已完成种植 50亩，每亩 3.5万 丛（17万株苗）。 四、讨 论 本文建立了铁皮石斛科学种植的技 术措施，具有成活率高、生长快、产量高等 特点。按照现代农业设施要求，搭建钢架 大棚和钢架花床，无土基质高密度种植方 式，扩大了种植规模。 运用组织培养技术初步建立了铁皮 石斛良种繁体系，但均尚需深入研究探 讨，确保优质种苗供应生产，以解决大规 模生产所需种苗问题。 铁皮石斛药材质量评价体系有待进 一步建立与完善，以监控药材生产各环 节，分析评价各影响药材质量的因素。 参考文献 1 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（2005 年 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GAP Planting of Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. and Its Industrialization Base Construction Huang Song1， Liu Xinghua2， Liu Hongyuan2，Yan Hua1，Zhang Guifang1， Liu Junmin1， Lai Xiaoping1 (1. Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China; 2. Guangzhou Yongshengyuan Biotechnology Limited Company, Raoping 515736, China) Abstract: This study aimed to establish a standardized industrialization base of Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. The morphological characteristics of the original plants were observed and described. The neuter intermediate propaga- tion system was established by plant tissue culture, using the excellent stem section as the explant, and the effects of nano-TiO2, nano-SiO2 and the combinations of nanoTiO2-SiO2 on Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. were studied in the in vitro culture. The effects of the transplantation medium and method on test-tube plantlet seedlings were also investigated. As a result, Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. was classified into the soft stem and the inflexible stem, as well as the short stem and the long stem, a regeneration system for Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. was set up, and Nano-TiO2 and nano-SiO2 were found to be implicated in promoting the lateral buds and rosette buds growth of Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. Meanwhile, different concentrations of nano-TiO2， nano-SiO2 and the comhinations of nano TiO2-SiO2 had different functions in in vitro culture of the Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. The combined use of low concentrations of nano-TiO2（5g·L-1）and nano- SiO2（g·L-1）significantly increased burgeon or promoted the bud growth. It was rather suitable for the induction stage of lateral buds and hoot clumps, but not for the strengthening plantlets and roots stage, because of the inhibition of strengthening seedling and rooting. The survival rate on the 2nd day after the culture reached up to 95% after transplantation, while the tiller germination capacity was up to 90% after 45 days. The plantlets were ready for collection after 18 months. These results may provide technical support for adequate quality, high yield cultivation and industrialization base construction of Dendrobium candidum Wall. ex Lindl. Keys: Dendrobium candidum Wall. ex Lindl; Good Agriculture Practice (GAP); Industrialization 135